用于在人急性白血病中诱导ＥＰＨＡ７和ＥＲＫ磷酸化的脱调节的方法和组合物技术

用于评估受试者中的病理状况的方法包括测量一种或多种标志物，其中差异表示急性成淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）或对ＡＬＬ的易感性，公开了用途和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于在人急性白血病中诱导EPHA7和ERK磷酸化的脱调节的方法和组合物专利技术人CarloΜ. Croce交叉引用相关申请本申请要求2007年8月22日提交的美国临时申请61/965，757的权益，其全部公开内容明确地通过引用合并入本文。关于联邦政府支助的研究的声明本专利技术是在美国国立卫生研究院基金(National Institutes ofHealth Grant) No. CA 128609和美国-以色列两国基金(US-IsraelBinational Grant)No. 2003223 下由政 府支助进行的。政府在本专利技术中具有某些权利。本专利技术的
和工业适用性本专利技术总地说来涉及分子生物学领域。更具体地，其涉及牵涉人急性白血病的生 物标志物(biomarker)的方法和组合物。本专利技术的某些方面包括在人急性白血病的诊断、 治疗和预后中的应用。
技术介绍
不承认本部分中公开的
技术介绍
在法律上构成了现有技术。ALLl基因(也称为MLL)由于其牵涉急性白血病，特别地婴儿急性成淋巴细胞性白 血病(ALL)和治疗相关急性髓性白血病中发生的复发性染色体易位而已被分离(11)。染色 体易位导致ALLl基因与超过50个的不同伴侣基因(partner gene)中的一个融合以及由 N-末端Alll序列和C末端伴侣蛋白组成的致白血病蛋白的产生(11)。Croce等人的美国专利5，633，136 (其明确地通过引用合并入本文)公开了用于 白血病检测和治疗的ALL-I多核苷酸。Croce等人136提供了用于牵涉ALL-I基因座中 第11号染色体上的断裂点的人白血病的诊断和治疗的方法。还公开了 ALL-I断裂点区 域，第11号染色体上的大约8kb的区域。ALL-I区域参与急性淋巴细胞性、髓单核细胞性 (mylemonocytic)、单核细胞性和髓细胞性(myelogenous)白血病中的易位。还提供了鉴定 牵涉第11号染色体上的ALL-I断裂点区域的染色体异常的探针。提供了第11号染色体上 的ALL-I基因的cDNA序列。还在两个相互易位的终产物的序列的背景中提供了 AF-4基因 的部分序列。还提供了相应于完整ALL-I基因的cDNA序列和AF-4基因的部分序列的氨基 酸序列。提供了用于检测牵涉第11号染色体上的ALL-I基因的染色体异常的探针。还描述 了用于急性白血病的诊断和治疗的单克隆抗体和用于急性白血病的治疗的反义寡核苷酸。Croce的美国专利5，567，586 (其明确地通过引用合并入本文)公开了鉴定在 ALL-I区域中具有染色体异常的实体瘤的方法。Croce' 586提供了确定实体瘤是否具有 ALL-I基因重排或ALL-I基因突变的方法。该方法包括获得实体瘤的样品和检测ALL-I基 因重排或突变在所述样品的细胞中的存在的步骤。通过Southern印迹分析、PCR扩增分析、 原位杂交分析、Northern印迹分析或DNA序列分析检测ALL-I基因重排和突变。Croce等人的美国专利5，633，135 (其明确地通过引用合并入本文)公开了由于 ALL-I区域染色体异常引起的嵌合核酸和蛋白质。Croce等人'135提供了用于牵涉ALL-I基因座中第11号染色体上的断裂点的人白血病的诊断和治疗的方法。还公开了 ALL-I断裂点区域，第11号染色体上大约8kb的区域。ALL-I区域参与急性淋巴细胞性、髓单核细胞 性、单核细胞性和髓细胞性白血病中的易位。还提供了鉴定牵涉第11号染色体上的ALL-I 断裂点区域的染色体异常的探针。还提供了第11号染色体上的ALL-I基因、第9号染色体 上的AF-9基因、以及AF-4基因的cDNA序列和相应的氨基酸序列。提供了用于检测牵涉这 些基因的染色体异常的探针。公开了参与易位的嵌合基因。