本发明专利技术公开了一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent‑TGFβ药物及其制备方法与应用，涉及制药领域。所述药物，包括下述体积比组分：1‑5％100‑500mmol/L维生素C溶液、1‑5％10‑100mmol/L三价铁溶液、90‑98％重量平均分子量为80万～120万的玻璃酸钠注射液。本发明专利技术可完全实现利用自身的生物活化性能实现高效激活体内自身latent‑TGFβ，从而使得软骨再生具有更接近天然的再生过程。本发明专利技术所述药物可应用于制备治疗软骨缺损再生修复药物。
A highly efficient latent-TGF beta drug based on sodium hyaluronate and its preparation and Application
The invention discloses a highly efficient latent - TGF - beta drug based on sodium hyaluronate, a preparation method and application thereof, and relates to the pharmaceutical field. The drugs included the following volume ratio: 1 5%100 500mmol/L vitamin C solution, 1 5%10 100mmol/L trivalent iron solution, 90 Sodium Hyaluronate Injection 98% weight average molecular weight of 800 thousand to 1 million 200 thousand. The invention can fully realize the use of its own biological activation performance to effectively activate the latent TGF beta of the body itself, thus making the cartilage regeneration more close to the natural regeneration process. The medicine of the invention can be applied to prepare medicine for repairing and repairing cartilage defects.
【技术实现步骤摘要】
一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ药物及其制备方法与应用
本专利技术涉及制药领域，具体涉及一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ药物及其制备方法与应用。
技术介绍
骨性关节炎(Osteoarthritis，OA)是最普遍的慢性关节疾病。OA最常累及髋、膝、指间关节，表现为关节疼痛和活动障碍，以关节活动严重受限和人工关节置换为结局，严重降低患者生活质量并产生高额的医疗费用。因为缺乏有效的预防性治疗手段，年轻的关节创伤患者患OA风险高达20～50％。目前OA的非手术干预手段不能有效延缓疾病进展。转化生长因子β家族(TGFβs)被认为是维持关节稳态，防止软骨细胞退变，促进间充质干细胞成软骨分化的重要生长因子。TGFβs在人体微环境包括关节组织内以一种无活性的潜伏形式富集(latent-TGFβs)。提高术后缺损部位活性TGFβs含量可能成为提高再生组织质量的关键。我们的研究结果首次提示：基于酸性环境的简单方式能够高效激活Latent-TGFβ，这一重要发现使我们研发出一种简单高效的内源性latent-TGFβ激活方法和材料有望成为具有实际临床应用前景的软骨修复药物。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的旨在提供一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ药物。本专利技术的第二个目的旨在提供上述药物的制备方法。本专利技术的第三个目的旨在提供上述药物作为制备治疗软骨缺损再生修复药物的应用。本专利技术的第一个目的是通过如下技术方案来实现的：一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ的药物，包括下述体积比组分：1-5％100-500mmol/L维生素C溶液、1-5％10-100mmol/L三价铁溶液、90-98％重量平均分子量为80万～120万的玻璃酸钠注射液。本专利技术的第二个目的是通过如下技术方案来实现的：一种如上所述药物的制备方法，包括以下步骤：(1)制备重量平均分子量为80万～120万的玻璃酸钠注射液，辅以1-5V/V％氯化钠，1-5V/V％磷酸氢二钠，1-5V/V％磷酸二氢钠，备用；(2)制备100-500mmol/L维生素C溶液，备用；(3)制备10-100mmol/L三价铁溶液，备用；(4)将玻璃酸钠注射液、维生素C溶液和三价铁溶液按比例混合，获得基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ的复合材料。本专利技术的第三个目的是通过如下技术方案来实现的：一种如上所述的药物应用于制备治疗软骨缺损再生修复药物。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：(1)国内外尚无同类型产品，现在使用的多为单纯玻璃酸钠注射液，无有效的软骨再生作用。