一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的制备方法技术

技术编号:10669612 阅读:245 留言:0更新日期:2014-11-20 14:36
本发明专利技术涉及一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的制备方法,包括:S1:蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,超微粉碎至粒径为7~11μm的超细粉末,加入至水中,浸泡,再加热至沸腾,保持微沸,离心,取上清液即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液;S2:浓缩得浓缩液;S3:沉淀:加入乙醇,边加边搅拌,静置,离心,收集沉淀;S4:干燥:冷冻干燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖。该方法是一种简便、高效、成本低、多糖得率及含量高,且适合规模化生产的方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及,包括:S1:蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,超微粉碎至粒径为7~11μm的超细粉末,加入至水中,浸泡,再加热至沸腾,保持微沸,离心,取上清液即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液;S2:浓缩得浓缩液;S3:沉淀:加入乙醇,边加边搅拌,静置,离心,收集沉淀;S4:干燥:冷冻干燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖。该方法是一种简便、高效、成本低、多糖得率及含量高,且适合规模化生产的方法。【专利说明】
本专利技术涉及一种生物领域中的一种菌丝体多糖,具体涉及一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝 体多糖的制备方法。
技术介绍
蝙fe蛾拟青霉发酵菌丝又称为虫草发酵菌丝Cs_4 (Cs为Cordyceps sinensis的 缩写,即冬虫夏草,后边的4为菌种编号),其菌丝体含有较高含量的多糖,此多糖在保健食 品、医药等领域具有重要的作用,但目前对该蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中的多糖提取方法存在 不足使得多糖的提取率较低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供,该方法是一种简 便、高效、成本低、多糖得率及含量高,且适合规模化生产的方法,克服了现有技术中的一些 不足。 本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现: -种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的制备方法,所述制备方法包括以下步骤: S1 :蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,超微粉碎 至粒径为7?11 μ m的超细粉末,加入至水中,浸泡,再加热至沸腾,保持微沸60-120分钟, 离心;分离沉淀和上清液,取沉淀并按上述步骤重复再提取1?2次,取每次离心分离后的 上清液并合并,即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液; S2 :浓缩:将步骤S1中蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液进行减压蒸馏,浓缩至 液体和原料的比例(质量/体积)为2 : 1?4 : 1,得到浓缩液; S3 :沉淀:向步骤S2中所述的浓缩液中缓慢加入乙醇,边加边搅拌,然后室温静置 12-18小时,离心,弃上清液,收集沉淀; S4:干燥:向步骤S3中所述的沉淀中加水溶解,加热除去乙醇,然后进行冷冻干 燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖,得率大于20%。 进一步地,步骤S1中,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取的具体方法为:以蝙蝠蛾 拟青霉菌丝体为原料,超微粉碎为粉末,加入到15-20倍原料重量的水中,常温浸泡30-60 分钟,再加热至沸腾,保持微沸60-120分钟后离心;分离沉淀和上清液,取沉淀并按上述步 骤重复再提取1?2次,取每次离心分离后的上清液并合并,即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖 的粗提液。 进一步优选地,将所述蝙蝠蛾拟青霉菌丝体超微粉碎至粒径为?ο μ m的超细粉 末。 进一步优选地,常温浸泡后再加热至沸腾,保持微沸90-105分钟。 进一步优选地,所述离心的时间为20min。 进一步地,步骤S2中,将蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液浓缩至液体和原料的 比例(质量/体积)为3 : 1时为止。 进一步地,步骤S3中,所述乙醇加至乙醇含量达到70% -80%时停止。 进一步优选地,所述乙醇为无水乙醇。 本专利技术提供了,其主要具有的有益效果 为:该制备方法通过超微粉碎来破坏细胞壁再经过一些列的提取过程,得到的粗多糖得率 高,且纯多糖的得率超过20% ;该多糖对RAW264. 7巨噬细胞株释放N0有明显的促进作用; 此外,该方法是一种简便、高效、成本低且适合规模化生产的方法。 【专利附图】【附图说明】 下面根据附图对本专利技术作进一步详细说明。 图1是本专利技术实施例所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的高效液相色谱图。 【具体实施方式】 本专利技术实施例所述的,下面以具体实验 案例为例来说明【具体实施方式】,应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术, 并不用于限定本专利技术。 