一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法技术

一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法，属于药物分析技术领域。采用高效液相色谱法，通过响应面结合信息熵法的筛选得到桃核承气汤汤剂的最佳制备工艺。首先确定大黄酸、甘草酸以及苦杏仁苷、桂皮醛色谱条件，并进行方法学考察用于下面的含量测定；确定考察因素与水平，采用响应面法安排试验，将所测得的大黄酸、甘草酸、苦杏仁苷、桂皮醛四种成分的含量结果，进行数据处理，得到熵值，用于最佳制备方法的筛选，最终确定的最佳制备方法，并进行最佳试验验证。

【技术实现步骤摘要】
一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法
本专利技术属于中药制药分析
，具体涉及一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法。
技术介绍
桃核承气汤出自汉·张仲景所著《伤寒论》第106条:“太阳病不解，热结膀胱，其人如狂，血自下，下者愈。其外不解者，尚未可攻，当先解其外，外解已，但少腹急结者，乃可攻之，宜桃核承气汤。”由桃仁、大黄、桂枝、芒硝、甘草组成，功效在于破血化瘀，去瘀生新，主治证为由瘀血和邪热互结于下焦所致的蓄血证，症见发热谵语、小便不利、少腹急结等。组方中有活血化瘀药有桃仁，泻热软坚祛瘀药有大黄、芒硝，通经散瘀药有桂枝，益气药有甘草。方中桃仁与桂枝，属于相使配伍，破血通经；大黄与芒硝，属于相须配伍，泻热祛瘀；桃仁与大黄、芒硝，属于相使配伍，桃仁助大黄、芒硝软坚祛瘀，大黄、芒硝助桃仁破血化瘀；桃仁与甘草，属于相反相使配伍，相反者，补泻同用，桃仁破血，甘草益气，相使者，益气帅血行瘀。方药相互为用，以奏泻热祛瘀，通经益气之效。现代研究表明桃核承气汤在临床上的应用已不仅限于下焦蓄血证，还可广泛应用于多系统疾病的治疗。王历等研究发现，桃核承气汤对提高盆腔炎大鼠局部免疫力有一定的作用；对其受损的组织结构可起到修复作用，促进其代谢，恢复其正常的形态结构，进而促进细胞功能的恢复。汤忠华在常规西医治疗的基础上加用桃核承气汤治疗脑出血术后病人62例，结果总有效率95％。罗征侯应用桃核承气汤加减治疗癫狂(热结下焦证)，收效佳。现代桃核承气汤的煎煮方法为：以水煎煮方药约25min，去渣，再纳入芒硝煎煮2～3min，此方法并不能将此汤剂中的有效成分提取完全。影响汤剂提取的三个重要因素为：浸泡时间、加水量、提取时间，如何将药效成分更完全的提取出来，是汤剂制备工艺的关键技术。中药组方成分复杂，目前研究报道关于优化汤剂制备工艺多采用正交试验法并以单一有效成分为指标进行评价。此方法过于片面，因此本专利技术采用响应面法设计实验，并以大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛多个有效成分的含量为指标，采用信息熵法客观赋权，进而得到优化的制备工艺。
技术实现思路
针对现有方法的不足，本专利技术是建立一种优化桃核承气汤汤剂最佳制备工艺的方法。一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行有效成分含量测定，通过响应面结合信息熵法的筛选得到桃核承气汤汤剂的最佳制备工艺，包括以下步骤：(1)饮片选料：鉴定符合2015版药典一部相关项下规定，称取大黄60克，桃仁15克，桂枝30克，甘草30克，芒硝30克；(2)桃核承气汤水提液的制备：使用步骤(1)中饮片，浸泡一定时间，加水一定量，提取一定时间，浓缩至50mL，制备桃核承气汤的水提液。(3)液相条件的确定：采用高效液相色谱法测定目标大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛含量，使用步骤(2)中制备的水提液，用于确定液相条件；确定的测定大黄酸、甘草酸的色谱条件：DiamonsilC18(5μm,250×4.6mm)，流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液，梯度洗脱：0-20min，10％-40％乙腈；20-30min，40％-50％乙腈；30-70min，50％-10％乙腈；体积流量1.0ml/min；进样量10μL；柱温30℃；检测波长250nm，上述梯度洗脱过程中每个时间段内的乙腈占总流动相的体积百分含量是匀速提升的，如0-20min，10％-40％乙腈表示：在0-20min内，流动相中乙腈的体积百分含量从10％逐渐提高的40％；计算得到相应的大黄酸、甘草酸的含量；确定的测定苦杏仁苷、桂皮醛色谱条件：色谱柱：DiamonsilC18(5μm,250×4.6mm)，流动相为乙腈-水，梯度洗脱：0-10min，10％乙腈；10-20min，10％-20％乙腈；20-30min，20％乙腈；30-60min，20％-45％乙腈，60-70min，45％-10％乙腈；体积流量1.0ml/min；进样量10μL；柱温30℃；检测波长210nm测定苦杏仁苷，290nm测定桂皮醛。