一种香果树种苗的繁殖方法技术

本发明专利技术公开了一种香果树种苗的繁殖方法。即以香果树茎尖为外植体，消毒后接种于特定的丛生芽诱导培养基中诱导形成丛生芽；将外植体上形成的丛生芽分成单芽，转入特定的增殖培养基中进行增殖继代培养；将增殖继代培养得到的丛生芽分成单个的芽苗，再将芽苗转到特定的生根培养基中促使其生根，得到香果树试管苗，然后将香果树试管苗经炼苗培养，得到香果树种苗。本发明专利技术的香果树种苗的繁殖方法，具有繁殖速度快、成活率高等特点，可用于香果树种苗的规模化生产。

Breeding method of seedlings of fragrant fruit tree

The invention discloses a propagation method of seedlings of fragrant fruit trees. In other words, the stem tips of fragrant fruit trees were used as explants and inoculated in a specific induction medium of cluster buds after disinfection to induce cluster buds; the cluster buds formed on the explants were divided into single buds and transferred to a specific proliferation medium for proliferation and subculture; the cluster buds obtained from proliferation and subculture were divided into single bud seedlings, and then the bud seedlings were subdivided into single bud seedlings. The test-tube seedlings of fragrant fruit trees were obtained by transferring them to a specific rooting medium, and then the test-tube seedlings of fragrant fruit trees were cultured to obtain fragrant fruit seedlings. The propagation method of the fragrant fruit tree seedlings of the invention has the characteristics of fast propagation speed and high survival rate, and can be used for the large-scale production of the fragrant fruit tree seedlings.