还描述了用于急性白血病的诊 断和治疗的单克隆抗体以及用于急性白血病的治疗的反义寡核苷酸。Croce等人的美国专利6，040，140 (其明确地通过引用合并入本文)描述了染色体 上ALL-I基因的cDNA序列。还在两个相互易位的终产物的序列的背景中提供了 AF-4基因 的部分序列。还提供了相应于完整ALL-I基因的cDNA序列和AF-4基因的部分序列的氨基 酸序列，以及与通过分别与第4、9和19号染色体染色体易位形成的嵌合基因相关的序列。 提供了用于检测牵涉第11号染色体上的ALL-I基因的染色体异常的探针，包括用于检测通 过易位产生的嵌合基因的探针。ALL中最普遍的ALLl重排是由于t (4 ；11)染色体易位而导致的ALL1/AF4嵌合基 因。该重排导致pro-Β细胞白血病并且与婴儿和成人中极其不良的预后相关(12)。受Alll 融合蛋白脱调节(deregulate)的分子途径(14，21)仅部分被确定，但可能包括参与造血细 胞的增殖和分化的过程。尽管对治疗进行了相当多的研究，但仍然难以有效诊断和治疗ALL，患者中观察到 的死亡率表明需要改善该疾病的诊断、治疗和预防。本专利技术的概述在第一方面，本文中提供了用于评估病理状况或发生病理状况的风险的方法。该 方法包括测量来自受试者的样品中一个或多个标志物的表达特征谱，其中来自受试者的样 品中的表达特征谱与正常样品的表达特征谱的差异表示急性成淋巴细胞性白血病(ALL) 或对ALL的易感性。在特定的实施方案中，标志物至少包括一种或多种干扰(Erk)磷酸化和产生ALL/ Af4融合蛋白的细胞的生长的基因产物。在某些实施方案中，受试者的病理状况的评估包括预测受试者中发展ALL的倾 向，诊断ALL受试者，评估ALL受试者的预后，或评估ALL受试者对治疗的应答。在某些实施方案中，t(4;ll)白血病细胞中直接的EphA7敲低(knockdown)或 Alll/Af4敲低介导的EphA7抑制导致Erkl/2磷酸化的减少。在另一个方面，本文中提供了用于预测患有急性成淋巴细胞性白血病(ALL)的受 试者的存活的标志物，其中标志物包括一种或多种干扰(Erk)磷酸化和产生ALL/Af4融合 蛋白的细胞的生长的基因产物。在另一个方面，本文中提供了用于治疗携带t (4 ;11)的白血病细胞的方法，其包 括施用诱导凋亡细胞死亡的Erk磷酸化的抑制剂。在另一个方面，本文提供了用于在有此需要的受试者中上调EphA7的表达的方 法，其包括施用编码上调EphA7的表达的Alll融合蛋白的基因产物。在另一个方面，本文中提供了用于评估一个或多个促成急性成淋巴细胞性白血 病(ALL)的起始、进展、严重性、病状、攻击性、分级、活性、失能(disability)、死亡率、发病率、疾病亚分类或其他潜在的致病或病理特征中的至少一种的代谢途径的标志物，其中标 志物包括一种或多种编码ALLl融合蛋白的基因产物，其中ALLl融合蛋白与EphA7表达之 间的相关性在统计学上是高度显著的。在某些实施方案中，标志物的表达水平通过检测转录的多核苷酸或其部分的存在 来估量，其中转录的多核苷酸包含标志物的编码区。在另一个方面，本文中提供了包含一个或多个本文中所述的标志物的组合物。在另一个方面，本文中提供了用于检测癌症相关疾病的试剂，其中试剂包含含有 至少一种权利要求7的标志物的核苷酸序列或与所述标志物的核苷酸序列互补的核本文档来自技高网...

【技术保护点】
评估受试者中的病理状况或发展病理状况的风险的方法，其包括：测量来自受试者的样品中一种或多种标志物的表达特征谱，其中来自受试者的样品的表达特征谱与正常样品的表达特征谱之间的差异表示急性成淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）或对ＡＬＬ的易感性，和其中所述标志物至少包括一种或多种干扰（Ｅｒｋ）磷酸化的基因产物，所述标志物包括至少一种ＡＬＬ１融合蛋白。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：CM克罗斯，
申请(专利权)人：俄亥俄州立大学研究基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]