具有调节肠道菌群功能的复合菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及功能性食品领域，公开了具有调节肠道菌群功能的复合菌剂及其制备方法和应用。所述具有调节肠道菌群功能的复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.5‑1.5:1的格氏乳杆菌和长双歧杆菌，所述格氏乳杆菌的保藏编号为CGMCC No.15501，所述长双歧杆菌的保藏编号为CGMCC No.15503。制备上述复合菌剂的方法包括：混合格氏乳杆菌和长双歧杆菌。本发明专利技术还公开了上述复合菌剂在制备用于调节肠道菌群的功能性食品中的应用。本发明专利技术提供的复合菌剂具有良好的调节肠道菌群的作用，能够有效增加肠道有益菌群的比例。而且，还对增强免疫调节能力也具有良好的效果。

Compound microbial agents with intestinal flora regulation function, preparation method and Application

The invention relates to the field of functional food, and discloses a composite microbial agent with the function of regulating intestinal flora, a preparation method and application thereof. The composite bacterium agent with the function of regulating intestinal flora contains Lactobacillus grievis and Bifidobacterium longum with the ratio of 0.5 to 1.5:1. The preservation number of Lactobacillus grievis is CGMCC No. 15501 and the preservation number of Bifidobacterium longum is CGMCC No. 15503. The method for preparing the above-mentioned compound bacterial agent includes mixing Lactobacillus grievi and Bifidobacterium longum. The invention also discloses the application of the composite microbial agent in the preparation of functional food for regulating intestinal flora. The composite microbial agent provided by the invention has good effect of regulating intestinal flora, and can effectively increase the proportion of beneficial intestinal flora. Moreover, it also has a good effect on enhancing immune regulation ability.