实施例1 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,通过超微粉 碎将颗粒细度粉碎为粒径10 μ m的超细粉末,通过超微粉碎后,称取50g超微粉碎后的粉 末,再加入1000mL蒸馏水,常温浸泡60分钟,加热至沸腾,保持微沸120分钟,8000g离心 20min ;分离沉淀和上清液,取沉淀并按上述步骤重复再提取1次,即在该沉淀中加蒸馏水、 常温浸泡、加热至沸腾,保持微沸后离心,取上清液,合并两次离心所得的上清液,即为蝙蝠 蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液。 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖粗提液的浓缩:将上述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗 提液于旋转蒸发仪中减压浓缩至l〇〇mL,得浓缩液。 乙醇沉淀:向上述浓缩液中缓慢加入无水乙醇,边加边搅拌,至乙醇含量达到 70%时,室温静置12小时,离心除去乙醇上清液,收集沉淀。 干燥:沉淀加70mL水溶解,水浴锅上挥去乙醇,置于_20°C冰箱中冻存12h后放入 冷冻干燥机中冷冻干燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖,该多糖为含有微量杂质的粗多糖; 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的得率为21. 13%。 实施例2 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,通过超微粉碎 将颗粒细度粉碎为粒径9 μ m的超细粉末,称取50g超微粉碎后的粉末,再加入800mL蒸馏 水,常温浸泡40分钟,加热至沸腾,保持微沸100分钟,8000g离心20min ;分离沉淀和上清 液,取沉淀并按上述步骤重复再提取1次,即在该沉淀中加蒸馏水、常温浸泡、加热至沸腾, 保持微沸后离心,取上清液,合并两次离心所得的上清液,即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的 粗提液。蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖粗提液的浓缩:将上述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗 提液于旋转蒸发仪中减压浓缩至l〇〇mL,得浓缩液。乙醇沉淀:向上述浓缩液中缓慢加入无 水乙醇,边加边搅拌,至乙醇含量达到75%时,室温静置15小时,离心除去乙醇上清液,收 集沉淀。干燥:沉淀加70mL水溶解,水浴锅上挥去乙醇,置于-20°C冰箱中冻存ia后放入 冷冻干燥机中冷冻干燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖,该多糖为含有微量杂质的粗多糖; 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的得率为21. 50%。 实施例3 【权利要求】1. ,其特征在于:所述制备方法包括以下步 骤: 51 :蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,超微粉碎至粒 径为7?11 μ m的超细粉末,加入至水中,浸泡,再加热至沸腾,保持微沸60-120分钟,离 心;分离沉淀和上清液,取沉淀并按上述步骤重复再提取1?2次,取每次离心分离后的上 清液并合并,即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液; 52 :浓缩:将步骤S1中蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液进行减压蒸馏,浓缩至液体 和原料的比例为2 : 1?4 : 1时为止,得到浓缩液; S3:沉淀:向步骤S2中所述的浓缩液中缓慢加入乙醇,边加边搅拌,然后室温静置 12-18小时,离心,弃上清液,收集沉淀; S4 :干燥:向步骤S3中所述的沉淀中加水溶解,加热除去残留乙醇,然后进行冷冻干 燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖,得率大于20 %。2. 根据权利要求1所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的制备方法,其特征在于:步骤S1 中,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的制备方法,其特征在于:所述制备方法包括以下步骤:S1:蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取:以蝙蝠蛾拟青霉菌丝体为原料,超微粉碎至粒径为7~11μm的超细粉末,加入至水中,浸泡,再加热至沸腾,保持微沸60‑120分钟,离心;分离沉淀和上清液,取沉淀并按上述步骤重复再提取1~2次,取每次离心分离后的上清液并合并,即为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液;S2:浓缩:将步骤S1中蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的粗提液进行减压蒸馏,浓缩至液体和原料的比例为2∶1~4∶1时为止,得到浓缩液;S3:沉淀:向步骤S2中所述的浓缩液中缓慢加入乙醇,边加边搅拌,然后室温静置12‑18小时,离心,弃上清液,收集沉淀;S4:干燥:向步骤S3中所述的沉淀中加水溶解,加热除去残留乙醇,然后进行冷冻干燥,即得蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖,得率大于20%。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:庞小博史先敏
申请(专利权)人:上海天嵩生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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