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本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株...该专利属于山东省滨州畜牧兽医研究院;山东绿都生物科技有限公司所有，仅供学习研究参考，未经过山东省滨州畜牧兽医研究院;山东绿都生物科技有限公司授权不得商用。