利用斑马鱼监测生活污水毒性的方法技术

本发明专利技术涉及利用斑马鱼监测生活污水毒性的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）准备试验鱼为当年或去年生鱼,平均体重为0.1-0.25g,平均体长为1.95-3cm；（2）生活污水处理；（3）试验容器为直径30cm的圆玻璃缸或2m2水池，每个污水浓度设3个平行组,取其平均结果,用无农药污染的曝气自来水作为对照；实验pH为7.25,DO(溶解氧)6.8mg/L,实验水温恒定为23±1℃，光暗比12:12(以h计)；试验前和试验中分别采取停止喂食或照常喂食的方式；（4）毒性测定：按GB/T13267-91的测定方法进行，记录死鱼数量，SPSS12.0计算斑马鱼的半数致死浓度LC50。本发明专利技术的监测方法利用对水质敏感的斑马鱼测定生活污水的污染情况，简便易行，灵敏、廉价、快速，且不产生二次的检测污水。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，其特征在于，包括如下步骤：（1）准备试验鱼为当年或去年生鱼,平均体重为0.1-0.25g,平均体长为1.95-3cm；（2）生活污水处理；（3）试验容器为直径30cm的圆玻璃缸或2m2水池，每个污水浓度设3个平行组,取其平均结果,用无农药污染的曝气自来水作为对照；实验pH为7.25,DO(溶解氧)6.8mg/L,实验水温恒定为23±1℃，光暗比12:12(以h计)；试验前和试验中分别采取停止喂食或照常喂食的方式；（4）毒性测定：按GB/T13267-91的测定方法进行，记录死鱼数量，SPSS12.0计算斑马鱼的半数致死浓度LC50。本专利技术的监测方法利用对水质敏感的斑马鱼测定生活污水的污染情况，简便易行，灵敏、廉价、快速，且不产生二次的检测污水。【专利说明】
本专利技术涉及水质监测方法，尤其涉及生活污水的生物检测方法。
技术介绍
近几十年来，随着工业的发展，产生的化学物质品种及用量与日剧增，对环境造 成的污染也日益严重，这已经引起世界各国的关注。目前，废水毒性的测定主要有理化方 法和生物学方法。传统的化学物理分析方法能定量分析污染物中主要成分的含量，但是不 能直接和全面地反映各种有毒物质对环境的综合影响。生物测试能够弥补理化检测方法的 不足，因此在水污染研究中，它已经成为监测和评价水体环境的重要手段之一。鱼类和大 型水蚤毒性实验是监测工业废水污染物综合毒性的一种简便易行的方法。目前江南地区 的生活污水污染情况严重，已经影响到水质的健康安全，但还缺少准确、有效的生物监测方 法。
技术实现思路
本专利技术克服了现有技术的不足，提供一种利用斑马鱼监测生活污水毒性，且准确、 有效的方法。为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为:利用斑马鱼监测生活污水毒性的方 法，其特征在于，包括如下步骤:(1)试验鱼准备:试验鱼为当年或去年生鱼，平均体重为0.1-0.25g，平均体长为1.95_3cm ；(2)生活污水处理:生活污水为经过简单沉淀处理的排放水，取一定体积原液采用10 的倍数连续稀释，设置各所需浓度；(3)试验条件控制:试验容器为直径30cm的圆玻璃缸或2m2水池，每个污水浓度设3 个平行组，取其平均结果，用无农药污染的曝气自来水作为对照；实验pH为7.25，D0(溶 解氧)6.8mg /L ,实验水温恒定为23±1°C,光暗比12:12(以h计)；试验前和试验中分 别采取停止喂食或照常喂食的方式；(4)毒性测定:按GB/T13267-91水质-物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性的测定方 法进行，每天观察记录死鱼数量，实验数据用SPSS12.0计算斑马鱼的半数致死浓度LC5tlt5优选的，步骤(I)中，试验鱼为孟加拉国斑马鱼鱼苗人工培育或自然生长后驯养 的。优选的，试验鱼为所述鱼苗在池塘中人工培育的，培育时一个5m2池塘放养20-50 尾，取10尾作为试验鱼。优选的，所述5m2池塘中，取健康、活跃度适中的10尾作为试验鱼。优选的，所述自来水为经1.5周以上自然曝气的江南地区自来水，自来水硬度为 GH10—11。优选的，步骤(3)中，试验前24h停止喂食，试验期间按照人工培育时平均喂食水平正常喂食。本专利技术解决了
技术介绍
