双功能肽制造技术

本发明专利技术涉及一种双功能肽，其能够激活胶原蛋白合成并且抑制基质金属蛋白酶的生成，所述肽具有包括三个肽部分A、B和C的序列：第一肽部分A，对应于重复至少三次的六肽，所述部分A能够结合到受体弹性蛋白结合蛋白，以刺激胶原蛋白合成；第二肽部分B，对应于能够用作尿激酶蛋白酶的竞争性抑制剂且被所述蛋白酶裂解的四肽；以及第三肽部分C，对应于占据所述基质金属蛋白酶的至少一个活性位以抑制所述蛋白酶的三肽。本发明专利技术进一步涉及包括所述双功能肽的化妆品和/或药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】双功能肽
本专利技术涉及一种肽，其将应用于化妆品和药物领域。本专利技术将主要应用于特别是受到皮肤老化影响的真皮组织的修复或再生领域。
技术介绍
皮肤老化或多或少是由于合成控制机制的大规模失衡以及真皮的细胞外基质的组分的降解，而真皮则构成皮肤的最内层。由此，在皮肤老化期间，在真皮的细胞外基质中，一方面观察到某些大分子(即，胶原蛋白和弹性蛋白)的合成减少，且另一方面观察到某些酶(例如，基质金属蛋白酶或MMPs)的表达的增加。后者即呈现溶胶原和弹性蛋白离解活性，并且因此导致真皮基质的大分子的降解。结果，皮肤失去色泽，表皮扩张，导致皱纹的形成。这种现象也会被外部因素放大，例如暴露于紫外线、污染物、压力，或者烟草。传统上，现有技术中已知的方案针对的是减慢皱纹的形成。这些策略包括：-去死皮(peeling)或磨皮(dermabrasion)，这是一种皮肤的侵略性疗法，以减少其厚度；-玻尿酸或肉毒杆菌毒素的抗皱注射，分别具有皱纹填充(wrinkle-filling)效应和使目标肌肉麻痹作用以暂时减少皱纹；然而，这些技术昂贵且只呈现短期效果；-表面治疗的应用，例如保湿剂、抗皱或平滑霜，可减慢皱纹的形成，但不能修正已经形成的皱纹；-基于自体干细胞的疗法，其仍然难以控制。此后几年，实验室实施了其他策略以对抗皮肤老化效应。具体地，欧洲专利申请EP1275372使用了例如N-酰基氨基酰胺衍生物的化合物。更具体地，该文献公开了一种组合物，该组合物除包括上述的N-酰基氨基酰胺以外还包括金属蛋白酶抑制蛋白，而所述金属蛋白酶则参与胶原蛋白的降解。然而，这样的方案不是最佳的，具体因为该方案一方面需要几种化合物的组合，且另一方面该方案不是积极作用在胶原蛋白的合成上。某些肽衍生物的使用也已被开发，以预防皮肤老化症状。因此，例如，已知来自FR285489的包括肽衍生物的化妆品组合物，该肽衍生物来自弹性蛋白。更具体地，该肽衍生物可具有如下序列：R1-(AA)n-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OR2，其中，-R1对应于H或包括2到22个碳的烷基链，-(AA)n对应于肽链，其中，AA由任意的氨基酸或氨基酸衍生物构成，并且其中，n在0和3之间变化，-R2对应于H或包括1到24个碳的烷基链。包括这种肽衍生物的化妆品组合物能够实现紧致以及重建的效果。然而，这样的肽衍生物或包括该衍生物的组合物不能抑制MMP蛋白酶的活性和/或表达，MMP蛋白酶参与胶原蛋白的降解，而胶原蛋白构成人体组织的细胞外基质的主要蛋白，也即真皮的主要蛋白。胶原蛋白能给予组织对张力的抵抗力。由此，上述文献中描述的肽不能防止对于保持皮肤光泽所必要的胶原蛋白的降解。还已知来自WO2006053688的组合物，其包括几种肽并且在抗皱治疗中使用。具体地，该组合中的这些肽在若干层面上参与了胶原蛋白和/或纤连蛋白的合成过程，即通过刺激这种合成。DE102004055541转而公开了包括肽的组合的组合物，以刺激生长因子TGF-β的释放，生长因子TGF-β能诱发胶原蛋白的合成。然而，这些专利文献中描述的肽具有如上所例举的相同的缺陷，即，事实上这些专利文献中所建议的序列不能降低导致细胞外基质的蛋白降解的酶的表达，并且特别是不能降低导致胶原蛋白降解的酶的表达。
