鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺制造技术

本发明专利技术公开了鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺，它涉及螺旋藻中活性物质的提取工艺技术领域。将新鲜螺旋藻称重，然后离心洗涤1‑3次，称重藻泥，加0.5‑4倍的藻泥重量的水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃下冷冻过夜，在室温中溶解，第二次溶解后，再加入藻泥2‑8倍重量的水，放置2‑8h后，离心，得上清液a和固体b，固体b经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体c，其中上清液a用于藻蓝蛋白的提取；固体b的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取；固体c用于螺旋藻多糖的提取；此工艺较为简单，能充分有效的利用现有的螺旋藻资源，实现了对螺旋藻的综合利用和深度开发，对螺旋藻产业发展具有积极的意义。

Extraction process of phycocyanin, chlorophyll and Spirulina Polysaccharide from fresh Spirulina platensis

The invention discloses an extraction process for phycocyanin, chlorophyll and Spirulina Polysaccharide in fresh Spirulina platensis, which relates to the technical field of extracting active substances from Spirulina platensis. The fresh Spirulina was weighed, then centrifuged and washed 1 3 times, weighed the algae sludge, added 0.5_4 times the weight of the algae sludge water, stirred evenly, freeze-thawed twice, frozen overnight at minus 20 degrees Celsius, dissolved at room temperature, after the second dissolution, and then added 2_8 times the weight of the algae sludge water, placed 2_8 hours, centrifuged, supernatant A and solid. B. Solid B was extracted by ethanol and then the extract and solid C were obtained, in which supernatant a was used to extract phycocyanin; solid B was used to extract sodium zinc chlorophyllin; solid C was used to extract polysaccharides from Spirulina platensis; this process was simple and could make full use of existing Spirulina platensis resources. The comprehensive utilization and deep development of Spirulina has positive significance for the development of Spirulina industry.

【技术实现步骤摘要】
鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺
本专利技术涉及鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺，属于螺旋藻中活性物质的提取工艺

