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中华仙影海葵溶细胞多肽CCT-I及其分离纯化方法和应用技术

技术编号:9377586 阅读:257 留言:0更新日期:2013-11-27 19:59
本发明专利技术公开了中华仙影海葵溶细胞多肽CCT-I及其分离纯化方法和应用。本发明专利技术将中华仙影海葵触手粗毒经硫酸铵盐析分段沉淀后,将活性部位依次经过Sephadex?G-100和superdex75两种凝胶过滤色谱柱分离纯化,最终首次从中华仙影海葵触手中分离得到一类溶细胞多肽,并通过SDS-PAGE电泳及LC-MS鉴定为一类未见报道的新型海葵溶细胞多肽,其中包含有的两个多肽(α&β),分子量相近,均为80kDa左右,经HPLC检测,纯度较高,且两个多肽极性相近。并且测定了其半数溶细胞率约为5.75μg·mL-1,经过MTT法检测显示,CCT-I具有强烈的体外抗肿瘤活性,可用于制备治疗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
中华仙影海葵溶细胞多肽CCT?I的分离方法,其特征在于主要包括以下步骤:1)将中华仙影海葵触手粗毒液经硫酸铵分段盐析沉淀后,得到0?40%、40%?60%和60?90%三个硫酸铵饱和度段,然后用pH=7.0含0.15mol·L?1氯化钠的10mmol·L?1PBS缓冲液复溶,待用;2)将上述60?90%硫酸铵饱和度段沉淀复溶液经含Sephadex?G?100凝胶色谱柱,采用洗脱液以0.5mL/min流速进行分离纯化,检测波长为280nm,收集检测器上显示的各个峰的峰值管,收集的洗脱液在4℃条件下用3kDa的超滤管进行浓缩,收集峰1浓缩液待用;所述洗脱液为pH=7.0含0.15mol·L?1氯化...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张朝晖秦松史文军吴建平崔红利万夕和杨海萍王李宝
申请(专利权)人:张朝晖
类型:发明
国别省市:

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