中存在的缺陷，本专利技术的监测方法利用对水质敏感的斑马鱼测定生活污水的污染情况，简便易行，灵敏、廉价、快速，且不产生二次的检测污水，适合推广在生活污水或其它污水监测领域。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术作进一步描述。实施例1，包括如下步骤:(I)试验鱼准备:试验鱼为当年鱼，平均体重为0.1g，平均体长为1.95cm,在实验室内驯养I周后用于试验。(2)生活污水处理:生活污水为经过简单沉淀处理的排放水，取一定体积原液采用 10的倍数连续稀释，设置各所需浓度。(3)试验条件控制:试验容器为直径30cm的圆玻璃缸，每缸放鱼10尾。每个污水浓度设个平行组，取其平均结果，用无农药污染的曝气自来水作为对照；实验pH为 7.25，00(溶解氧)6.811^ /L，实验水温恒定为23 ± I °C，光暗比12:12 (以h计)；试验前 24h停止喂食，试验期间亦不喂食。(4)毒性测定:按GB/T13267-91水质-物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性的测定方法进行，每天观察记录死鱼数量，实验数据用SPSS12.0计算斑马鱼的半数致死浓度LC5tlt5结果随着作用时间增加，对斑马鱼的毒性增强，斑马鱼lh、24h、4h和96h LC5tl分别为 7.89%, 41.267%, 36，405% 和 4.012%。实施例2，与实施例1的区别在于:试验鱼选取去年生、平均体重为0.25g,平均体长为3cm的,较为成熟,测定更为准确。 且试验鱼为孟加拉国斑马鱼鱼苗人工培育而成，首先斑马鱼原产于孟加拉国，当地鱼苗品质正，敏感性更强，更适合试验；其次，人工培育可以去除外界各种因素的影响，增强试验的准确性。具体的，试验鱼为孟加拉国斑马鱼鱼苗在池塘中人工培育的，培育时每个5m2池塘放养20-50尾，取健康、活跃度适中的10尾作为试验鱼。有助于提高试验准确性。试验容器选用2m2水池，相比容积较小的鱼缸，能更好的模拟试验鱼试验前正常的生活环境，减少环境适应性等干扰因素对试验鱼的影响。自来水为经1.5周以上自然曝气的江南地区自来水，自来水硬度GHlO —11。步骤(3)中，试验前24h停止喂食，试验期间按照人工培育时平均喂食水平正常喂食，排除喂食因素对试验鱼的影响，除水质外尽量保证其正常生活，进一步提高测量准确度。结果随着作用时间增加，对斑马鱼的毒性也增强，斑马鱼lh、24h、4h和96h LC5tl分别为 8.9%,42.001%, 37，345% 和 4.213%。以上依据本专利技术的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关人员完全可以在不偏离本项专利技术技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项专利技术的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定技术性范围。【权利要求】1.，其特征在于，包括如下步骤:(1)试验鱼准备:试验鱼为当年或去年生鱼，平均体重为0.1-0.25g，平均体长为 1.95_3cm ；(2)生活污水处理:生活污水为经过简单沉淀处理的排放水，取一定体积原液采用10 的倍数连续稀释，设置各所需浓度；(3)试验条件控制:试验容器为直径30cm的圆玻璃缸或2m2水池，每个污水浓度设3 个平行组，取其平均结果，用无农药污染的曝气自来水作为对照；实验pH为7.25，DO(溶 解氧)6.8mg /L ,实验水温恒定为23±1°C,光暗比12:12(以h计)；试验前和试验中分 别采取停止喂食或照常喂食的方式；(4)毒性测定:按GB/T13267-91水质-物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性的测定方 法进行，每天观察记录死鱼数量，实验数据用SPSS12.0计算斑马鱼的半数致死浓度LC5tlt52.根据权利要求1所述的，其特征在于:步骤(I) 中，试验鱼为孟加拉国斑马鱼鱼苗人工培育或自然生长后驯养的。3.根据权利要求2所述的，其特征在于:试验鱼 为所述鱼苗在池塘中人工培育的，培育时一个5m2池塘放养20-50尾，取10尾作为试验鱼。4.根据权利要求3所述的，其特征在于:所述5m2 池塘中，取健康本文档来自技高网...

【技术保护点】
利用斑马鱼监测生活污水毒性的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）试验鱼准备：试验鱼为当年或去年生鱼,平均体重为0.1?0.25g?,平均体长为1.95?3cm；（2）生活污水处理：生活污水为经过简单沉淀处理的排放水，取一定体积原液采用?10的倍数连续稀释,?设置各所需浓度；（3）试验条件控制：试验容器为直径?30cm的圆玻璃缸或2m2水池，每个污水浓度设?3个平行组,取其平均结果,用无农药污染的曝气自来水作为对照；实验?pH为7.25?,DO(溶解氧)6.8mg?/L?,实验水温恒定为23±1℃，光暗比12:12(以?h计)；试验前和试验中分别采取停止喂食或照常喂食的方式；（4）毒性测定：按GB/T13267?91水质?物质对淡水鱼?(斑马鱼?)急性毒性的测定方法进行，每天观察记录死鱼数量，实验数据用SPSS12.0计算斑马鱼的半数致死浓度LC50。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晶晶，
申请(专利权)人：苏州国环环境检测有限公司，
类型：发明
国别省市：