【技术实现步骤摘要】
一种香果树种苗的繁殖方法
本专利技术涉及一种香果树种苗的繁殖方法，属于植物组织培养

技术介绍
香果树系茜草科香果树属的高大落叶乔木，起源于距今约1亿年的中生代白垩纪，是第四纪冰川孑遗植物，中国特有单种属稀有树种，在茜草科植物系统发育、形态演化及中国植物地理区系研究以及观赏、药用、材用等方面都极具价值。在自然状态下，香果树有典型的间歇性结实特性，2-4年开花结果一次；种子有休眠特性，种子细小、生活力低下、寿命仅有1年，自然萌发率极低，种群呈衰退趋势，濒临灭绝，已被列为国家二级保护植物。利用茎尖培养的方法开展野生香果树种苗繁育技术的研究，对于克服香果树种子繁殖中存在的困难，挽救珍稀濒危野生香果树种质资源，实现香果树种质资源的可持续利用具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服香果树种子繁殖中存在的困难，提供一种香果树种苗的繁殖方法，该繁殖方法具有繁殖速度快、成活率高等的特点，可用于香果树种苗的规模化生产。本专利技术的技术方案一种香果树种苗的繁殖方法，即以香果树的茎尖为外植体，先后分别在丛生芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基中进行培养，得到的香果树试管苗经炼苗培养，即得香果树种苗，其繁殖过程具体包括如下步骤：(1)、外植体的消毒以香果树顶芽或侧芽作为外植体，依次用酒精、次氯酸钠消毒,然后用无菌水洗净，得到消毒后的外植体；(2)、诱导培养形成丛生芽将步骤(1)所得的消毒后的外植体在无菌条件下，剥取茎尖，接种在丛生芽诱导培养基上，控制温度为25±2℃培养25天后，外植体上形成丛生芽；所述的丛生芽诱导培养基，按每升计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4·7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4·4H2O、4.3mgZnSO4·7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4·5H2O、0.125mgNa2MoO4·2H2O、278mgCa(NO3)2·4H2O、13.9mgFeSO4·7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg或2mg6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；(3)、增殖继代培养将步骤(2)外植体上形成的丛生芽分成单芽，每个单芽逐一转入增殖培养基，控制温度为25±2℃进行增殖继代培养35天，每个单芽上都形成了丛生芽；所述的增殖培养基，按每升计算，包括495mgK2SO4、185mgMgSO4·7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4·4H2O、4.3mgZnSO4·7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4·5H2O、0.125mgNa2MoO4·2H2O、278mgCa(NO3)2·4H2O、13.9mgFeSO4·7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg或2mg6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水；(4)、芽苗生根培养将步骤(3)得到的增殖继代后的丛生芽再分成单个的芽苗，然后将芽苗转到生根培养基中，控制温度为25±2℃进行培养20天，芽苗即可生根，得到香果树试管苗；所述的生根培养基，按每计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4·7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4·4H2O、4.3mgZnSO4·7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4·5H2O、0.125mgNa2MoO4·2H2O、278mgCa(NO3)2·4H2O、13.9mgFeSO4·7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、0或1mgNAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；(5)、炼苗培养步骤(4)所得的香果树试管苗经炼苗培养30天，得到香果树种苗；所述的炼苗培养，即将香果树试管苗栽植于炼苗基质中进行炼苗培养，炼苗培养过程控制白天温度为25℃；晚间温度为15℃，晚间光强为2000lx，炼苗培养环境的相对湿度为85％；所述的炼苗基质，由草碳和珍珠岩按质量比计算，草碳：珍珠岩为3:1的比例混合而成。本专利技术的有益效果本专利技术的一种香果树种苗的繁殖方法，以香果树的顶芽或侧芽为外植体，采用特有的丛生芽诱导培养基和增殖培养基进行培养，丛生芽的增殖系数最高为8。然后在特定的生根培养基的作用下，芽苗生根率最高可达96.5％，得到的香果树试管苗经炼苗培养后得到香果树种苗，其成活率为94.5-98％。进一步，本专利技术的一种香果树种苗的繁殖方法，整个繁殖过程从诱导外植体上长出丛生芽到最后获得种香果树种苗，仅需110天，因此该繁殖方法具有繁殖速度快，种苗成活率高的特点。具体实施方式下面通过具体的实施例对本专利技术进一步阐述，但并不限制本专利技术。实施例1一种香果树种苗的繁殖方法，具体包括如下步骤：(1)、外植体的消毒取香果树顶芽作为外植体，依次用体积百分比浓度为75％的酒精消毒15秒、体积百分比浓度为0.1％次氯酸钠水溶液消毒5min，然后用无菌水冲洗干净，得到消毒后的外植体；(2)、诱导培养形成丛生芽将步骤(1)所得的消毒后的外植体在无菌条件下，剥取茎尖，接种在丛生芽诱导培养基上，控制温度为25±2℃培养25天，消毒后的外植体上形成丛生芽；所述的丛生芽诱导培养基，按每升计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4·7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4·4H2O、4.3mgZnSO4·7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4·5H2O、0.125mgNa2MoO4·2H2O、278mgCa(NO3)2·4H2O、13.9mgFeSO4·7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；(3)增殖继代培养将步骤(2)外植体上形成的丛生芽分成单芽，每个单芽逐一转入增殖培养基，控制温度为25±2℃进行增殖继代培养35天，每个单芽上都形成了丛生芽；所述的增殖培养基，按每升计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4·7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4·4H2O、4.3mgZnSO4·7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4·5H2O、0.125mgNa2MoO4·2H2O、278mgCa(NO3)2·4H2O、13.9mgFeSO4·7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；(4)、芽苗生根培养将步骤(3)得到的增殖继代后的丛生芽再分成单个的芽苗，然后将芽苗转到生根培养基中，控制温度为25±2℃进行培养20天后可生根，得到香果树试管苗；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种香果树种苗的繁殖方法，其特征在于具体包括如下步骤：（1）、外植体的消毒以香果树顶芽或侧芽作为外植体，依次用酒精、次氯酸钠消毒, 然后用无菌水洗净，得到消毒后的外植体；（2）、诱导培养形成丛生芽将步骤（1）所得的消毒后的外植体在无菌条件下，剥取茎尖，接种在丛生芽诱导培养基上，控制温度为25±2℃，培养25天后，外植体上形成丛生芽；所述的丛生芽诱导培养基，按每升计算，由495mg K2SO4、185mg MgSO4•7H2O、85mg KH2PO4、200mg NH4NO3、11.25mg MnSO4•4H2O、4.3mg ZnSO4•7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4•5H2O、0.125mg Na2MoO4•2H2O、278mg Ca(NO3)2•4H2O、13.9mg FeSO4•7H2O、18.65mg Na2‑EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg或2mg 6‑BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；（3）、增殖继代培养将步骤（2）外植体上形成的丛生芽分成单芽，每个单芽逐一转入增殖培养基，控制温度为25±2℃进行增殖继代培养35天，每个单芽上都形成了丛生芽；所述的增殖培养基，按每升计算，由495mg K2SO4、185mg MgSO4•7H2O、85mg KH2PO4、200mg NH4NO3、11.25mg MnSO4•4H2O、4.3mg ZnSO4•7H2O、3.1mg H3BO3、0.125mg CuSO4•5H2O、0.125mg Na2MoO4•2H2O、278mg Ca(NO3)2•4H2O、13.9mg FeSO4•7H2O、18.65mg Na2‑EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg或2mg6‑BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；（4）、芽苗生根培养将步骤（3）得到的增殖继代后的丛生芽再分成单个的芽苗，然后将芽苗转到生根培养基中，控制温度为25±2℃进行培养20天，得到香果树试管苗；所述的生根培养基，按每升计算，由495mg K2SO4、185mg MgSO4•7H2O、85mg KH2PO4、200mg NH4NO3、11.25mg MnSO4•4H2O、4.3mg ZnSO4•7H2O、3.1mg H3BO3、0.125mg CuSO4•5H2O、0.125mg Na2MoO4•2H2O、278mg Ca(NO3)2•4H2O、13.9mg FeSO4•7H2O、18.65mg Na2‑EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、0mg或1mg NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；（5）、炼苗培养步骤（4）所得的香果树试管苗经炼苗培养30天，得到香果树种苗。...

