一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法，所述试剂盒主要是针对临床检测内源性凝血途径而设计，试剂在启动内源性凝血过程中使用的试剂主要包含有激活剂、氯化钙溶液组分、同时试剂盒普通杯检测装置中加入了高分子粘附涂层，有效解决了临床全血样本在凝固过程中与运动旋转的样品杯粘附不稳定的问题，真实有效模拟人体内凝血全过程；试剂盒激活剂成分解决了现有血栓弹力图凝血试剂盒的试剂保质期短、液体试剂干涸、稳定性不高、激活剂与血液复溶不完全等问题，通过在血栓弹力图普通杯检测试剂盒组分中添加了上述稳定剂，大大提高了试剂盒的保存期限、稳定性等试剂性能，提高临床样本检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法
本专利技术属于临床血栓与止血诊断领域，主要涉及一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法
技术介绍
凝血是一个极其复杂的动态过程，涉及到许多相互作用的因子，包括凝血蛋白和纤溶蛋白、激活剂、抑制剂以及细胞成份(如血小板、细胞骨架、细胞质粒、血小板细胞表面)。治疗出血或Prothrombotic患者的最理想的方法是在最短的时间内测量相互作用的因子、细胞成份的数量以及它们的相互作用，但这是不太可能实现的。此时，临床医师只好用预防药物来降低出现凝血病的可能性，尽管这些药费用高并且可能有副作用。出现凝血功能不全时，临床医师常不得不依靠估计，或给患者输注各种血液成份，并且希望有积极的治疗效果。因此，研究人员及临床医师一直在努力探索一种较好的方法来有效处理凝血问题，从而使他们能够监测临床血栓或出血患者的整体凝血全貌，指导临床输血及治疗方案建立。近年来血栓弹力图项目被国内外广泛用于输血及药物治疗的监测，该检测方法于1948年由德国人Harter专利技术。80年代开始广泛用于临床指导术中输血取得了良好效果，现已成为当今检测凝血功能的最重要指标。血栓弹力图监测血凝块的物理特性基于以下原理：一特制静止盛有血液的圆柱形杯，以4°45’的角度旋转，每一次转动持续10秒。通过一根由螺旋丝悬挂且浸泡在血样中的针来监测血样的运动。纤维蛋白血小板复合物将杯和针粘在一起后，杯旋转所产生的旋转力能传递至血样中的针。纤维蛋白-血小板复合物的强度能影响针运动的幅度，以致强硬的血凝块能使针的运动与杯的运动同步进行。因此，针的运动幅度与已形成的血凝块的强度有直接关系。当血凝块回缩或溶解时，针与血凝块的联结解除，杯的运动不再传递给针。针的旋转被机电传感器转换成电子信号，这一电子信号能用电脑来监测。由血栓弹力图仪的设计原理可知凝血剖面图是对某些指标的测量，即第一块血凝块形成的时间、血凝块形成的动力学特性、血凝块的强度(用切应力单位dyn/cm2表示)以及血凝块的溶解。目前已有的血栓弹力图普通凝血功能检测试剂盒检测平台主要有TEG、ROTEM等厂家，试剂盒主要检测原理一般是根据内源性凝血原理在激活试剂成分中添加高岭土试剂启动内源性凝血激活途径，在空白检测样品杯中加入激活后的全血和氯化钙溶液，通过凝血酶促反应，使可溶性纤维蛋白原转化成纤维蛋白凝块，在血栓弹力图检测过程中，由于激活试剂的单人份体积含量低，一般每个激活试剂管分装体积规格为10ul-30ul/管，由于试剂微量体积，试剂最低储存效期为18个月以上，传统方法制备的试剂盒在长期储存运输过程中会有干燥失效风险，影响液体高岭土激活试剂的临床检测的准确性、稳定性及效期，同时传统高岭土试剂在干燥后进行全血激活存在复溶性问题，导致检测凝血时间延长，造成患者低凝结果；其次血栓弹力图普通凝血功能检测主要是通过全血粘附在样品杯表面，检测探针在样品杯和粘附全血转动过程中感受到血块弹性强度，模拟人体血栓形成过程，如检测样品杯及杯盖内表面光滑，血块粘附样品杯及杯盖内表面容易脱落，所以全血粘附样品杯内表面的能力决定了检测的有效性和血栓弹力图的稳定性。因此，针对以上不足，需要制备一种临床稳定性高，测量结果准确可靠的血栓弹力图普通凝血功能检测试剂盒。
技术实现思路
一、要解决的问题由于以上所述的血栓弹力图普通凝血检测试剂盒在
的局限性，本专利技术提供了一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法，本专利技术解决了血栓弹力图普通凝血试剂传统技术中的激活剂体积含量低，在储存运输过程中液体容易干燥的问题，本专利技术同时解决了普通凝血检测样品杯血块粘附容易脱落的问题，提高试剂的准确性和稳定性。二、技术方案针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法。为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供了一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒及其使用方法，所述试剂盒主要是针对临床检测内源性凝血途径而设计，试剂在启动内源性凝血过程中使用的试剂主要包含有激活剂(1)高岭土、鞣花酸、白陶土、硅藻土、等激活剂中的一种和几种混合物，该激活试剂中加入了缓冲剂、悬浮剂、分散剂、磷脂混合物、防腐剂、保湿剂等稳定剂成分。