从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法及银柴胡氨Ⅰ的应用技术

本发明专利技术公开了银柴胡氨Ⅰ在防治炎症中的应用，属于医药应用技术领域。实验证明，中药材银柴胡中存在一种可以抗炎的化合物银柴胡氨Ⅰ，在1μM～5μM的浓度下，细胞生存率达到70%以上。通过对银柴胡进行包括预处理、提取、浓缩、萃取以及分离，富集得到银柴胡氨Ⅰ，其中，在预处理阶段，选用60～100目的银柴胡颗粒，增加提取溶剂与银柴胡的接触面，使用恒温的提取环境，进一步提高提取的效率，提高银柴胡氨Ⅰ得到率。同时，通过定温浓缩及定温萃取，进一步提高银柴胡氨Ⅰ得到率。

【技术实现步骤摘要】
从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法及银柴胡氨Ⅰ的应用
本专利技术属于医药应用
，具体涉及从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法及银柴胡氨Ⅰ的应用。
技术介绍
文献记载，在银柴胡中能够分离得到银柴胡氨Ⅰ，然而，对银柴胡氨Ⅰ的药效以及如何从中药材银柴胡中富集提取银柴胡氨Ⅰ化合物的研究却鲜有报道，现有技术中，从银柴胡中提取分离银柴胡氨Ⅰ的过程复杂，耗时耗力，且不能保证最终目标化合物银柴胡氨Ⅰ的得到率。这极大的限制了银柴胡尤其是银柴胡中有效组分银柴胡氨Ⅰ在药用领域的发展。银柴胡为石竹科植物StellariadichotomaL.var.lanceolataBge的干燥根，味甘、微寒，主产于宁夏地区，是宁夏道地药材，目前约有15万亩的种植面积。文献记载银柴胡具有清虚热，除疳热的功能，用于阴虚发热、骨蒸痨热、小儿疳热等症。银柴胡的基础研究始于上世纪六十年代，目前，已从银柴胡中分离鉴定出发现12种甾醇类、18种生物碱类、13种环肽类、17种挥发性物质和5种酚酸类物质。有文献表明，银柴胡在缓解炎症、抗变态反应、抗动脉粥样硬化以及缓解肿瘤细胞恶化方面有着显著的作用。由于银柴胡氨Ⅰ含量较少，往往被忽略或者和其他化合物一起被制成混合提取物来研究其医药学性质，这导致在对银柴胡氨Ⅰ药用价值研究的缺失，不能清楚的表明银银柴胡氨Ⅰ在治疗病症时的效果以及其表现出的细胞毒性。分离提纯银柴胡中的银柴胡氨Ⅰ并研究其药用价值将极大推进银柴胡在中药领域的应用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术公开了一种高效且高得到率从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法。本专利技术还公开了上述方法提取的银柴胡氨Ⅰ在防治炎症中的应用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法，包括以下步骤：预处理：清洗中药材银柴胡，并粉碎，筛选其中60目～100目的粉状颗粒；提取：取中药材银柴胡，投入实验室用多功能提取罐中，按预定药液比加入75％乙醇水溶液，在预定提取温度下，提取3h；浓缩：将提取产生的粗液过滤后，在预定浓缩温度下蒸发浓缩，至无醇味；萃取：对浓缩产生的浓缩液用石油醚在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，石油醚萃取相浓缩得石油醚部，石油醚萃余相用二氯甲烷在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，二氯甲烷萃取相浓缩得二氯甲烷部，对二氯甲烷部依次通过常压层析柱、硅胶柱、ODS柱进行分离，除杂后得到银柴胡氨Ⅰ；其中，所述步骤“提取”中，预定药液比为1:10，预定提取温度为65℃～90℃；所述步骤“浓缩”中，预定浓缩温度为55℃～70℃；所述步骤“萃取”中，预定萃取温度为20℃～40℃，预定萃取比为1:3～1:5。