本发明专利技术提供了一种式(I)所示的大黄素型蒽醌类化合物Hedyanthraquinone B(1,6‑二羟基‑2，5‑二甲氧基‑9,10‑蒽醌)及其制备方法，本发明专利技术所述大黄素型蒽醌类化合物1,6‑二羟基‑2，5‑二甲氧基‑9,10‑蒽醌的提取、分离、纯化方法简单，抑制肿瘤细胞活性明确，具有潜在的开发为抗肿瘤药物的价值，该化合物化学结构经过波谱学数据得到确认，不存在光学异构体，可以避免光学异构体潜在的风险。
Rhubarb type anthraquinone Hedyanthraquinone B and its preparation and Application
The invention provides a type (I) emodin anthraquinone compounds Hedyanthraquinone represented by B (1,6 two hydroxy 2, 5 two methoxy 9,10 anthraquinone) and its preparation method, the invention of the emodin anthraquinone compounds 1,6 two hydroxy 2, extraction separationpurification 5 two methoxy 9,10 anthraquinone, inhibit the activity of tumor cells is clear, has the potential for development of antitumor drugs, the compound chemical structure by spectroscopic data confirmed, no optical isomers and optical isomers can avoid the potential risks.
【技术实现步骤摘要】
大黄素型蒽醌HedyanthraquinoneB及其制备方法和应用(一)
本专利技术涉及一种大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB(1,6-二羟基-2，5-二甲氧基-9,10-蒽醌)及其制备方法和应用。(二)
技术介绍
剑叶耳草(学名：HedyotiscaudatifoliaMerr.etMetcalf.)是茜草科耳草属(HedyotisLinn.)植物，灌木，叶革质，通常披针形；侧脉纤细；萼管陀螺形；花冠白色或粉红色；蒴果长圆形或椭圆形；花期5-6月。产于广东、广西、福建、江西、浙江(南部)、湖南等省区；常见于丛林下比较干旱的砂质土壤上或见于悬崖石壁上，有时亦见于粘质土壤的草地上。广西常用的中草药，别名少年红、千年茶、铁扫把、长尾耳草、天蛇木、甜茶等。剑叶耳草性平，味苦、辛、无毒，具有止咳化痰、健脾消积、消积止血、疏风退热、润肺等功效，临床上用于肺痨咯血、治疗支气管炎、小儿疳积、小儿发烧、支气管哮喘、跌打损伤、外科出血、腹泻、火眼、咽喉痛等症。对剑叶耳草进行系统、科学的研究，探明其有效成分及作用机理，发现一些结构新颖的活性成分，将对更深层开发利用剑叶耳草的食疗保健产品、开发治疗药物及临床应用产生重要意义。本专利技术以剑叶耳草藤茎为研究对象，进行提取、分离、纯化、结构鉴定得到HedyanthraquinoneB(1,6-二羟基-2，5-二甲氧基-9,10-蒽醌)，属于大黄素型蒽醌类化合物，该化合物具有一定程度的抗肿瘤活性。(三)
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB及其制备方法和应用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB，其结构式如式(I)所示：一种式(I)所示的大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB的制备方法，所述的制备方法按如下步骤进行：(1)甲醇浸提：将剑叶耳草(HedyotiscaudatifoliaMerr.etMetcalf.)的藤茎粉碎干燥，加入甲醇浸提提取后滤除不溶物，所得滤液减压蒸干得到甲醇浸膏；(2)乙酸乙酯萃取：将步骤(1)所得甲醇浸膏用乙酸乙酯萃取，所得萃取液减压蒸干得到乙酸乙酯浸膏；(3)一次柱层析：用200～300目柱层析硅胶对步骤(2)所得乙酸乙酯浸膏进行柱层析分离，以石油醚/乙酸乙酯体积比8：1～1：4的混合液和乙酸乙酯为洗脱剂A，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液A，所得洗脱液A减压蒸除溶剂得粗品；(4)二次柱层析：用200～300目柱层析硅胶继续对步骤(3)所得粗品进行柱层析分离，以石油醚/乙酸乙酯体积比4：1～1：2的混合液和乙酸乙酯为洗脱剂B，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液B，所得洗脱液B减压蒸除溶剂得到固体物质；(5)洗涤除杂：将步骤(4)所得固体物质用石油醚/乙酸乙酯的混合溶剂进行洗涤除杂，所得固体产物经干燥得到所述式(I)所示的大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB。进一步，步骤(1)中，所述甲醇浸提的操作方法为：将粉碎干燥后的剑叶耳草藤茎与甲醇混合，在20～30℃下浸提5～10天，过滤得到甲醇提取液，滤渣重复浸提2～4次，合并每次所得甲醇提取液，减压蒸干，得到甲醇浸膏；所述的甲醇加入量以所述的剑叶耳草藤茎的质量计为3～5mL/g。进一步，步骤(2)中，所述乙酸乙酯萃取的操作方法为：将步骤(1)所得甲醇浸膏分散于5～10倍质量的水中，得到悬浮液，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相，减压回收溶剂，得到乙酸乙酯浸膏。进一步，步骤(3)中，所述梯度洗脱的操作方法为：以石油醚/乙酸乙酯体积比分别为8：1、6：1、4：1、2：1、1：1、1：2、1：4的混合液、乙酸乙酯为洗脱剂A，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液A，减压蒸除溶剂得粗品；所述洗脱剂A的流速为15～20mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为400～600min。