技术介绍
螺旋藻是蓝藻门，蓝藻纲，断增藻目，颤藻科中的螺旋藻属低等水生植物。螺旋藻不仅具有很高的营养价值，而且含有大量的对人体有益的生理活性物质，在食品、医药和生物工程领域有广泛应用。螺旋藻中含有丰富的蛋白质、叶绿素、多糖、β-胡萝卜素以及γ-亚麻酸、脂肪等生物活性物质。螺旋藻的主要成分是蛋白质，占干重的60%-70%，且包含人体所需的8种氨基酸及多种生物活性物质，具有特殊的医疗保健作用。叶绿素的含量也很高，能达到1.5g/100g。由于螺旋藻所含以上多种生物活性物质可作为新型的药食两用资源，现己成为当前微藻研究的焦点之一。现在对螺旋藻的利用基本上是以原藻干粉或其他剂型的形式进入市场，技术含量低，尤其是对其生物活性成分的开发利用不足。虽有部分螺旋藻活性物质提取的报道，在其在提取和加工的时候，往往只是单一的针对某一种活性物质，不能兼顾多种生物活性物质的利用，从而不能充分有效的利用现有的螺旋藻资源，造成资源的浪费。因此，进行螺旋藻的综合利用和深度开发，实现螺旋藻中多种活性成分的综合开发，对螺旋藻产业发展具有积极的意义。针对上述现状，本专利技术提供了一种鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的综合提取工艺。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术要解决的技术问题是提供一种制备方法简单,能够实现对螺旋藻中多种活性成分进行综合开发利用的提取工艺。本专利技术的鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的综合提取工艺包括以下步骤：步骤一、综合提取前处理，将新鲜螺旋藻称重，然后离心洗涤1-3次，称重藻泥，加0.5-4倍的藻泥重量的水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃下冷冻过夜，在室温中溶解，第二次溶解后，再加入藻泥2-8倍重量的水，放置2-8h后，离心，得上清液a和固体b，固体b经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体c，其中上清液a用于藻蓝蛋白的提取；固体b的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取；固体c用于螺旋藻多糖的提取；步骤二、藻蓝蛋白的提取，在上清液a中，用4-6mol/L的盐酸调pH到4.0-4.5之间，搅拌半小时后进行离心，离心条件为在4000rpm下离心15min，将上清液经6k滤膜超滤一次，再加4倍体积蒸馏水超滤一次，调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末；步骤三、叶绿素锌钠盐的提取，将固体b经乙醇索式提取方式提取6-12h，乙醇索式提取方式具体步骤为在90％的乙醇中，加入过量硫酸锌，盐酸调pH2-3即可，接着用10％NaOH溶液调pH7-8，过滤除去不溶性杂质，将滤液继续调pH11-12，维持pH11-12，在60℃下搅拌皂化1-2h，用石油醚萃取至醚层显淡黄色，浓缩皂化液至1/3体积，用盐酸调节pH值2-3，有沉淀析出，过滤，滤饼依次用水，石油醚洗涤各两次后，用丙酮溶解滤饼，再用10％的NaOH乙醇溶液调pH11-12，过滤，烘干，即得叶绿素锌钠盐；步骤四、螺旋藻多糖的提取，在固体c中加入藻泥干重10倍量水，在0.5-5%中性蛋白酶，pH=7.0，35-45℃条件下搅拌提取2-5h，离心条件为在4000rpm下离心处理15min，将离心所得的上清液减压浓缩至1/6体积，加入2-5倍量95％乙醇，在4℃下放置4-12h，过滤后，滤饼用无水乙醇洗1-3次，烘干，即得螺旋藻多糖。本专利技术的有益效果：此工艺较为简单，此工艺兼顾多种生物活性物质的利用，能充分有效的利用现有的螺旋藻资源，在鲜螺旋藻中提取到藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖多种物质，不会造成资源的浪费。并且实现了对螺旋藻的综合利用和深度开发，对螺旋藻产业发展具有积极的意义。具体实施方式本具体实施方式采用以下技术方案：所述鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的综合提取工艺包括以下步骤：步骤一、综合提取前处理，将新鲜螺旋藻称重，然后离心洗涤1-3次，称重藻泥，加0.5-4倍的藻泥重量的水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃下冷冻过夜，在室温中溶解，第二次溶解后，再加入藻泥2-8倍重量的水，放置2-8h后，离心，得上清液a和固体b，固体b经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体c，其中上清液a用于藻蓝蛋白的提取；固体b的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取；固体c用于螺旋藻多糖的提取；步骤二、藻蓝蛋白的提取，在上清液a中，用4-6mol/L的盐酸调pH到4.0-4.5之间，搅拌半小时后进行离心，离心条件为在4000rpm下离心15min，将上清液经6k滤膜超滤一次，再加4倍体积蒸馏水超滤一次，调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末；步骤三、叶绿素锌钠盐的提取，将固体b经乙醇索式提取方式提取6-12h，乙醇索式提取方式具体步骤为在90％的乙醇中，加入过量硫酸锌，盐酸调pH2-3即可，接着用10％NaOH溶液调pH7-8，过滤除去不溶性杂质，将滤液继续调pH11-12，维持pH11-12，在60℃下搅拌皂化1-2h，用石油醚萃取至醚层显淡黄色，浓缩皂化液至1/3体积，用盐酸调节pH值2-3，有沉淀析出，过滤，滤饼依次用水，石油醚洗涤各两次后，用丙酮溶解滤饼，再用10％的NaOH乙醇溶液调pH11-12，过滤，烘干，即得叶绿素锌钠盐；步骤四、螺旋藻多糖的提取，在固体c中加入藻泥干重10倍量水，在0.5-5%中性蛋白酶，pH=7.0，35-45℃条件下搅拌提取2-5h，离心条件为在4000rpm下离心处理15min，将离心所得的上清液减压浓缩至1/6体积，加入2-5倍量95％乙醇，在4℃下放置4-12h，过滤后，滤饼用无水乙醇洗1-3次，烘干，即得螺旋藻多糖。