用于诊断病毒感染的免疫测定法制造技术

本发明专利技术涉及用于诊断疾病的多肽，优选地其二聚体和/或六聚体，更优选地二聚体，其包含从包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:9或其变体的组中选择的序列，优选地SEQ ID NO:1或其变体；在诊断学上有用的承载体，其包含用于特异性地捕获在来自受试者的样品中的针对SEQ ID NO:1的抗体的工具；试剂盒，其包含所述在诊断学上有用的承载体；和方法，优选地用于诊断疾病的方法，其包括在来自受试者的样品中检测针对SEQ ID NO:1的抗体的存在或不存在的步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于诊断病毒感染的免疫测定法本专利技术的方面涉及用于诊断疾病的多肽，其包含从包括SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:19和SEQIDNO:9或其变体的组中选择的序列，优选地SEQIDNO:1或其变体，优选地其二聚体和/或六聚体，更优选地其二聚体；在诊断学上有用的承载体，其包含用于特异性地捕获在来自受试者的样品中的针对SEQIDNO:1的抗体的工具；试剂盒，其包含所述在诊断学上有用的承载体；和方法，优选地用于诊断疾病的方法，其包括在来自受试者的样品中检测针对SEQIDNO:1的抗体的存在或不存在的步骤。寨卡病毒(Zikavirus；ZIKV)是一种新出现的经蚊子传播的黄病毒，其目前在南美洲和中美洲以及在加勒比地区引起大的流行病。它与黄病毒家族的其他的人致病性成员例如登革病毒(DENV)、西尼罗病毒(WNV)、玻瓦散病毒(PWV)、日本脑炎病毒(JEV)、乌苏土病毒和黄热病毒(YFV)紧密相关。除了其结构相似之外，这些病毒中的大多数共享部分地重叠的地理分布，其中热带和亚热带地区是主要媒介(伊蚊属(Aedes)的蚊子)的有利环境。在临床上，寨卡热类似于登革热，但是通常较不严重。由于超过80％的感染是无症状的，因而大多数病例未被注意。症状包括发热、疹、关节痛和结膜炎，并且感染通常是自限性的。相反地，在5％的DENV感染中，严重的并发症导致登革休克综合征或登革出血热，其具有高的死亡率。目前的ZIKV流行病(特别是在巴西)证实了关于在密克罗尼亚的2007年爆发期间最初所怀疑的两个在ZIKV感染中的潜在的严重并发症的猜疑。首先，通过感染触发了罕见的吉-巴综合征(GBS)(一种导致外周神经髓鞘质的损害的自身免疫性疾病)的病例的显著上升。第二，在来自巴西高度地方性流行地区的新生儿中小头畸形病例的20倍增加，以及随后在两名携带具有小头畸形的胎儿的孕妇的羊膜液中和在子宫内诊断出小头畸形后流产的胎儿的脑中ZIKV基因组检测的首次报道，提供了在胎儿异常与早期妊娠期间ZIKV感染之间的强烈的因果联系。除了来自黄病毒家族的这两个代表外，在鉴别诊断中还应当考虑基孔贡亚病毒(CHIKV)(甲病毒家族的成员)。CHIKV由相同的蚊子媒介传播并且在相同的地区地方性流行。共同分布和相似的临床表现，以及与之相结合的疾病结果的高多样性和被ZIKV、DENV和CHIKV感染的患者的差异化治疗的必要性，证实了对于特异性且可靠的诊断可能性的需要。目前，ZIKV感染的诊断是具有挑战性的，因为唯一的特殊工具是使用基于核酸的测试来直接证明病毒血症，但是病毒血症阶段通常在症状发作后持续仅至多七天。因此，到患者咨询其医生时，诸如RT-PCR的方法可能已经给出了阴性结果。噬斑减少中和测试(plaque-reductionneutralizationtests，PRNT)可以测量病毒特异性中和抗体，和辨别交叉反应性抗体。这在其中两种或更多种黄病毒共出现的地区是高度意义重大的。但是，PRNT是耗时的，难以施行的，并且不顺应于测试大量的血清。相反地，病毒特异性抗体应答的基于ELISA的测量是快速的、可改变规模的且在技术上成熟的方法。如所报道的，在症状发作后四至七天开始产生IgM抗体，而IgG抗体在几天后出现。用于诊断黄病毒感染的常规血清学测定法例如基于糖蛋白E(gpE)的那些的一个主要限制是其在黄病毒属内的广泛的交叉反应性。另一个限制是这样的事实：一系列患者(特别是具有过去的黄病毒感染的背景的)似乎缺乏IgM，其是可以先于可检测水平的IgG类别抗体在黄病毒感染的早期出现的抗体类别。在这样的患者中，基于IgM的诊断测试(其经常用于诊断黄病毒感染)的结果给出假阴性结果，这严重牵连所述患者和(如果她们是怀孕的)她们的婴儿的健康。另一个限制(其涉及进入黄病毒例如寨卡病毒感染的领域中的研究，例如黄病毒感染的诊断或治疗或者任何基础研究)是，来自具有经确认的寨卡病毒感染的患者的血清供不应求。相当经常地，不是仅需要一个样品，而是需要数个在感染或症状发作后的一系列时间点获取的样品，例如如果探究疾病的动力学，或者需要对照样品以用于与在感染早期的治疗性专利技术相关的研究。因此，作为本专利技术基础的问题是提供这样的诊断测定法，其克服了任何与用于诊断黄病毒例如寨卡病毒的现有技术测定法(特别是基于检测针对黄病毒抗原的抗体的那些)相关联的缺点。