技术实现思路
本专利技术通过提供一种双功能肽而能够应对现有技术的各种缺陷，该双功能肽同时具有刺激胶原蛋白的合成的性质以及抑制参与胶原蛋白的降解级联的蛋白酶的性质。为此，本专利技术涉及一种能够激活胶原蛋白合成并且抑制基质金属蛋白酶生成的双功能肽，所述肽具有包括三个肽部分A、B和C的序列：-第一肽部分A，对应于一重复至少三次的六肽，所述肽部分A能够结合到弹性蛋白结合受体蛋白以刺激胶原蛋白合成；-第二肽部分B，对应于能够用作尿激酶蛋白酶的竞争性抑制剂且能够被所述蛋白酶裂解的四肽；以及-第三肽部分C，对应于占据基质金属蛋白酶的至少一个活性位点的三肽，从而抑制所述蛋白酶。有利地，刺激胶原蛋白合成的第一肽部分A具有X1-Gly-X2-X3-Pro-Gly序列，该序列重复至少三次，其中：-X1对应于任意的氨基酸，-X2对应于选自Val、Thr、Gln、Ala和Leu的氨基酸，-X3对应于选自Ala、Leu和Ile的氨基酸。更有利地，所述肽的第一肽部分A具有Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly序列。优选地，可被蛋白酶裂解的第二肽部分B具有Arg-Yl-Arg-Y2序列，其中，Y1和Y2中的每一个对应于选自Ser、Tyr、Gly、Ala、Arg、Val和Leu的氨基酸。更优选地，所述肽的第二肽部分B具有Arg-Val-Arg-Leu序列。根据一个令人关注的实施方案，抑制基质金属蛋白酶的第三部分C具有Zl-ile-Z2序列，其中：-Z1对应于选自Gly、Ile和Leu的氨基酸，且-Z2对应于选自Leu、Phe、Ala、Ile和Val的氨基酸。甚至更有利地，所述肽的第三肽部分C具有Gly-Ile-Leu序列。根据优选的实施方案，本专利技术的肽具有对应于序列SEQIDNo.l的如下序列S1：S1：N-(Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly)n-Arg-Val-Arg-Leu-Gly-Ile-Leu-OH，其中，N和OH分别对应于所述肽的N-末端和C-末端，并且其中，n＝3。然而，本专利技术双功能肽的序列还可对应于序列SEQIDNo.2至SEQIDNo.26中的一个。优选地，本专利技术的双功能肽通过化学合成获得。此外，所述肽可有利地以冻干形式保存。有利地，本专利技术的双功能肽可用于慢性疤痕疾病的治疗，即压疮或溃疡的治疗。本专利技术的双功能肽还可用于真皮组织的修复和/或再生，即用于皮肤老化的治疗。本专利技术还涉及包括本专利技术双功能肽的化妆品和/或药物组合物。优选地，所述化妆品组合物中的双功能肽的浓度在l0μg/mL到lmg/mL之间，并且优选地基本上等于100μg/mL。本专利技术的双功能肽具有许多优势。一方面，它可刺激胶原蛋白，即，I型和III型胶原蛋白的合成。III型胶原蛋白生产的增长是尤其令人关注的；事实上，这种类型的胶原蛋白被称为“胎儿(fetal)”型胶原蛋白，因为它主要在胎儿阶段和童年时期合成。这种类型的胶原蛋白允许特别优化的组织治愈，被称为“完美”治愈。