【技术实现步骤摘要】
具有调节肠道菌群功能的复合菌剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及功能性食品领域，具体涉及具有调节肠道菌群功能的复合菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
肠道菌群平衡指的是在肠道中所存在的多种微生物之间所保持的比例的动态的，相对的平衡。这种平衡是肠道保持正常功能的必须因素。菌群失调(dysbacteriosis)是指机体某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度变化而超出正常范围的状态，由此产生的病症，称为菌群失调症或菌群交替症(microbialselectionandsubstitution)。菌群失调时，多引起二重感染或重叠感染(superinfection)，即在原发感染的治疗中，发生了另一种新致病菌的感染。菌群失调的发生多见于使用抗生素和慢性消耗性疾病等。临床上长期大量应用广谱抗生素后，大多数敏感菌和正常菌群被抑制或杀灭，但耐药菌则获得生存优势而大量繁殖致病，如耐药金黄色葡萄球菌引起腹泻、败血症，对抗生素不敏感的白假丝酵母菌引起鹅口疮、阴道炎、肠道和肛门感染。菌群失调可以通过物理调节，也可以通过药物调节，药物调节通常借助的是含双歧杆菌、乳杆菌或乳酸菌的药物，但是，调节效果仍有待进一步改善。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供具有调节肠道菌群功能的复合菌剂及其制备方法和应用。本专利技术的专利技术人在研究中发现格氏乳杆菌和长双歧杆菌两株菌配合时能够有效改善有益肠道菌群组成，因此，为了实现上述目的，本专利技术一方面提供了一种具有调节肠道菌群功能的复合菌剂，该复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.5-1.5:1的格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)和长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)，其中，所述格氏乳杆菌的保藏编号为CGMCCNo.15501，所述长双歧杆菌的保藏编号为CGMCCNo.15503。本专利技术第二方面提供了制备上述复合菌剂的方法，该方法包括：混合格氏乳杆菌和长双歧杆菌。本专利技术第三方面提供了上述复合菌剂在制备用于调节肠道菌群的功能性食品中的应用。本专利技术第四方面提供了调节肠道菌群的方法，该方法包括将如上所述的复合菌剂给药至受试者。本专利技术提供的复合菌剂具有良好的调节肠道菌群的作用，能够有效增加肠道有益菌群的比例。而且，还对增强免疫调节能力也具有良好的效果。生物保藏本专利技术的格氏乳杆菌于2018年3月23日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(缩写为CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏编号为CGMCCNo.15501。本专利技术的长双歧杆菌于2018年3月22日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(缩写为CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏编号为CGMCCNo.15503。附图说明图1是试验组1粪便菌群在使用复合菌剂干预前后的变化图；图2是试验组2粪便菌群在使用复合菌剂干预前后的变化图。具体实施方式在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。本专利技术提供的具有调节肠道菌群功能的复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.5-1.5:1的格氏乳杆菌和长双歧杆菌，其中，所述格氏乳杆菌的保藏编号为CGMCCNo.15501，所述长双歧杆菌的保藏编号为CGMCCNo.15503。只要按照上述方式配合使用格氏乳杆菌和长双歧杆菌即可实现本专利技术的目的，然而，根据本专利技术的优选实施方式，所述复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.9-1.1:1(最优选1:1)的格氏乳杆菌和长双歧杆菌。根据本专利技术，所述复合菌剂可以以各种常规的形态存在，例如，固体粉剂、液体制剂(如菌悬液)，根据本专利技术一种优选的实施方式，所述复合菌剂以固体粉剂的形式存在。固体粉剂可以由微生物菌体与水、甘油、脱脂奶粉、蔗糖、谷氨酸钠和维生素C等辅料，混合均匀后低温冷冻干燥而成。根据本专利技术，对复合菌剂中总活菌数的含量没有特别的要求，优选地，复合菌剂中的总活菌数为105-108CFU/g，进一步优选为106-107CFU/g(以复合菌剂的干基为基准)。本专利技术提供的制备上述复合菌剂的方法包括：混合格氏乳杆菌和长双歧杆菌。另外，本专利技术还提供了如上所述的复合菌剂在制备用于调节肠道菌群和/或增强免疫调节能力的功能性食品中的应用。在给药本专利技术的复合菌剂后，受试者粪便中的双歧杆菌、乳酸杆菌及肠球菌等有益肠道菌的组成比例均有所增加。此外，本专利技术的复合菌剂还能够增强淋巴细胞的增殖能力和NK细胞活性，并调节血清免疫球蛋白(特别是IgG2b、IgG3、IgA、IgE、IgM)和细胞因子(特别是IFN-γ和IL-12)的含量，也即能够改善免疫调节能力。根据本专利技术另一种实施方式，还提供了上述复合菌剂在制备用于调节(提高或降低)血清免疫球蛋白(特别是IgG2b、IgG3、IgA、IgE和IgM)和细胞因子(特别是IFN-γ和IL-12)中的至少一种的含量的药剂中的应用。本专利技术还提供了一种调节肠道菌群的方法，其特征在于，该方法包括将如上所述的复合菌剂给药至受试者。本专利技术中，对复合菌剂的给药量没有特别的要求，以小鼠为例，所述复合菌剂的给药量以活菌数计为103-104CFU/20g体重/天。本专利技术中，对给药的方式没有特别的限制，可以采用本领域常规的方式，例如胃肠道给药，更具体如口服、灌胃等。本专利技术中，所述受试者可以为哺乳动物和/或啮齿类动物，例如，人和/或鼠。以下将通过实施例对本专利技术进行详细描述。以下实施例中，使用的复合菌剂的组成如下所示：复合菌剂1：保藏编号为CGMCCNo.15501的格氏乳杆菌和保藏编号为CGMCCNo.15503的长双歧杆菌，二者活菌数之间的比值为1：1，总活菌含量为107CFU/g，用无菌水配制成菌悬液待用，每毫升中总活菌含量为2×103CFU；复合菌剂2：保藏编号为CGMCCNo.15501的格氏乳杆菌和保藏编号为CGMCCNo.15503的长双歧杆菌，二者活菌数之间的比值为1：1，总活菌含量为107CFU/g，用无菌水配制成菌悬液待用，每毫升中总活菌含量为2×104CFU。实施例1实验动物：健康雄性成年BABL/c小鼠140只，饲养于中国检验检疫科学研究院动物实验室：维持室温(25±2℃)，相对湿度(55±2)％，12h/12h光照，自由进食和饮水。实验分组：按照体重，利用随机数字，分为4组，分别为对照组、模型组、试验组1和试验组2，每组35只；再将每组35只小鼠按体重分为5个小组，每组7只。使用苦味酸编号，普通饲料常规饲养，适应性喂养3天后开始正式实验。建立肠道损伤模型：小鼠禁食16小时，自由饮水，除对照组外，将三硝基苯磺酸(TNBS)溶液缓慢推入小鼠结肠，并迅速堵住小鼠肛门并倒置60s。造模剂量为10mg/kg体重。干预：依据小鼠体重，每日灌胃给予样品(对照组和模型组：蒸馏水；试验组1：复合菌剂1；试验组2：复合菌剂2)进行干预，干预剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有调节肠道菌群功能的复合菌剂，其特征在于，该复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.5‑1.5:1的格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)和长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)，其中，所述格氏乳杆菌的保藏编号为CGMCC No.15501，所述长双歧杆菌的保藏编号为CGMCC No.15503。

【技术特征摘要】
1.一种具有调节肠道菌群功能的复合菌剂，其特征在于，该复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.5-1.5:1的格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)和长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)，其中，所述格氏乳杆菌的保藏编号为CGMCCNo.15501，所述长双歧杆菌的保藏编号为CGMCCNo.15503。2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其中，所述复合菌剂含有活菌数之间的比值为0.9-1.1:1的格氏乳杆菌和长双歧杆菌。3.根据权利要求1或2所述的复合菌剂，其中，所述复合菌剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：安云鹤，高丽娟，马凯，田彦捷，陈尔凝，刘悦，武会娟，
申请(专利权)人：北京市理化分析测试中心，
类型：发明
国别省市：北京,11