上述方法提取的银柴胡氨Ⅰ在防治炎症中的应用。优选地，应用于预防或治疗炎症时，银柴胡氨Ⅰ的量为1μM～40μM。优选地，应用于预防或治疗炎症时，银柴胡氨Ⅰ的量为1μM～5μM。由上述技术方案可知，本专利技术提供了一种从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法，为银柴胡以及银柴胡氨Ⅰ的药理药效研究提供有效的参照。从银柴胡中提取富集银柴胡氨Ⅰ的过程中，采用恒温的提取方法，采用定温浓缩和萃取，最大程度提高实验室内银柴胡氨Ⅰ分离过程的效率以及银柴胡氨Ⅰ的化合物收率。本专利技术还公开了上述所述方法提取的银柴胡氨Ⅰ应用于预防或治疗炎症，实验验证，银柴胡中含有的银柴胡氨Ⅰ在抗炎中有着显著的效果，在其含量为1μM～5μM的低剂量浓度下，抗炎活性尤为显著，数据显示，其细胞生存率达到70％以上。附图说明图1是从银柴胡中提取富集银柴胡氨Ⅰ的工艺流程图。图2是银柴胡二氯甲烷部分离流程图。图3是银柴胡氨Ⅰ作为抗炎药物时细胞生存率柱状图。具体实施方式以下结合具体实施例，对本专利技术的技术方案做进一步说明。银柴胡氨Ⅰ(dichotomideI)存在与中药材银柴胡中，其分子式为：C18H17N3O4，结构式如下：银柴胡氨Ⅰ为黄色粉末，溶于二甲基亚砜(DMSO)。请参看图3，专利技术人在实验中发现，银柴胡氨Ⅰ虽在银柴胡中含量较低，但其在抗炎的过程中发挥着积极且有效的作用，实验证明，银柴胡氨Ⅰ在浓度为1μM～5μM时，具有优秀的抗炎活性，数据显示，其细胞生存率达到70％以上，且细胞毒性较弱，银柴胡氨Ⅰ在浓度为1μM～40μM时，表现出优秀的抗炎活性。银柴胡氨Ⅰ在银柴胡中的含量较低，在提取富集过程中，需要从各个方面，不断提高银柴胡氨Ⅰ的提取效率以及最终的银柴胡氨Ⅰ的得到率。请参看图1，在一较佳实施例中，采用恒温的提取氛围，采用定温定萃取比的萃取分离氛围，有效的提高了从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的提取效率，也有效的提高了银柴胡氨Ⅰ的得到率。例如，采用如下的生产工艺流程：预处理：清洗中药材银柴胡，并粉碎，筛选其中60目～100目的粉状颗粒；提取：取中药材银柴胡，投入实验室用多功能提取罐中，按预定药液比加入75％乙醇水溶液，在预定提取温度下，提取3h；浓缩：将提取产生的粗液过滤后，在预定浓缩温度下蒸发浓缩，至无醇味；萃取：对浓缩产生的浓缩液用石油醚在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，石油醚萃取相浓缩得石油醚部，石油醚萃余相用二氯甲烷在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，二氯甲烷萃取相浓缩得二氯甲烷部，二氯甲烷萃余相用乙酸乙酯在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，乙酸乙酯萃取相浓缩得乙酸乙酯部，对乙酸乙酯部依次通过常压层析柱、硅胶柱、ODS柱、LH-20凝胶柱色谱及PHPLC进行分离，除杂后得到银柴胡氨Ⅰ；其中，所述步骤“提取”中，预定药液比为1:10，预定提取温度为65℃～90℃；所述步骤“浓缩”中，预定浓缩温度为55℃～70℃；所述步骤“萃取”中，预定萃取温度为20℃～40℃，预定萃取比为1:3～1:5。作为优选，所述步骤“提取”中，预定提取温度为75℃。作为优选，所述步骤“浓缩”中，预定浓缩温度为55℃。作为优选，所述步骤“萃取”中，预定萃取温度为25℃。作为优选，所述步骤“萃取”中，预定萃取比萃取液:萃取剂依次分别为1:3、1:3、1:4。