另一方面，所述肽可降低由蛋白酶造成的胶原溶解。此外，同时获得对胶原蛋白合成的刺激和对金属蛋白酶的抑制分别取决于双功能肽的肽部分A和C，双功能肽还包括肽部分B，其连接其他两个部分且能够被尿激酶裂解。由此，本专利技术肽可具有约25个氨基酸的短序列，这容易进行化学合成。附图说明本专利技术进一步的特点和优势将从以下参考附图的本专利技术的非限制性实施方案的详细描述中变得清楚，其中：-图1是本专利技术肽的作用机制的示意图。-图2是纤溶酶原/纤溶酶系统的酶级联的示意图。-图3A和3B是柱状图，分别示出I型和III型胶原蛋白的合成，所述合成通过由浓度为l00μg/ml的本专利技术肽或相同肽的片段处理过的成纤维细胞进行。-图4以柱状图的形式示出COL1A1和COL3A1基因的基因表达，COL1A1和COL3A1基因分别编码I型和III型胶原蛋白，所述I型和III型胶原蛋白培养自由本专利技术肽或相同肽的片段处理过的真皮成纤维细胞。-图5示出，取决于患者的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种双功能肽，所述双功能肽能够激活胶原蛋白的合成并且抑制基质金属蛋白酶的生成，其中，所述双功能肽具有一序列，所述序列具有三个肽部分A、B和C：‑第一肽部分A，对应于重复至少三次的六肽，所述部分A能够结合到弹性蛋白结合受体蛋白以刺激胶原蛋白合成，‑第二肽部分B，对应于能够用作尿激酶蛋白酶的竞争性抑制剂并且被所述蛋白酶裂解的四肽，以及‑第三肽部分C，对应于占据基质金属蛋白酶的至少一个活性位点的三肽，从而抑制所述蛋白酶。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.02.01 FR 12509321.一种双功能肽，所述双功能肽能够激活胶原蛋白的合成并且抑制基质金属蛋白酶的生成，其中，所述双功能肽具有一序列，所述序列具有三个肽部分A、B和C：-第一肽部分A，对应于重复至少三次的六肽，所述部分A能够结合到弹性蛋白结合受体蛋白以刺激胶原蛋白合成，其中，所述第一肽部分A具有X1-Gly-X2-X3-Pro-Gly序列，该序列重复至少三次，其中：-X1对应于任何氨基酸，-X2对应于选自Val、Thr、Gln、Ala和Leu的氨基酸，-X3对应于选自Ala、Leu和Ile的氨基酸；-第二肽部分B，对应于能够用作尿激酶蛋白酶的竞争性抑制剂并且被所述蛋白酶裂解的四肽，其中，所述第二肽部分B具有Arg-Y1-Arg-Y2序列，其中，Y1和Y2中的每一个对应于选自Ser、Tyr、Gly、Ala、Arg、Val和Leu的氨基酸，以及-第三肽部分C，对应于占据基质金属蛋白酶的至少一个活性位点的三肽，从而抑制所述蛋白酶，其中，所述第三部分C具有Z1-Ile-Z2序列，其中：-Z1对应于选自Gly、Ile和Leu的氨基酸，并且-Z2对应于选自Leu、Phe、Ala、Ile和Val的氨基酸。2.如权利要求1所述的双功能肽，其中，所述肽的所述第一肽部分A具有Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly序列。3.如权利要求1所述的双功能肽，其中，所述肽的所述第...

【专利技术属性】
技术研发人员：威廉·霍恩贝克，琼·阿蒂亚，桑德里纳·洛里默，弗兰克·安东尼斯利，
申请(专利权)人：瑞吉恩提斯国际贸易有限公司，兰斯大学，国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：法国;FR