实施例1：将新鲜螺旋藻6kg，离心洗涤1次，称重藻泥2kg，加2L水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃冷冻过夜，室温溶解，第二次溶解后，再加入6L水，放置3h，离心，得上清液a和固体b，将上清液a用6mol/L盐酸调pH到4.2-4.5之间，搅拌半小时后离心，离心条件为4000rpm下离心15min，上清液经6k滤膜超滤一次，再加4倍蒸馏水超滤一次，调pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末；固体b经乙醇索氏提取方式提取8h，所述的乙醇索氏提取方式的具体步骤为在90％乙醇，加入过量硫酸锌，将盐酸调pH2-3即可，上清用10％NaOH溶液调pH7-8，过滤除去不溶性杂质，滤液继续调pH11-12，维持pH11-12在60℃搅拌皂化1.5h，用石油醚萃取至醚层显淡黄色，浓缩皂化液至1/3体积，用盐酸调节pH值2-3，有沉淀析出，过滤，滤饼依次用水，石油醚洗涤各两次后，用丙酮溶解滤饼，再用10％NaOH乙醇溶液调pH11-12，过滤，烘干，即得叶绿素锌钠盐。经乙醇索氏提取方式提取后的固体c加入藻泥（藻泥含水量一般在80%，）干重10倍量水，在2%中性蛋白酶，pH=7.0，40℃条件下搅拌提取3h，离心条件为在4000rpm离心15min，将上清液减压浓缩至1/6体积，加入3倍量95％乙醇，在4℃下静置6h，过滤后，滤饼用无水乙醇洗2次，烘干，即得螺旋藻多糖。实施例2：将新鲜螺旋藻10kg，离心洗涤1次，称重藻泥4kg，加4L水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃冷冻过夜，室温溶解，第二次溶解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺，其特征在于：具体的工艺包括以下步骤：步骤一、综合提取前处理，将新鲜螺旋藻称重，然后离心洗涤1‑3次，称重藻泥，加0.5‑4倍的藻泥重量的水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃下冷冻过夜，在室温中溶解，第二次溶解后，再加入藻泥2‑8倍重量的水，放置2‑8h后，离心，得上清液(a)和固体(b)，固体(b)经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体(c)，其中上清液(a)用于藻蓝蛋白的提取；固体(b)的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取；固体(c)用于螺旋藻多糖的提取；步骤二、藻蓝蛋白的提取，在上清液(a)中，用4‑6mol/L的盐酸调pH到4.0‑4.5之间，搅拌半小时后进行离心，离心条件为在4000rpm下离心15min，将上清液经6k滤膜超滤一次，再加4倍体积蒸馏水超滤一次，调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末；步骤三、叶绿素锌钠盐的提取，将固体(b)经乙醇索式提取方式提取6‑12h，乙醇索式提取方式具体步骤为在90％的乙醇中，加入过量硫酸锌，盐酸调pH2‑3即可，接着用10％NaOH溶液调pH7‑8，过滤除去不溶性杂质，将滤液继续调pH11‑12，维持pH11‑12，在 60℃下搅拌皂化1‑2h，用石油醚萃取至醚层显淡黄色，浓缩皂化液至1/3体积，用盐酸调节pH值2‑3，有沉淀析出，过滤，滤饼依次用水，石油醚洗涤各两次后，用丙酮溶解滤饼，再用10％的NaOH乙醇溶液调pH11‑12，过滤，烘干，即得叶绿素锌钠盐；步骤四、螺旋藻多糖的提取，在固体(c)中加入藻泥干重10倍量水，在0.5‑5%中性蛋白酶，pH=7.0，35‑45℃条件下搅拌提取2‑5h，离心条件为在4000rpm下离心处理15min，将离心所得的上清液减压浓缩至1/6体积，加入2‑5倍量95％乙醇，在4℃下放置4‑12h，过滤后，滤饼用无水乙醇洗1‑3次，烘干，即得螺旋藻多糖。...

【技术特征摘要】
1.鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺，其特征在于：具体的工艺包括以下步骤：步骤一、综合提取前处理，将新鲜螺旋藻称重，然后离心洗涤1-3次，称重藻泥，加0.5-4倍的藻泥重量的水，搅拌均匀，冻融两次，在零下20℃下冷冻过夜，在室温中溶解，第二次溶解后，再加入藻泥2-8倍重量的水，放置2-8h后，离心，得上清液(a)和固体(b)，固体(b)经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体(c)，其中上清液(a)用于藻蓝蛋白的提取；固体(b)的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取；固体(c)用于螺旋藻多糖的提取；步骤二、藻蓝蛋白的提取，在上清液(a)中，用4-6mol/L的盐酸调pH到4.0-4.5之间，搅拌半小时后进行离心，离心条件为在4000rpm下离心15min，将上清液经6k滤膜超滤一次，再加4倍体积蒸馏水超滤一次，调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末；步骤三、叶绿素锌钠盐的提取，将固体(...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈云飞，李志良，
申请(专利权)人：江苏海睿生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32