注射液及参麦注射液中聚山梨酯80的鉴别方法技术

本发明专利技术提供了注射液及参麦注射液中聚山梨酯80的鉴别方法。鉴别方法，包括下列步骤：步骤A：将待测注射液在90～150℃下加热，然后倒置装所述待测注射液的容器，冷却至75℃以上时，再骤冷至50℃以下，静置至聚山梨酯80完全析出；步骤B：对所述步骤A析出的聚山梨酯80皂化、柱前衍生化，然后采用色谱法检测聚山梨酯80中油酸的含量。本发明专利技术能够有效提取出注射液中的聚山梨酯80，为准确鉴别聚山梨酯80的质量建立了可靠基础，并且方法专属性强，结果可靠。

Identification of Polysorbide 80 in Injection and Shenmai Injection

The invention provides a method for identifying polysorbide 80 in injection and Shenmai injection. The identification method consists of the following steps: step A: heating the injection under 90-150 C, then inverting the container of the injection under test, cooling it above 75 C, then quenching it below 50 C, and stating it until the polysorbide 80 completely precipitates; step B: Saponification and pre-column derivatization of the polysorbide 80 precipitated from step A, and then chromatographic detection of polysorbide 80. The content of oleic acid. The method can effectively extract polysorbide 80 from injection, which establishes a reliable basis for accurately identifying the quality of polysorbide 80, and has strong specificity and reliable results.

【技术实现步骤摘要】
注射液及参麦注射液中聚山梨酯80的鉴别方法
本专利技术涉及质量标准
，尤其是涉及注射液及参麦注射液中聚山梨酯80的鉴别方法。
技术介绍
2015年中国药典增加了聚山梨酯80(供注射用)质量标准，该标准与聚山梨酯80质量标准物质基础上有较大的区别。聚山梨酯80(供注射用)标准脂肪酸组成规定：油酸组成不低于98％，肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、亚油酸、亚麻酸含量均不得过0.5％。聚山梨酯80标准物质标准脂肪酸组成规定：油酸组成不低于58％，肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、亚油酸、亚麻酸分别不得大于5.0％、16.0％、8.0％、6.0％、18.0％、4.0％。上述两种聚山梨酯80市场价格差别很大，聚山梨酯80(供注射用)价格约2000元/Kg；聚山梨酯80价格约40元/Kg。中药注射剂使用聚山梨酯80的品种较多，如：参麦注射液、生脉注射液、鱼腥草注射液等，主要用于药液的增溶。目前还没有关于中药注射剂中聚山梨酯80辅料的鉴别报道(是否为供注射用聚山梨酯80)。因此建立中药注射剂中添加的聚山梨酯80是否为供注射用辅料的方法，有助于中药注射剂中辅料添加规范性，为质量评价提供依据。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于注射液中聚山梨酯80的鉴别方法，该方法能够有效提取出注射液中的聚山梨酯80，为准确鉴别聚山梨酯80的质量建立了可靠基础。本专利技术的第二目的在于参麦注射液中聚山梨酯80的鉴别方法，该方法能够有效提取出参麦注射液中的聚山梨酯80，为准确鉴别聚山梨酯80的质量建立了可靠基础，并且方法专属性强，结果可靠。为了实现以上目的，本专利技术提供了以下技术方案：注射液中聚山梨酯80的鉴别方法，包括下列步骤：步骤A：将待测注射液在90～150℃下加热，然后倒置装所述待测注射液的容器，冷却至75℃以上时，再骤冷至50℃以下，静置至聚山梨酯80完全析出；步骤B：对所述步骤A析出的聚山梨酯80皂化、柱前衍生化，然后采用色谱法检测聚山梨酯80中油酸的含量。首先，本专利技术以油酸含量作为鉴别聚山梨酯80质量的依据，是根据市场上注射用和普通用聚山梨酯80的质量差别而定的，研究中发现两种产品的油酸含量有显著差别。检测市售聚山梨酯80油酸组成(三个厂家)，结果见下表1。从表中可以看出，不同厂家市售聚山梨酯80油酸组成含量差异大，在77％～88％范围内。表明市售聚山梨酯80油酸组成比例差异较大。表1市售聚山梨酯80油酸组成含量检测结果(n＝3)编号油酸组成含量厂家A77.9％±0.20％厂家B83.2％±0.15％厂家C85.7％±0.18％检测市售聚山梨酯(供注射用)油酸组成，结果该品油酸含量为98.8％±0.12％(n＝3)。供注射用聚山梨酯80油酸组成比例极高。综上，将油酸含量作为鉴别聚山梨酯80质量的依据。其次，现有技术仅仅公开了鉴别聚山梨酯80中脂肪酸含量的方法，并没有公开从实际药品中提取聚山梨酯80的方法。然而，对于实际产品中聚山梨酯80的鉴别，提取过程才是保证鉴别结果准确性、专属性的基础。本专利技术的以上方法克服了注射液中聚山梨酯80提取难的问题，利用聚山梨酯80起昙后在药液中分层的原理，可以轻易地将聚山梨酯80从药液中分离出来。具体地，聚山梨酯80溶液(以注射液为例)高温加热后出现起昙现象(溶液混浊)，温度恢复时可以变澄清。在实际灭菌后，起昙后的聚山梨酯80溶液，经静置，冷却，药液中会出现聚山梨酯80分布不均，出现下层多、上层少的现象，利用此现象将聚山梨酯80分离出。此外，对于鉴别标准，根据目前市场上注射液聚山梨醇80的生产情况，可采用如下标准：油酸含量大于97％时，为添加聚山梨酯80(供注射用)辅料参麦注射液；油酸含量小于90％为添加聚山梨酯80普通辅料参麦注射液。通常为了避免化学成分变质，高温加热宜采用蒸汽灭菌的手段。在本专利技术中，为提取出高纯度的聚山梨酯80，需要掌控加热温度、冷却温度等关键参数。本专利技术从注射液中提取聚山梨酯80时，宜采用安瓿瓶装，具体过程为：将待测注射液在90～150℃下加热，然后倒置装所述待测注射液的安瓿瓶，冷却至75℃以上时，再骤冷至50℃以下，静置至聚山梨酯80完全析出，此时聚山梨酯80附着于安瓿瓶头，取出即可(通常用溶剂溶解)。本专利技术步骤A的目的是使注射液的聚山梨酯80完全分层析出，因此加热时间、冷却温度区间以及静置时间均为完全析出为考察目的。本专利技术中柱前衍生化的过程与色谱法的手段相匹配，不同色谱法匹配不同的柱前衍生化法。本专利技术的鉴别方法适用于各类注射液中注射用聚山梨酯80的鉴别，例如常见的参麦注射液、生脉注射液、参附注射液等。在以上基础上，本专利技术的鉴别方法还可以进一步改进，具体如下。优选地，所述色谱法气相色谱法，色谱条件为：色谱柱：85～95％氰丙基聚硅氧烷为固定液的石英毛细管柱，起始柱温为85～95℃，以每分钟15～25℃的速率升温至150～170℃，再以每分钟1.5～2.5℃的速率升温至210～230℃，进样口温度320～360℃，检测器为氢火焰离子化检测器，温度310～350℃，理论板数按油酸甲酯峰计算在10000以上。以上气相色谱法的专属性、精密度、重现性更好，并且具有较高的回收率，检出限低。因此采用以上方法鉴别聚山梨酯80更灵敏、准确、可靠。优选地，所述色谱条件为：色谱柱：85～88％氰丙基聚硅氧烷为固定液的石英毛细管柱，优选地，起始柱温为85～90℃，以每分钟15～20℃的速率升温至160～170℃，再以每分钟1.5～2℃的速率升温至210～220℃，优选地，进样口温度320～340℃，优选地，检测器为氢火焰离子化检测器，温度310～330℃。优选地，所述检测时，采用面积归一化法计算油酸含量。采用面积归一化法计算含量简单、快捷。优选地，所述检测时所用的对照品为：肉豆蔻酸甲酯、棕榈酸甲酯、棕榈油酸甲酯、硬脂酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯以及油酸甲酯。优选地，所述皂化的方法为：在含1.5～2.5％氢氧化钠的甲醇溶液环境中，加热回流反应。采用此皂化法反应完全，能使聚山梨酯80更完全皂化。更优选地，在含2～2.5％氢氧化钠的甲醇溶液环境中，加热回流反应。优选地，所述柱前衍生化的方法为：三氟化硼甲酯化法，优选为：在含10～15％三氟化硼甲醇溶液中加热回流反应；优选地，在含10～14％三氟化硼甲醇溶液中加热回流反应；在以上条件下的柱前衍生化酯化率更高，可达到98％以上。优选地，在所述柱前衍生化之后和所述检测之前还包括：用正庚烷萃取。优选地，检测所述对照品时所用的溶剂为正庚烷。聚山梨酯80在正庚烷中的溶解度高，并且正庚烷对色谱检测的干扰小，使检测结果更准确。本专利技术上文所述的各种方案的鉴别方法适宜任意类型的注射液，例如常见的参麦注射液。对于参麦注射液，所述步骤A中的加热时间优选为10min以上；优选地，所述步骤A中所述冷却至75℃以上为冷却至75～95℃；优选地，所述步骤A中所述静置的时间为0.5小时以内。综上，与现有技术相比，本专利技术达到了以下技术效果：(1)从注射液中提取聚山梨酯80的方法简单，提取率高，纯度高；(2)鉴别注射液中聚山梨酯80的专属性强，灵敏度高、精密度高、重复性好，适用范围广，可用于参麦注射液、生脉注射液、参附注射液中聚山梨酯80的鉴别。附图说本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.注射液中聚山梨酯80的鉴别方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤A：将待测注射液在90～150℃下加热，然后倒置装所述待测注射液的容器，冷却至75℃以上时，再骤冷至50℃以下，静置至聚山梨酯80完全析出；步骤B：对所述步骤A析出的聚山梨酯80皂化、柱前衍生化，然后采用色谱法检测聚山梨酯80中油酸的含量。