本专利技术可完全实现利用自身的生物活化性能实现高效激活latent-TGFβ，从而使得软骨再生具有更接近天然的再生过程；(2)本专利技术采用的原材料为玻璃酸钠注射液、维生素C溶液和三价铁溶液，均为安全无毒的的医用级产品，被广泛应用于制药领域；(3)本专利技术构建的基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ的药物，利用自身的生物活化性能即可高效激活latent-TGFβ，从而使得软骨再生具有更接近天然的再生过程。新材料激活内源性latent-TGFβ的作用持续而又高效。预期其可持续高效激活latent-TGFβ可使得新生软骨组织结构符合天然软骨特征；(4)本专利技术在软骨再生修复领域具有一定的先进性和创新性，可为新型软骨修复材料研究工具提供新思路和新方法，相关产品具有较大的市场竞争力，可以很好地应用到制备治疗各类软骨再生修复的药物。附图说明图1为激活后BMS中TGFβ1及其他软骨分化相关因子分析图；图2为激活后BMS诱导BMSC迁移实验；图3为多信号通路分析及蛋白质印记检测；图4为造模6周关节腔注射6次后关节软骨再生情况。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制，任何在本专利技术权利要求保护范围内所做的有限次修改，仍在本专利技术的权利要求保护范围内。实施例1体积百分比1％的100mmol/L维生素C溶液用量，1％的10mmol/L三价铁溶液用量，98％的玻璃酸钠用量构建可高效激活latent-TGFβ的混合液。将经消毒灭菌处理的0.1ml100mmol/L维生素C溶液，0.1ml10mmol/L三价铁溶液，9.8ml玻璃酸钠，超声搅拌(30％震动幅度，20秒)，形成体积比为1:1:98的维生素C-三价铁-玻璃酸钠混悬液，37℃静置，γ射线灭菌后备用。实施例2体积百分比2％的100mmol/L维生素C溶液用量，2％的10mmol/L三价铁溶液用量，96％的玻璃酸钠用量构建可高效激活latent-TGFβ的混合液。将经消毒灭菌处理的0.2ml100mmol/L维生素C溶液，0.2ml10mmol/L三价铁溶液，9.6ml玻璃酸钠，超声搅拌(30％震动幅度，20秒)，形成体积比为2:2:96的维生素C-三价铁-玻璃酸钠混悬液，37℃静置，γ射线灭菌后备用。实施例3体积百分比3％的100mmol/L维生素C溶液用量，3％的10mmol/L三价铁溶液用量，94％的玻璃酸钠用量构建可高效激活latent-TGFβ的混合液。将经消毒灭菌处理的0.3ml100mmol/L维生素C溶液，0.3ml10mmol/L三价铁溶液，9.4ml玻璃酸钠，超声搅拌(30％震动幅度，20秒)，形成体积比为3:3:94的维生素C-三价铁-玻璃酸钠混悬液，37℃静置，γ射线灭菌后备用。实施例4体积百分比4％的100mmol/L维生素C溶液用量，4％的10mmol/L三价铁溶液用量，92％的玻璃酸钠用量构建可高效激活latent-TGFβ的混合液。将经消毒灭菌处理的0.4ml100mmol/L维生素C溶液，0.4ml10mmol/L三价铁溶液，9.2ml玻璃酸钠，超声搅拌(30％震动幅度，20秒)，形成体积比为4:4:92的维生素C-三价铁-玻璃酸钠混悬液，37℃静置，γ射线灭菌后备用。实施例5体积百分比5％的100mmol/L维生素C溶液用量，5％的10mmol/L三价铁溶液用量，90％的玻璃酸钠用量构建可高效激活latent-TGFβ的混合液。将经消毒灭菌处理的0.5ml100mmol/L维生素C溶液，0.5ml10mmol/L三价铁溶液，9.0ml玻璃酸钠，超声搅拌(30％震动幅度，20秒)，形成体积比为5:5:90的维生素C-三价铁-玻璃酸钠混悬液，37℃静置，γ射线灭菌后备用。以下对本专利技术制备的基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ的药物进行治疗效果实验：(1)细胞及骨髓上清液的准备新鲜的健康人骨髓悬液购买于美国Lonza公司骨髓标本库，标本取回后1500rpm离心10min，取上清液经0.22μm无菌滤器过滤后放置-80℃保存。剩余部分用等体积的商品化人MSC培养基(Lonza)重悬，并缓慢滴加到等体积的淋巴细胞分离液表面。之后再22℃环境中2500rpm离心15min，离心结束小心吸取中间的单核细胞层，移入10ml的上述培养基中1000rpm离心5min。重悬沉淀细胞并按200000/cm2密度接种到10cm培养皿中。细胞长至80％密度时用0.5％胰蛋白酶消化，1:3传代。(2)激活后BMS中TGFβ1及其他软骨分化相关因子改变使用无菌蒸本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent‑TGFβ药物，其特征在于，包括下述体积比组分：1‑5％100‑500mmol/L维生素C溶液、1‑5％10‑100mmol/L三价铁溶液、90‑98％重量平均分子量为80万～120万的玻璃酸钠注射液。
【技术特征摘要】
1.一种基于玻璃酸钠的可高效激活latent-TGFβ药物，其特征在于，包括下述体积比组分：1-5％100-500mmol/L维生素C溶液、1-5％10-100mmol/L三价铁溶液、90-98％重量平均分子量为80万～120万的玻璃酸钠注射液。2.一种如权利要求1所述药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备重量平均分子量为80万～120万的玻璃酸钠注射液，辅以...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵亮，包良笑，
申请(专利权)人：赵亮，包良笑，
类型：发明
国别省市：广东,44
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