【技术特征摘要】
1.一种香果树种苗的繁殖方法，其特征在于具体包括如下步骤：（1）、外植体的消毒以香果树顶芽或侧芽作为外植体，依次用酒精、次氯酸钠消毒,然后用无菌水洗净，得到消毒后的外植体；（2）、诱导培养形成丛生芽将步骤（1）所得的消毒后的外植体在无菌条件下，剥取茎尖，接种在丛生芽诱导培养基上，控制温度为25±2℃，培养25天后，外植体上形成丛生芽；所述的丛生芽诱导培养基，按每升计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4•7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4•4H2O、4.3mgZnSO4•7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4•5H2O、0.125mgNa2MoO4•2H2O、278mgCa(NO3)2•4H2O、13.9mgFeSO4•7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg或2mg6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；（3）、增殖继代培养将步骤（2）外植体上形成的丛生芽分成单芽，每个单芽逐一转入增殖培养基，控制温度为25±2℃进行增殖继代培养35天，每个单芽上都形成了丛生芽；所述的增殖培养基，按每升计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4•7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4•4H2O、4.3mgZnSO4•7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4•5H2O、0.125mgNa2MoO4•2H2O、278mgCa(NO3)2•4H2O、13.9mgFeSO4•7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、1mg或2mg6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；（4）、芽苗生根培养将步骤（3）得到的增殖继代后的丛生芽再分成单个的芽苗，然后将芽苗转到生根培养基中，控制温度为25±2℃进行培养20天，得到香果树试管苗；所述的生根培养基，按每升计算，由495mgK2SO4、185mgMgSO4•7H2O、85mgKH2PO4、200mgNH4NO3、11.25mgMnSO4•4H2O、4.3mgZnSO4•7H2O、3.1mgH3BO3、0.125mgCuSO4•5H2O、0.125mgNa2MoO4•2H2O、278mgCa(NO3)2•4H2O、13.9mgFeSO4•7H2O、18.65mgNa2-EDTA、50mg肌醇、1mg甘氨酸、0.5mg维生素B1、0.25mg维生素B5、0.25mg维生素B6、0mg或1mgNAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成；（5）、炼苗培养步骤（4）所得的香果树试管苗经炼苗培养30天，得到香果树种苗。...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋丽莉，赵华强，张梦鸽，张婉萍，白露，
申请(专利权)人：上海应用技术大学，
类型：发明
国别省市：上海,31