一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒，包括试剂盒，所述试剂盒底部设置有底层，所述试剂盒内部设置有装试剂瓶相配套的孔洞，且所述孔洞内包括的试剂有浓缩洗涤液、复溶液、抗体工作液、酶标记物稀释液、终止液、显色液、封闭液和标准液，且相配套的孔洞边设置有相关液体的贴条，所述底层内配套装有酶标架，所述酶标架顶部设置有孔板，所述孔板上套装有盘架，所述盘架上排列有试剂管，操作简便，检测灵敏度高，成本低，可进行一次连续进行多个样品中玉米赤霉醇残留量的测定，减少了检测样本所需要的时间。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒
本技术涉及食品检测
，具体为一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒。
技术介绍
玉米赤霉醇属雌性激素，具有维持副性征和代蛋白同化效应，除一般治疗用途外，还作为生长促进剂应用于反刍动物，直到90年代末发现食用含有Zeranol残留的植物性产品会引起人体性机能紊乱及影响第二性征的正常发育，在外部条件诱导下，还可能致癌；其次ZER排出动物体外后，还可经饮水和食物造成二次污染及环境污染，申请号：申请号201220564064.0，技术的名称：玉米赤霉醇检测试剂盒，该专利提供的技术解决方案是：该试剂盒包括固相载体、放试剂的下凹瓶位、位于下凹瓶位上的试剂瓶，固相载体上设有微孔条，微孔条包括微孔、包被层，包被层由玉米赤霉醇偶联抗原组成；试剂瓶包括装有玉米赤霉醇单克隆抗体溶液的试剂瓶、装有辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体的试剂瓶。目前国际上植物性食品中玉米赤霉醇残留仪器检测方法主要有液－质联用法和气－质联法法及液相色谱-串联质谱测定方法，此类仪器检测方法，准确度高，精密度好，可作为药残检测的最终确证，但其样本前处理复杂、检测时间长、需要昂贵的仪器设备，且对实验操作人员要求高。
技术实现思路
为了克服现有技术方案的不足,本技术提供一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒，其操作简便，检测灵敏度高，成本低，可进行一次连续进行多个样品中玉米赤霉醇残留量的测定，减少了检测样本所需要的时间，可以有效解决
技术介绍
中的问题。本技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒，包括试剂盒，所述试剂盒底部设置有底层，所述试剂盒内部设置有装试剂瓶相配套的孔洞，且所述孔洞内包括的试剂有浓缩洗涤液、复溶液、抗体工作液、酶标记物稀释液、终止液、显色液、封闭液和标准液，且相配套的孔洞边设置有相关液体的贴条，所述底层内配套装有酶标架，所述酶标架顶部设置有孔板，所述孔板上套装有盘架，所述盘架上排列有试剂管。作为本技术一种优选的技术方案，所述食品检测试剂盒在检测中采用羊抗鼠抗抗体，且附加有空白牛尿样本。作为本技术一种优选的技术方案，所述终止液采用2M浓硫酸。与现有技术相比，本技术的有益效果是：该试剂盒检测限为0.5ng/ml，添加回收率在70.0％～116.0％之间，变异系数小于20％，在2～8℃条件下可保存3个月，整个体系反应时间为：130分钟，比仪器方法（气相、液相方法等）节省很多时间，选择在结构上和玉米赤霉烯酮类似的化合物玉米赤霉酮、α-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉醇、β-玉米赤霉烯醇作为标准品进行反应，检测交叉反应率，试剂盒对玉米赤霉烯酮、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉醇的交叉反应率均较高，能够同时对玉米赤霉醇和玉米赤霉烯酮进行同步检测，在检测赤霉醇的同时，通过赤霉烯酮的交叉反应率对赤霉醇的浓度进行映射，从而能够快速准确的检测。附图说明图1为本技术的整体结构示意图；图2为本技术的酶标板结构示意图；图中：1-试剂盒；2-底层；3-浓缩洗涤液；4-贴条；5-抗体工作液；6-显色液；7-终止液；8-标准液；9-酶标架；10-盘架；11-试剂管；12-孔板；13-复溶液；14-酶标记物稀释液；15-封闭液。具体实施方式下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。以下各实施例的说明是参考附图，用以示例本技术可以用以实施的特定实施例。本技术所提到的方向和位置用语，例如「上」、「中」、「下」、「前」、「后」、「左」、「右」、「内」、「外」、「侧面」等，仅是参考附加图式的方向和位置。因此，使用的方向和位置用语是用以说明及理解本技术，而非用以限制本技术。