The invention relates to the technical field of tissue culture of Scutellaria purpurea, in particular to a tissue culture method for sterile induction of plant regeneration of the seeds of Scutellaria purpurea. The method comprises the following steps: first, selecting the seeds of Scutellaria purpurea with full grains, normal color, uniform size and strong growth, first rinsing them with deionized water for 3 minutes, then soaking them in 70% alcohol for 5 minutes, and then removing them. The bactericidal solution was treated for 6 to 10 minutes, then washed with sterile distilled water for 4 to 6 times, and placed in sterile environment for reserve. The invented tissue culture method for sterile induction of Plant Regeneration from purple flower seeds of Scutellaria baicalensis is compared with conventional technology. In the sterilization process, the seed is first immersed in 70% alcohol for 5 minutes, then disposed in the sterilization solution, which is composed of graphene solution, chitosan, montmorillonite dispersion solution and potassium permanganate.
【技术实现步骤摘要】
一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法
本专利技术涉及紫花三叉白芨组织培养
,具体涉及一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法。
技术介绍
白芨又名连及草,甘根、白给、朱兰、紫兰等为兰科白芨属多年生草本球茎植物,白芨的药用部分分为干燥块茎,其性平、微寒,味苦、甘、涩,有收敛止血功效,主要用于吐血、外伤出血、皮肤皲裂等,白芨品种大致分为两个大类,一类为紫花白芨,花紫红色,叶披针或广披针形,先端渐尖,基部下延成鞘状抱茎,包含大种、小种两小类,另一类为黄花白芨,其花黄色,叶条状披针形,紫花三叉白芨的供需量差额太大,造成大量采集和消耗植物资源,再加上南方各省的丘陵山区森林覆盖率进一步加大,也可加剧野生白芨产量年年下降,当采集和消耗量超过自然资源的再生能力时,会导致物种的濒危。现有紫花三叉白芨种子无菌诱导其植株再生技术还未完全成熟,在组培过程中种子感菌率较高,同时种子萌发率较差,因此本专利技术针对这一现状进一步的研究,完善无菌诱导植株再生技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法,包括以下步骤:步骤一,选取颗粒饱满、色泽正常、大小均一、生长健壮的紫花三叉白芨种子,先用去离子水冲洗3min,随后置于70%酒精中浸泡5min,再移置杀菌液中处理6-10min,随后采用无菌蒸馏水冲洗4-6次,置于无菌环境中备用;步骤二,将步骤一备用的种子先进行辐照处理,处理30-40s,随后接种于初代培养基MS上,置于培养室,30d后观察萌芽和生长状况;步骤三,将步骤二萌发的无菌幼苗转移到增殖培养基中,60d后再转移到生根 ...
【技术保护点】
1.一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,选取颗粒饱满、色泽正常、大小均一、生长健壮的紫花三叉白芨种子,先用去离子水冲洗3min,随后置于70%酒精中浸泡5min,再移置杀菌液中处理6‑10min,随后采用无菌蒸馏水冲洗4‑6次,置于无菌环境中备用;步骤二,将步骤一备用的种子先进行辐照处理,处理30‑40s,随后接种于初代培养基MS上,置于培养室,30d后观察萌芽和生长状况;步骤三,将步骤二萌发的无菌幼苗转移到增殖培养基中,60d后再转移到生根培养基中,培养40d后,再炼苗移栽,即可。
【技术特征摘要】
1.一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,选取颗粒饱满、色泽正常、大小均一、生长健壮的紫花三叉白芨种子,先用去离子水冲洗3min,随后置于70%酒精中浸泡5min,再移置杀菌液中处理6-10min,随后采用无菌蒸馏水冲洗4-6次,置于无菌环境中备用;步骤二,将步骤一备用的种子先进行辐照处理,处理30-40s,随后接种于初代培养基MS上,置于培养室,30d后观察萌芽和生长状况;步骤三,将步骤二萌发的无菌幼苗转移到增殖培养基中,60d后再转移到生根培养基中,培养40d后,再炼苗移栽,即可。2.根据权利要求1所述的一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法,其特征在于,所述步骤一中杀菌液制备方法为将石墨烯粉、去离子水按照3:7进行混合搅拌,配制成石墨烯溶液,随后加入石墨烯溶液总量10%的壳聚糖溶液,继续搅拌5-15min,至壳聚糖充分溶解,随后再加入质量分数为10-20%的高锰酸钾溶液,最后加入壳聚糖总量70-80%的蒙脱土分散液,搅拌均匀,即可。3.根据权利要求2所述的一种紫花三叉白芨种子无菌诱导植株再生的组培方法,其特征在于,所述蒙脱土分散液制备方法为将蒙...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄帅,
申请(专利权)人:丽江海贝瑞生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:云南,53
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