本发明专利技术涉及一种叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒及其制备方法。本发明专利技术以叶酸和PEG对其进行功能化修饰，最后负载模型药物阿霉素制备而成，本发明专利技术增加了纳米粒的载药量，提高了药物靶向性，显著延长了血浆半衰期和平均滞留时间，进而提高了阿霉素治疗效果，本发明专利技术能够降低阿霉素的毒副作用，延长药物滞留时间并且提高药物的靶向性，从而增强其抗肿瘤疗效。本发明专利技术对于一些抗肿瘤谱广，但副作用严重，毒性大的药物具有重要的临床意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒及其制备方法，属于医药
技术介绍
阿霉素又称多柔比星（Doxrubincin,DOX），化学名为10-[（3-氨基-2,3,6-三去氧-a-L-来苏己吡喃基）-氧]-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-8-（羟乙酰基）-1-甲氧基-5,12-萘二酮。DOX是一种周期非特异性抗癌化疗药物，本品对各期细胞均有作用，但对S期的早期最为敏感，M期次之，而对G1、S和G2期有延缓作用。其作用机制在于可直接作用于DNA，插入DNA的双螺旋链，使其特征结构解旋，改变DNA的模板性质，抑制DNA聚合酶从而既抑制DNA，也抑制RNA合成。此外，本品具有形成超氧基自由基的功能，并有特殊破坏细胞膜结构和功能的作用，适用于急性白血病（淋巴细胞性和粒细胞性）、恶性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌（小细胞和非小细胞肺癌）、卵巢癌、骨及软组织肉瘤、肾母细胞瘤、膀胱癌、甲状腺癌、前列腺癌、头颈部鳞癌、睾丸癌、胃癌、肝癌等。临床应用其盐酸盐注射液，常与其它抗癌药物如长春碱、氟尿嘧啶、环磷酰胺等联合用药，已进入临床的新剂型是其脂质体制剂，最早上市的制剂是美国Sequus开发的多喜（doxil），主要用于治疗复发性卵巢癌和人体免疫缺陷病毒（HIV）引起的难以医治的卡巴氏肉瘤。目前临床应用的抗肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用明显，但却无法选择性的避开正常组织细胞，对人体造成严重的毒副作用、疗效差，而且易发生肿瘤细胞耐药性。石墨烯作为目前最理想的二维纳米材料，其基本结构单元为无机材料中最稳定的苯六元环，具有独特的二维结构和大的比表面积，以碳原子sp2杂化连接的单层石墨可以通过π-π作用负载药物。同时单层石墨上面的含氧基团可以和药物之间形成氢键作用，两种载药途径可有效提高药物负载效率减少药物用量，降低毒副作用。石墨烯作为药物载体现在研究最多的是应用PEG对其进行表面修饰，一方面可以改善其亲水性，提高生物相容性；另一方面可降低网状内皮系统对微粒的识别，延长微粒在体内的半衰期。通过实体瘤的高通透性和滞留效应（enhanced permeability and retention effect,EPR）浓集于肿瘤部位，实现靶向治疗肿瘤的目的。在对石墨烯主动靶向修饰的研究中，叶酸介导的配体-受体靶向叶酸受体高度表达的恶性肿瘤部位的研究一直是热点。研究表明叶酸作为肿瘤细胞的主动靶向头基不仅具有广谱性，而且也适用于耐药肿瘤细胞的放化疗，并且在分子大小、稳定性、免疫原型、成本等方面比其它受体如单克隆受体更具优势。目前尚无叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒及制备方法的公开报道，本专利技术采用叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载DOX制备纳米粒，增加载药量，提高药物的靶向性，显著延长血浆半衰期和平均滞留时间，提高DOX治疗效果，降低毒副作用，对阿霉素靶向制剂的临床应用具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种叶酸（FA）介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒，它具有靶向性好，载药量高，血浆半衰期和平均滞留时间长，毒副作用小，能够显著提高药物疗效等特点。本专利技术的另一个目的是提供一种叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒的制备方法。本专利技术采用叶酸介导的PEG-氧化石墨烯作为载体材料，通过磁力搅拌法制备叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒（载DOX的PEG-GO-FA纳米粒，即DOX*PEG-GO-FA），其中，阿霉素与载体材料的质量比为1～5：1。