作为本专利技术基础的另一个问题是提供这样的测定法，其允许特异性地诊断感染，优选地黄病毒感染，更优选地寨卡病毒感染，更特别地，区别寨卡病毒感染与相关黄病毒(例如从包括登革病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒、乌苏土(Usutu)病毒、西尼罗病毒和日本脑炎病毒的组中选择的那些，优选地登革病毒)感染。作为本专利技术基础的另一个问题是提供用于检测黄病毒感染的测定法和试剂，其中相比于现有技术测定法而言，灵敏度和/或特异性得到改善，特别是关于感染早期。作为本专利技术基础的另一个问题是提供针对黄病毒，优选地寨卡病毒感染的疫苗。作为本专利技术基础的另一个问题是提供用于区分黄病毒感染与另一种疾病的资源高效型的但在诊断学上可靠的测试。作为本专利技术基础的另一个问题是提供这样的测试，其提供更长的对于诊断的时间窗口。作为本专利技术基础的另一个问题是提供这样的测试，其需要更低量的患者样品。作为本专利技术基础的另一个问题是提供这样的测定法，其用于区分黄病毒(特别是寨卡病毒)急性感染与疫苗接种或者相同或另一种黄病毒(优选地登革病毒)的先前感染。作为本专利技术基础的另一个问题是提供针对黄病毒，优选地寨卡病毒感染的疫苗。作为本专利技术基础的另一个问题是提供用于区分黄病毒感染与另一种疾病的资源高效型的但在诊断学上可靠的测试。作为本专利技术基础的另一个问题是提供这样的测试，其可以在最初暴露或症状发作和获得用于诊断的样品那天之间的更长的时间窗口期间进行使用。作为本专利技术基础的另一个问题是提供这样的测试，其用于区分在原发黄病毒感染(优选地除寨卡病毒之外的其他黄病毒的感染)与继发黄病毒感染(优选地寨卡病毒感染)，所述方法比现有技术方法在诊断学上更可靠，特别是关于避免假阳性或阴性结果，并且可以理想地应用于来自具有IgM缺乏的患者的样品。通过所附的独立和从属权利要求的主题解决了作为本专利技术基础的问题。在第一个方面，作为本专利技术基础的问题通过用于诊断疾病的多肽而得到解决，所述多肽包含从包括SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:19和SEQIDNO:9或其变体的组中选择的序列，优选地SEQIDNO:1或其变体，优选地二聚体和/或六聚体，更优选地二聚体。在第二个方面，所述问题通过在诊断学上有用的承载体而得到解决，所述承载体包含用于特异性地捕获在来自受试者的样品中的针对SEQIDNO:1的抗体的工具。在一个优选的实施方案中，所述承载体进一步包含一种或多于一种工具，该工具用于特异性地捕获针对从包括SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.包含SEQ ID NO:1的重组多肽，所述多肽为单体、二聚体或六聚体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.02.22 EP 16000422.2;2016.02.24 EP 16000442.0;1.包含SEQIDNO:1的重组多肽，所述多肽为单体、二聚体或六聚体。2.根据权利要求1的多肽，其中所述多肽在真核细胞中表达，和优选地从真核细胞中分离，所述真核细胞优选地为哺乳动物细胞或昆虫细胞，更优选地人细胞。3.组合物，其包含根据权利要求1至2中任一项的多肽和哺乳动物载脂蛋白，和/或寨卡病毒包膜糖蛋白，优选地包含SEQIDNO:11的多肽。4.在诊断学上有用的承载体，其包含用于特异性地捕获在来自受试者的样品中的针对SEQIDNO:1的抗体的工具，其中所述诊断装置优选地选自包括下列各项的组：珠粒，优选地顺磁性颗粒；测试条；微量滴定板；印迹，其优选地选自包括Western印迹、线印迹和斑点印迹的组；侧流测试；玻璃表面；载玻片；生物芯片；和膜。5.根据权利要求4的在诊断学上有用的承载体，其中所述用于特异性地捕获针对SEQIDNO:1的抗体的工具为根据权利要求1至2中任一项的多肽或者根据权利要求3的组合物。6.根据权利要求4至5中任一项的在诊断学上有用的承载体，其进一步包含一种或多于一种工具，该工具用于特异性地捕获针对从包括SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:19和SEQIDNO:9的组中选择的抗原，优选地SEQIDNO:2的抗原的抗体，和/或用于特异性地捕获针对从包括SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:27的组中选择的抗原，优选地SEQIDNO:18的抗原的抗体的工具。7.试剂盒，其包含根据权利要求1至6中任一项的多肽、组合物或在诊断学上有用的承载体，优选地进一步包含用于特异性地检测所捕获的抗体的工具。8.方法，其包括在来自受试者的样品，优选地血液或CSF样品中检测针对SEQIDNO:1的抗体的存在或不存在的步骤。9.根据权利要求8的方法，其包括使根据权利要求4至6中任一项的在诊断学上有用的承载体与来自受试者的样品相接触的步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·斯特恩哈根，A·德尔伯格，E·拉特温，C·拉齐姆斯基，J·博福，
申请(专利权)人：欧蒙医学诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE