鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物、其制法及其医药用途制造技术

一种鬼臼毒素‑刺芒柄花素缀合物(I)，其合成方法及其医药用途。药理实验结果显示，本发明专利技术物能够显著抑制多种肿瘤细胞的恶性增殖，可用于预防或治疗肿瘤相关疾病。

【技术实现步骤摘要】
鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物、其制法及其医药用途
本专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一种鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物(I)，它们的合成方法及其在预防或治疗肿瘤相关疾病的药物中的用途。
技术介绍
鬼臼毒素是一种木脂类天然产物，分离自小檗科植物，如八角莲、桃儿七等，具有祛风除湿、活血化淤、解毒的功效，民间主要用来治疗痈肿，疔疮，跌打损伤和蛇咬伤等。现代药理学研究表明，鬼臼毒素具有显著的生物学活性，如抗病毒、杀虫和抗肿瘤等。鬼臼毒素能够结合到微管蛋白的秋水仙碱结合位点，抑制其生物学功能，阻滞细胞的有丝分裂，促进肿瘤细胞的死亡。但是，鬼臼毒素具有较强的毒副作用，如胃肠道反应、神经紊乱等。因此，鬼臼毒素临床应用较为局限，主要作为外用药，治疗尖锐湿疣、多发性浅表性上皮瘤病等。近年来，为了得到活性优异，毒副作用较低的抗肿瘤先导化合物，人们制备了大量鬼臼毒素衍生物，例如糖苷衍生物依托泊苷和替尼泊苷已作为一线用药，治疗小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经母细胞瘤、卵巢癌、胃癌等(Medicinalresearchreviews2015,35,1；Expertopinionontherapeuticpatents2015,25,1025)。刺芒柄花素是一种豆科植物中含有的异黄酮类化合物，具有多种重要的药理活性，如抗菌、抗癌、抗真菌和降胆固醇等。近年来的研究显示，刺芒柄花素还具有抗炎、神经保护和降糖等活性(Biomedicine&Pharmacotherapy2018,106,349；CancerLetters2018,431,123；ExperimentalBiologyandMedicine2017,242,223)。为了发现抗肿瘤活性强、结构新颖的先导化合物，我们利用药物化学领域的药物拼合原理，将具有抗肿瘤活性的天然产物鬼臼毒素和刺芒柄花素两个分子进行拼合，得到了结构新颖的鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物。
技术实现思路
本专利技术在药物化学领域的目的意义，具体提供一种鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物(I)，其合成方法及其医药用途。药理实验结果表明，本专利技术物对人卵巢癌细胞(SKOV3)、人肝癌细胞(HepG2)、人宫颈癌细胞(HeLa)和人肺癌细胞(A549)有显著的抗增殖活性。因此，本专利技术的鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物，如化学结构式(I)化合物可用于预防或治疗肿瘤相关疾病。本专利技术的化合物通式(I)如下：其中n代表：1、2、3、4或5。本通式(I)所示化合物的制备方法如下：其中n代表：1、2、3、4或5；A代表反应条件：碱为三乙胺或吡啶；溶剂为二氯甲烷或三氯甲烷；温度为15～30℃；B代表反应条件：碱为碳酸钾或碳酸铯；溶剂为N,N-二甲基甲酰胺或乙腈；催化剂为碘化钾；温度为60～100℃。药理实验结果证明，本专利技术物能够有效地抑制多种人源肿瘤细胞株的恶性增殖。以下是本专利技术化合物的药理活性测试方法及结果：MTT法实验方法：将各肿瘤细胞株以细胞数为1500个/孔，接种于96孔板，37℃，5％CO2条件培养24小时后，弃去原有培养基，加入不同浓度梯度的含药培养基，同时设阴性对照孔和空白对照孔，孵育72小时，每孔加入5mg/mLMTT溶液20μL，继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃掉孔内培养上清液，每孔加二甲基亚砜150μL，振荡30秒。用酶标仪在570nm处测定其吸光度，根据细胞存活率计算细胞抑制率，并计算IC50。体外抗肿瘤活性测试结果如下：表1本专利技术化合物的体外抗肿瘤活性实验结果表明，本专利技术物对人卵巢癌细胞(SKOV3)、人肝癌细胞(HepG2)、人宫颈癌细胞(HeLa)和人肺癌细胞(A549)具有显著的抗增殖活性。其中，化合物I-1的抗肿瘤活性较为强烈，对四种肿瘤细胞的IC50值都在纳摩尔级。化合物I-1对A549细胞的抑制活性强于鬼臼毒素，对HepG2和HeLa细胞的抑制活性与鬼臼毒素相当。具体实施方式本专利技术所述的鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物、其制法及其医药用途，其实施方式：仪器与试剂质谱仪为ThermoQExactive型，核磁共振仪为Agilent400型，其它所用试剂为分析纯。下面的实施例用于具体说明本专利技术物的制备，但本专利技术并不局限于下列实施例。实施例1：刺芒柄花素-7-乙酰基-4-鬼臼毒素(I-1)的制备将0.1mmol鬼臼毒素(II)、0.5mmol三乙胺加入到5mL二氯甲烷中，反应液搅拌溶解。0℃下，缓慢滴加0.25mmol氯乙酰氯。滴毕，室温反应1小时，饱和氯化铵溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗涤一次，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，减压除去溶剂，得到中间体粗品。将上述得到的粗品、0.105mmol刺芒柄花素(III)、0.1mmol碳酸钾和催化量的碘化钾溶解在3mL的N,N-二甲基甲酰胺中，氩气保护下，反应液加热至100℃，搅拌反应2小时。冷却后，反应液滴加到饱和食盐水中，二氯甲烷萃取第三次，有机层水洗两次，饱和食盐水洗涤一次，无水硫酸钠干燥过夜，抽滤，减压除去溶剂，得到产物粗品。经过柱层析纯化，得到白色固体刺芒柄花素-7-乙酰基-4-鬼臼毒素(I-1)，收率85％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.25(d,J＝8.8Hz,1H),7.92(d,J＝5.2Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),7.01(d,J＝9.2Hz,1H),6.97(d,J＝8.4Hz,2H),6.85(s,1H),6.56(s,1H),6.52(s,1H),6.35(s,2H),6.01(d,J＝8.8Hz,1H),5.94(s,2H),4.86(d,J＝5.2Hz,1H),4.59(d,J＝3.2Hz,1H),4.49-4.35(m,2H),4.20(t,J＝9.6Hz,1H),3.82(s,3H),3.79(s,3H),3.74(s,6H),2.95-2.86(m,2H)；13CNMR(100MHz,CDCl3)δ176.78,175.66,173.27,168.56,161.49,159.62,157.57,153.17,152.64,152.19,148.37,147.61,137.15,134.51,132.52,130.06,128.45,127.06,125.05,123.85,119.44,114.11,113.98,109.79,107.99,106.69,105.37,101.72,101.28,75.20,71.03,65.26,60.76,56.31,56.14,55.33,45.50,43.59,38.47；HRMS-ESI(m/z):calcdforC40H35O13[M+H]+723.2072,found723.2063.实施例2：刺芒柄花素-7-丁酰基-4-鬼臼毒素(I-2)的制备用4-氯丁酰氯代替氯乙酰氯，按照实施例1所述的方法，其余所需原料和试剂同实施例1，得白色固体刺芒柄花素-7-丁酰基-4-鬼臼毒素(I-2)，收率71％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(d,J＝8.8Hz,1H),7.90(s,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),6.96(d,J＝8.4Hz,3H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.73(s,1H),6.37(s,2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鬼臼毒素‑刺芒柄花素缀合物，其特征在于：其结构式如式(I)所示：

【技术特征摘要】
1.一种鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物，其特征在于：其结构式如式(I)所示：其中n代表：1、2、3、4或5。2.如权利要求1中通式(I)所示的鬼臼毒素-刺芒柄花素缀合物的合成方法，其特征如下：其中n代表：1、2、3、4或5；A代表反应条件：碱为三乙胺或吡...

【专利技术属性】
技术研发人员：王京，杨成莉，张磊，徐应淑，陈永正，
申请(专利权)人：遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52