上述梯度洗脱过程中每个时间段内的乙腈占总流动相的体积百分含量是匀速提升的，如0-10min，10％乙腈；10-20min，10％-20％乙腈；表示：在0-10min内，流动相中乙腈的体积百分含量恒定为10％，在10-20min内，流动相中乙腈的体积百分含量从10％逐渐提高的200％；计算得到相应的苦杏仁苷、桂皮醛的含量。将待测试溶液中大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛的含量对应的峰面积与标准溶液的峰面积比较，计算得出大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛的含量；(4)响应面法试验设计：采用软件如DesignExpert10软件，首先确定步骤(2)中三个考察因素：浸泡时间、加水量、提取时间，每个因素三个水平，以大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛含量为响应值，运用Box-Behnken设计模型设计3因素3水平共17个试验点的响应面分析试验，并按照17组分析试验逐一进行桃核承气汤汤剂的制备，使用步骤(3)中色谱条件进行含量测定，将所得各指标结果记录至表格中；(5)应用信息熵法得到权重系数：将步骤(4)所得到的17组试验结果转化为概率矩阵，计算各项指标信息熵，得到权重系数wi，i＝1,2,3,4，依次分别对应大黄酸含量、苦杏仁苷含量、甘草酸含量、桂皮醛含量的权重系数；(6)计算综合指标M：根据步骤(5)所得权重系数，计算每组分析试验综合指标Mm＝(大黄酸含量m/大黄酸含量max)×w1+(苦杏仁苷含量m/苦杏仁苷含量max)×w2+(甘草酸含量m/甘草酸含量max)×w3+(桂皮醛含量m/桂皮醛含量max)×w4，计算17组试验的综合指标Mm，m＝1,2,3,4...17，并记录至试验结果表中；大黄酸含量max表示17组实验数据中大黄酸含量的最大数值，苦杏仁苷含量max表示17组实验数据中苦杏仁苷含量的最大数值，甘草酸含量max表示17组实验数据中甘草酸含量的最大数值，桂皮醛含量max表示17组实验数据中桂皮醛含量的最大数值。(7)最佳制备工艺的确定：应用软件如DesignExpert10软件对步骤(6)中所得数据综合指标M进行多元回合拟合分析，得综合指标M对浸泡时间(A)加水倍量(B)提取时间(C)3个变量的二次多项回归模型及方差分析与显著性检验结果；采用软件如DesignExpert10软件对所得二次多项回归模型进行分析，得桃核承气汤汤剂的最佳制备工艺及模型预测的最佳M值；对筛选出的最佳工艺进行验证求其M值，并于模型预测的最佳M值进行比较。本专利技术与现有技术相比具有以下优点：桃核承气汤是《伤寒杂病论》中辨治瘀热证的重要基础代表方，主治“热结膀胱，其人如狂……但少腹急结者。”根据原文辨证精神，既指出病变部位在膀胱，又指出病证表现在心。桃核承气汤组成中活血化瘀药有桃仁，泻热软坚祛瘀药有大黄、芒硝，通经散瘀药有桂枝，益气药有甘草。方药相互为用，以奏泻热祛瘀，通经益气之效。近年来，随着对桃核承气汤所主病位、证候、病机认识的不断深入，该方在多种疾病尤其在一些疑难杂症和急危重症的治疗中得到广泛应用，取得较满意疗效。为进一步加快桃核承气汤的现代应用，采用现代技术筛选得到桃核承气汤的最佳制备方法。采用了响应面法与信息熵法相结合的方式，进行筛选工艺研究。