实施例：如图1和图2所示，本技术提供了一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒，包括试剂盒1，所述试剂盒1底部设置有底层2，所述试剂盒1内部设置有装试剂瓶相配套的孔洞，且所述孔洞内包括的试剂有浓缩洗涤液3、复溶液13、抗体工作液5、酶标记物稀释液14、终止液7、显色液6、封闭液15和标准液8，且相配套的孔洞边设置有相关液体的贴条4，所述底层2内配套装有酶标架9，所述酶标架9顶部设置有孔板12，所述孔板12上套装有盘架10，所述盘架10上排列有试剂管11。其中，所述食品检测试剂盒的包被原采用玉米赤霉醇与卵清蛋白偶联的抗原，所述食品检测试剂盒的抗体采用玉米赤霉醇与蛋白质偶联抗原的单抗，且抗原稀释液为0.05M碳酸盐缓冲液，抗体工作液5为0.05M含有牛血清蛋白和保护剂的磷酸缓冲溶液；所述封闭液15含有0.5％酪蛋白、1％小牛血清，5‰叠氮钠的磷酸盐缓冲液，且其配置浓度分别小牛血清浓度0.5%、1%、2%、4%、5%作为A、B、C、D、E五种选择；所述酶标记稀释液14含有5％小牛血清和保护剂的缓冲液，其配置浓度分别小牛血清浓度2%、4%、8%、16%、30%作为A、B、C、D、E五种选择；所述食品检测试剂盒在检测中采用羊抗鼠抗抗体，且附加有空白牛尿样本；所述显色液6为四甲基联苯胺的A溶液和过氧化氢的B溶液混合而成；所述终止液7采用2M浓硫酸。本技术基于间接竞争的ELISA方法，通过相邻试剂管之间的微孔条上预包被玉米赤霉醇与卵清蛋白偶联的抗原，样本中的残留物玉米赤霉醇与微孔条上预包被的玉米赤霉醇与卵清蛋白偶联的抗原竞争抗玉米赤霉醇的抗体，加入酶标记物稀释液14，用显色液6进行TMB底物显色，样本吸光值与其所含玉米赤霉醇的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出残留物玉米赤霉醇的含量，最适包被浓度的确定1:5000，最适单抗和酶标二抗稀释倍数的确定为5000:2500，样品溶液与单抗溶液体积比例的确定为50：50，包被液的确定为B，封闭液的确定为D，酶标二抗稀释液的确定为D，单抗稀释液的确定为D，底物显色液的确定为中等浓度；对所选择的各种溶液进行综合试验，最大吸光值，IC50，空白牛尿测定值，21ng/ml添加实测值均符合要求。即可进行进一步的实验确定得出：包被条件的确定为37℃温育1h，再4℃过夜，封闭时间的确定为60min，单抗反应时间的确定为60min，酶标二抗反应时间的确定为60min，底物显色条件的确定为10min。同时在通过和玉米赤霉烯酮的同步交叉反应确定赤霉醇的检测，在抗原的制备上：将ZEN与盐酸羟胺缩合反应，引入一个新的羟基，再与琥珀酸酐反应得到具有羧基官能团的半抗原。半抗原的具体步骤:159mgZEN与盐酸羟胺在5.0ml吡啶溶液中室温搅拌12～24h，旋蒸除去吡啶和未反应的羟胺，得到粗产物，加入5.0ml四氢呋喃和200μl吡啶，室温搅拌0.5h，滴加溶于1.0ml四氢呋喃溶液中的50mg琥珀酸酐，室温反应12～24h，旋蒸除去溶剂和吡啶，柱层析纯化，得到ZEN半抗原。在抗体的制备上：将ZEN-BSA与等量福氏佐剂混合后，以皮下多点注射方式免疫Balb/c小鼠；免疫4次后摘取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒，其特征在于：包括试剂盒（1），所述试剂盒（1）底部设置有底层（2），所述试剂盒（1）内部设置有装试剂瓶相配套的孔洞，且所述孔洞内包括的试剂有浓缩洗涤液（3）、复溶液（13）、抗体工作液（5）、酶标记物稀释液（14）、终止液（7）、显色液（6）、封闭液（15）和标准液（8），且相配套的孔洞边设置有相关液体的贴条（4），所述底层（2）内配套装有酶标架（9），所述酶标架（9）顶部设置有孔板（12），所述孔板（12）上套装有盘架（10），所述盘架（10）上排列有试剂管（11）。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测玉米赤霉醇的食品检测试剂盒，其特征在于：包括试剂盒（1），所述试剂盒（1）底部设置有底层（2），所述试剂盒（1）内部设置有装试剂瓶相配套的孔洞，且所述孔洞内包括的试剂有浓缩洗涤液（3）、复溶液（13）、抗体工作液（5）、酶标记物稀释液（14）、终止液（7）、显色液（6）、封闭液（15）和标准液（8），且相配套的孔洞边设置有相关液体的贴条（4），所述底层（2）内配套装...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟明明，刘晓霞，徐静，杨敏，
申请(专利权)人：百奥森江苏食品安全科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏,32