氯化钙溶液(2)组分提供了内源性凝血所需的钙离子。同时试剂盒普通杯检测装置(3)中加入了高分子粘附涂层。优选地，所述血栓弹力图普通杯检测试剂盒组分包括激活剂、氯化钙、普通杯组成。优选地，所述普通杯检测试剂盒激活剂主要有高岭土、鞣花酸、硅藻土、白陶土中的一种或几种混合，作为内源性凝血的激活试剂优选地，所述激活剂配制的质量体积终浓度为0.1-1mg/ml，例如0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml、0.6mg/ml、0.7mg/ml、0.9mg/ml、0.9mg/ml或1mg/ml。优选地，所述激活剂的缓冲剂成分包括但不限于HEPES、咪唑、PBS、Tris、巴比妥中的一种，缓冲剂配制摩尔体积比终浓度为1-10mM，例如1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM或10mM。优选地，所述的激活剂中的悬浮剂包括但不限于葡聚糖、黄原酸、PVA、海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶中的一种和几种混合物，质量体积百分比终浓度为1％-10％，例如1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％、。优选地，所述的激活剂中的分散剂包括但不限于木质素、亚甲基双甲基萘磺酸钠、聚羧酸盐中的一种和几种混合物，质量体积百分比终浓度为0.1％-0.5％。例如0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％或0.5％。优选地，所述的激活剂包含的磷脂混合物成分主要包括但不限于磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺的一种或几种混合物，质量体积比终浓度为10ug/L-20ug/L，例如10ug/L、11ug/L、12ug/L、13ug/L、14ug/L、15ug/L、16ug/L、17ug/L、18ug/L、19ug/L或20ug/L。优选地，所述的激活剂中的防腐剂包括但不限于叠氮钠、硫酸庆大霉素、硫柳汞中的一种或几种混合物，质量体积比终浓度为0.05％-0.1％，单位为g/ml，例如0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％或0.1％。优选地，所述的激活剂中的保湿剂包括但不限于甘油、海藻糖、烷基萘磺酸盐中的一种或几种混合物，终浓度为0.1％-0.5％，单位为g/ml。例如0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％或0.5％。优选地，所述氯化钙组分包含有氯化钙溶液，摩尔体积比终浓度为0.1M-1M，例如0.1M、0.2M、0.3M、0.4M、0.5M、0.6M、0.7M、0.8M、0.9M或1M。优选地，所述普通杯装置内表面通过真空涂覆工艺加入了高分子粘附涂层，普通杯涂覆多聚-D-赖氨酸PDL(分子量范围是70到150kDa),使表面产生净正电荷，更有利于细胞吸附，增加全血凝固后与普通杯内壁的粘附。在本专利技术中，所述血栓弹力图普通杯检测检测试剂盒配合LEPU8800血栓弹力图仪检测，检测过程包括以下步骤：1.在相应的LEPU8800血栓弹力本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒，其特征在于，组分包括激活剂、氯化钙、普通杯组成。

【技术特征摘要】
1.一种血栓弹力图普通杯检测试剂盒，其特征在于，组分包括激活剂、氯化钙、普通杯组成。2.根据权利要求1所述，其特征在于普通杯检测试剂盒激活剂主要有高岭土、鞣花酸、硅藻土、白陶土中的一种或几种混合，作为内源性凝血的激活试剂。3.根据权利要求2所述激活剂，其特征在于终浓度优选但不限于0.1-1mg/ml。4.根据权利要求1所述的激活剂，其特征在于，缓冲剂包括但不限于HEPES、咪唑、PBS、Tris中的一种，终浓度为1-10mM/L。5.根据权利要求1所述的激活剂，其特征在于，悬浮剂包括但不限于葡聚糖、黄原酸、PVA、海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶中的一种和几种混合物，终浓度为1％-10％。其中的百分比均为质量体积百分比，单位为g/ml。6.根据权利要求1所述的激活剂，其特征在于，分散剂包括但不限于木质素盐、亚甲基双甲基萘磺酸钠、聚羧酸盐、中的一种和几种混合物，终浓度为0.1％-0.5％。其中的百分比均为质量体积百分比，单位为g/ml。7.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏明明，李阳，邱笑违，董飒英，
申请(专利权)人：北京乐普医疗科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11