响应面法通过本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行有效成分含量测定，通过响应面结合信息熵法的筛选得到桃核承气汤汤剂的最佳制备工艺，包括以下步骤：(1)饮片选料：称取大黄60克，桃仁15克，桂枝30克，甘草30克，芒硝30克；(2)桃核承气汤水提液的制备：使用步骤(1)中饮片，浸泡一定时间，加水一定量，提取一定时间，浓缩至50mL，制备桃核承气汤的水提液；(3)液相条件的确定，采用高效液相色谱法测定目标大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛含量；(4)响应面法试验设计：采用软件如Design Expert10软件，首先确定步骤(2)中三个考察因素：浸泡时间、加水量、提取时间，每个因素三个水平，以大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛含量为响应值，运用Box‑Behnken设计模型设计3因素3水平共17个试验点的响应面分析试验，并按照17组分析试验逐一进行桃核承气汤汤剂的制备，使用步骤(3)中色谱条件进行含量测定，将所得各指标结果记录至表格中；(5)应用信息熵法得到权重系数：将步骤(4)所得到的17组试验结果转化为概率矩阵，计算各项指标信息熵，得到权重系数wi，i＝1,2,3,4，依次分别对应大黄酸含量、苦杏仁苷含量、甘草酸含量、桂皮醛含量的权重系数；(6)计算综合指标M：根据步骤(5)所得权重系数，计算每组分析试验综合指标Mm＝(大黄酸含量m/大黄酸含量max)×w1+(苦杏仁苷含量m/苦杏仁苷含量max)×w2+(甘草酸含量m/甘草酸含量max)×w3+(桂皮醛含量m/桂皮醛含量max)×w4，计算17组试验的综合指标Mm，m＝1,2,3,4...17，并记录至试验结果表中；大黄酸含量max表示17组实验数据中大黄酸含量的最大数值，苦杏仁苷含量max表示17组实验数据中苦杏仁苷含量的最大数值，甘草酸含量max表示17组实验数据中甘草酸含量的最大数值，桂皮醛含量max表示17组实验数据中桂皮醛含量的最大数值。(7)最佳制备工艺的确定：应用软件对步骤(6)中所得数据综合指标M进行多元回合拟合分析，得综合指标M对浸泡时间(A)加水倍量(B)提取时间(C)3个变量的二次多项回归模型及方差分析与显著性检验结果；采用软件对所得二次多项回归模型进行分析，得桃核承气汤汤剂的最佳制备工艺及模型预测的最佳M值；对筛选出的最佳工艺进行验证求其M值，并于模型预测的最佳M值进行比较。...

【技术特征摘要】
1.一种优化桃核承气汤汤剂制备工艺的方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行有效成分含量测定，通过响应面结合信息熵法的筛选得到桃核承气汤汤剂的最佳制备工艺，包括以下步骤：(1)饮片选料：称取大黄60克，桃仁15克，桂枝30克，甘草30克，芒硝30克；(2)桃核承气汤水提液的制备：使用步骤(1)中饮片，浸泡一定时间，加水一定量，提取一定时间，浓缩至50mL，制备桃核承气汤的水提液；(3)液相条件的确定，采用高效液相色谱法测定目标大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛含量；(4)响应面法试验设计：采用软件如DesignExpert10软件，首先确定步骤(2)中三个考察因素：浸泡时间、加水量、提取时间，每个因素三个水平，以大黄酸、苦杏仁苷、甘草酸、桂皮醛含量为响应值，运用Box-Behnken设计模型设计3因素3水平共17个试验点的响应面分析试验，并按照17组分析试验逐一进行桃核承气汤汤剂的制备，使用步骤(3)中色谱条件进行含量测定，将所得各指标结果记录至表格中；(5)应用信息熵法得到权重系数：将步骤(4)所得到的17组试验结果转化为概率矩阵，计算各项指标信息熵，得到权重系数wi，i＝1,2,3,4，依次分别对应大黄酸含量、苦杏仁苷含量、甘草酸含量、桂皮醛含量的权重系数；(6)计算综合指标M：根据步骤(5)所得权重系数，计算每组分析试验综合指标Mm＝(大黄酸含量m/大黄酸含量max)×w1+(苦杏仁苷含量m/苦杏仁苷含量max)×w2+(甘草酸含量m/甘草酸含量max)×w3+(桂皮醛含量m/桂皮醛含量max)×w4，计算17组试验的综合指标Mm，m＝1,2,3,4...17，并记录至试验结果表中；大黄酸含量max表示17组实验数据中大黄酸含量的最大数值，苦杏仁苷含量max表示17组实验数据中苦杏仁苷含量的最大数值，甘草酸含量max表示17组实验数据中甘草酸含量的最大数值，桂皮醛含量max表示17组实验数据中桂皮醛含量的最大数值。(7)最佳制备工艺的确定：应用软件对步骤(6)中所得数据综合指标M进行多元回合...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春花，李佳佳，顿佳颖，郑鹏，
申请(专利权)人：河北中医学院，
类型：发明
国别省市：河北,13