专利技术人还意外的发现，一定的真空度有益于银柴胡氨Ⅰ从银柴胡的分离效率，在上述实施例中，专利技术人选取了65KPaA～95KPaA(表压力，下同)的压力，即6KPaA～36KPaA的真空度来从银柴胡中分离提取银柴胡氨Ⅰ，银柴胡氨Ⅰ的最终得到量显著提高，同时，提取效率也得到了有效的提升。下面通过具体实验过程，详细说明从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的工艺方法以及银柴胡氨Ⅰ作为抗炎药物的应用。一、从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ1、取银柴胡共40kg，清洗后进行粉碎，筛选其中60～100目的粉状颗粒，每次3kg加入实验室用多功能提取罐中，加入75％乙醇水溶液30kg(药液比1:10)，在65℃提取温度下进行提取，提取时间为3h/次。将所有提取完成得到的粗液在55℃浓缩温度下进行浓缩，直至无醇味，所得到的浓缩产物为银柴胡的总提取物。取上述得到的总提取物部分，首先用石油醚(分析纯度)在25℃萃取温度下进行静置萃取，萃取比(萃取液：萃取剂，下同)为1:3，萃取完成后，萃取相在55℃萃取温度下浓缩得银柴胡的石油醚部；萃余相接着用二氯甲烷(分析纯)在相同萃取温度下进行静置萃取，萃取比为1:3，萃取完成后，萃取相在相同温度下浓缩得银柴胡的二氯甲烷部；萃余相接着用乙酸乙酯(分析纯)在相同温度下进行静置萃取，萃取比为1:4，萃取完成后，萃取相本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法，其特征在于，包括以下步骤：预处理：清洗中药材银柴胡，并粉碎，筛选其中60目～100目的粉状颗粒；提取：取中药材银柴胡，投入实验室用多功能提取罐中，按预定药液比加入75%乙醇水溶液，在预定提取温度下，提取3h；浓缩：将提取产生的粗液过滤后，在预定浓缩温度下蒸发浓缩，至无醇味；萃取：对浓缩产生的浓缩液用石油醚在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，石油醚萃取相浓缩得石油醚部，石油醚萃余相用二氯甲烷在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，二氯甲烷萃取相浓缩得二氯甲烷部，对二氯甲烷部依次通过常压层析柱、硅胶柱、ODS柱进行分离，除杂后得到银柴胡氨Ⅰ；其中，所述步骤“提取”中，预定药液比为1:10，预定提取温度为65℃～90℃；所述步骤“浓缩”中，预定浓缩温度为55℃～70℃；所述步骤“萃取”中，预定萃取温度为20℃～40℃，预定萃取比为1:3～1:5。

【技术特征摘要】
1.一种从银柴胡中提取银柴胡氨Ⅰ的方法，其特征在于，包括以下步骤：预处理：清洗中药材银柴胡，并粉碎，筛选其中60目～100目的粉状颗粒；提取：取中药材银柴胡，投入实验室用多功能提取罐中，按预定药液比加入75%乙醇水溶液，在预定提取温度下，提取3h；浓缩：将提取产生的粗液过滤后，在预定浓缩温度下蒸发浓缩，至无醇味；萃取：对浓缩产生的浓缩液用石油醚在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，石油醚萃取相浓缩得石油醚部，石油醚萃余相用二氯甲烷在预定萃取比和萃取温度下进行萃取，二氯甲烷萃取相浓缩得二氯甲烷部，对二氯甲烷部依次通过常压层析柱、硅胶柱、ODS柱进行分离，除杂后得到银柴胡氨Ⅰ；其中，所述步骤“提取”中，预定药液比为1:10，预定提取温度为65℃～90℃；所述步骤“浓缩”中，预定浓缩温度为55℃～70℃；所述步骤“萃取”中，预定萃取温度为2...

【专利技术属性】
技术研发人员：付雪艳，陈容，郭东燕，董琳，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏,64