【技术特征摘要】
1.注射液中聚山梨酯80的鉴别方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤A：将待测注射液在90～150℃下加热，然后倒置装所述待测注射液的容器，冷却至75℃以上时，再骤冷至50℃以下，静置至聚山梨酯80完全析出；步骤B：对所述步骤A析出的聚山梨酯80皂化、柱前衍生化，然后采用色谱法检测聚山梨酯80中油酸的含量。2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述色谱法气相色谱法，色谱条件为：色谱柱：85～95％氰丙基聚硅氧烷为固定液的石英毛细管柱，起始柱温为85～95℃，以每分钟15～25℃的速率升温至150～170℃，再以每分钟1.5～2.5℃的速率升温至210～230℃，进样口温度320～360℃，检测器为氢火焰离子化检测器，温度310～350℃，理论板数按油酸甲酯峰计算在10000以上。3.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述色谱条件为：色谱柱：85～88％氰丙基聚硅氧烷为固定液的石英毛细管柱，优选地，起始柱温为85～90℃，以每分钟15～20℃的速率升温至160～170℃，再以每分钟1.5～2℃的速率升温至210～220℃，优选地，进样口温度320～340℃，优选地，检测器为氢火焰离子化检测器，温度310～330℃。4.根据权利要求1所述的鉴别方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：董礼，吴建国，梅国荣，史琳莉，李科，田大力，
申请(专利权)人：华润三九雅安药业有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51