进一步，步骤(4)中，所述梯度洗脱的操作方法为：以石油醚/乙酸乙酯体积比分别为4：1、2：1、1：1、1：2的混合液、乙酸乙酯为洗脱剂B，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液B，减压蒸除溶剂得到固体物质；洗脱剂B的流速为10～15mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为300～500min。进一步，步骤(5)中，所述洗涤除杂的操作方法为：将所述固体物质和石油醚/乙酸乙酯混合溶液加入离心管中，超声、离心，去除上清液，重复洗涤3次，最后干燥得到产物；所述的石油醚/乙酸乙酯混合溶剂中，石油醚与乙酸乙酯的体积比为4：1；所述的石油醚/乙酸乙酯混合溶液的加入量以所述的固体物质的质量计为10～20mL/g。再进一步，步骤(5)中，所述超声频率为40KHz，超声时间为10s。本专利技术所述步骤(3)、(4)的柱层析过程中，可通过薄层层析(TLC)检测收集含目标化合物HedyanthraquinoneB(大黄素型蒽醌类化合物1,6-二羟基-2，5-二甲氧基-9,10-蒽醌)的洗脱液；所述的目标化合物用TLC检测时，以石油醚：乙酸乙酯＝1：1为展开剂，其Rf值为0.59。经实验证明，本专利技术所述大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB在制备抗肿瘤活性药物中具有应用前景。本专利技术所述大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB与DDP对照组相比较，高浓度时对人乳腺癌Bcap37细胞及人肝癌SMMC7721细胞具有显著的体外增殖抑制作用，且对SMMC7721细胞的抑制作用强于Bcap37细胞，这提示该化合物具有潜在的抗肿瘤活性。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：本专利技术所述大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB的提取、分离、纯化方法简单，抑制肿瘤细胞活性明确，具有潜在的开发为抗肿瘤药物的价值，该化合物化学结构经过波谱学数据得到确认，不存在光学异构体，可以避免光学异构体潜在的风险。(四)附图说明图1为实施例5中顺铂(DDP)、大黄素型蒽醌类化合物(I)对四种癌细胞的半致死浓度(IC50)。(五)具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但本专利技术的保护范围并不仅限于此。所述剑叶耳草藤茎2015年9月购自广西玉林中药材市场。本专利技术制备过程所用的实验仪器如表1所示。表1实验所用仪器实施例1：大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB的制备(1)甲醇浸提：将粉碎干燥后的剑叶耳草藤茎500g与甲醇2000mL混合，常温浸提7天，过滤得到甲醇提取液，滤渣重复浸提3次，合并每次所得甲醇提取液，减压蒸干，得到甲醇浸膏80g。(2)乙酸乙酯萃取：将步骤(1)所得甲醇浸膏80g分散于水400mL中，得到悬浮液，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相，减压回收溶剂，得到乙酸乙酯浸膏10g。(3)一次柱层析：用200～300目柱层析硅胶400g对步骤(2)所得乙酸乙酯浸膏10g进行柱层析分离，以石油醚/乙酸乙酯体积比分别为8：1、6：1、4：1、2：1、1：1、1：2、1：4的混合液、乙酸乙酯(纯)为洗脱剂，进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为15mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为400min，收集含目标化合物的洗脱液，减本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种大黄素型蒽醌类化合物Hedyanthraquinone B，其结构式如式(I)所示：
【技术特征摘要】
1.一种大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB，其结构式如式(I)所示：2.一种如权利要求1所述的式(I)所示HedyanthraquinoneB的制备方法，其特征在于，所述的制备方法按如下步骤进行：(1)甲醇浸提：将剑叶耳草的藤茎粉碎干燥，加入甲醇浸提提取后滤除不溶物，所得滤液减压蒸干得到甲醇浸膏；(2)乙酸乙酯萃取：将步骤(1)所得甲醇浸膏用乙酸乙酯萃取，所得萃取液减压蒸干得到乙酸乙酯浸膏；(3)一次柱层析：用200～300目柱层析硅胶对步骤(2)所得乙酸乙酯浸膏进行柱层析分离，以石油醚/乙酸乙酯体积比8：1～1：4的混合液和乙酸乙酯为洗脱剂A，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液A，所得洗脱液A减压蒸除溶剂得粗品；(4)二次柱层析：用200～300目柱层析硅胶继续对步骤(3)所得粗品进行柱层析分离，以石油醚/乙酸乙酯体积比4：1～1：2的混合液和乙酸乙酯为洗脱剂B，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液B，所得洗脱液B减压蒸除溶剂得到固体物质；(5)洗涤除杂：将步骤(4)所得固体物质用石油醚/乙酸乙酯的混合溶剂进行洗涤除杂，所得固体产物经干燥得到所述式(I)所示的大黄素型蒽醌类化合物HedyanthraquinoneB。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述甲醇浸提的操作方法为：将粉碎干燥后的剑叶耳草藤茎与甲醇混合，在20～30℃下浸提5～10天，过滤得到甲醇提取液，滤渣重复浸提2～4次，合并每次所得甲醇提取液，减压蒸干，得到甲醇浸膏；所述的甲醇加入量以所述的剑叶耳草藤茎的质量计为3～5mL/g。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述乙酸乙酯萃取的操作方法为：将步骤(1)所得甲醇浸...
【专利技术属性】
技术研发人员：王奎武，陈明龙，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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