PEG-GO-FA的制备（1）氧化石墨（GO）的制备与纯化称取约1.0g石墨置于研钵中，加入约50g NaCl共同研磨约10min后，加蒸馏水将NaCl溶解，再抽滤将NaCl溶液除去，所得石墨滤饼在低于20℃的温度下放置至彻底干燥，向石墨中加入23mL质量浓度为98%的硫酸和约0.8g硝酸钠，持续搅拌12h，在温度低于20℃的条件下，加入约5.0g高锰酸钾。然后于40℃搅拌30min，于90℃搅拌90min，加入46mL的蒸馏水，提高温度至105℃，继续搅拌25min，最后加入10mL30%双氧水和140mL的蒸馏水，趁热过滤，用质量分数为5%的盐酸溶液和蒸馏水交替洗涤滤饼，直至滤液中无SO42-离子（用BaCl2溶液检测），于真空条件下干燥24h，密封保存待用。（2）GO的羧化取200mL烧杯，加入100mL去离水，称取约100mg GO加至烧杯中，超声分散，分别将5g NaOH和5g ClCH2COONa加入到烧杯中，水浴超声2h，向烧杯中加入质量分数为5%的稀盐酸洗涤、离心，反复多次直至pH呈中性，然后，将产物转移至透析袋中（MW8000～14000），以去离子水为透析介质透析48h，并每12h更换一次介质，以去除产物溶液中的所有离子。将产物溶液烘干，即得羧化的GO（GO-COOH）。（3）叶酸（FA）介导的PEG-氧化石墨烯（PEG-GO-FA）的制备称取100mg的FA加入到反应瓶中，量取16mL二甲基亚砜（DMSO）分次加入到反应瓶中并超声使FA充分溶解，加入100mg GO-COOH并超声分散后加入约214.2mg DCC（N,N'-二环己基碳二亚胺）、292mg NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）和20μL吡啶，超声活化2h，开始30min控制温度在18℃，随后2h内逐渐升温至30℃，搅拌条件下加入PEG-NH2约700mg，30℃、氮气保护下搅拌反应24h，反应结束后加入10mL蒸馏水并于4℃水浴冷却1h，20000r/min离心30min，0.8μm有机微孔滤膜过滤，将滤液转移至透析袋中于碳酸氢钠溶液（pH为8～9）中透析24h，再以去离子水为介质透析至无DMSO异味，最后将透析袋内溶液冷冻干燥，得黑色疏松粉末即为PEG-GO-FA。载DOX的功能化石墨烯（PEG-GO-FA）纳米粒（靶向纳米粒）的制备，步骤如下：称取DOX，用pH7.0的PBS溶解，按阿霉素与载体材料的质量比为1～5：1称取载体材料PEG-GO-FA混匀，置于磁力搅拌器上，室温下以300～1000r/min转速避光搅拌12～48h，经高分子超滤膜（≥100k）过滤，分别收集滤饼和滤液，滤饼反复以缓冲液冲洗，所得滤饼即为载DOX的PEG-GO-FA纳米粒（DOX*PEG-GO-FA），将产物于4℃保存。本专利技术所取得的技术效果：本专利技术增加了纳米粒的载药量，提高了药物靶向性，显著延长了血浆半衰期和本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种叶酸介导的PEG?氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒，其特征在于，采用叶酸介导的PEG?氧化石墨烯作为载体材料，通过磁力搅拌法制得叶酸介导的PEG?氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒，其中，阿霉素与载体材料的质量比为1～5：1。
【技术特征摘要】
1.一种叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒，其特征在于，采用叶
酸介导的PEG-氧化石墨烯作为载体材料，通过磁力搅拌法制得叶酸介导的PEG-
氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒，其中，阿霉素与载体材料的质量比为1～5：1。
2.根据权利要求1所述的叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒，其
特征在于，所述阿霉素与载体材料的质量比为3：1。
3.制备权利要求1所述的叶酸介导的PEG-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒的方
法，具体包括以下步骤：
称取DOX...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴琳华，纪宏宇，唐景玲，史士强，石淑贞，庄宇婷，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。