一种肺炎链球菌血清型分型的检测方法技术

技术编号:9138608 阅读:242 留言:0更新日期:2013-09-12 01:23
本发明专利技术提供了一种利用MLPA对肺炎链球菌进行血清型分型的方法,该方法首先提取待测肺炎链球菌样本基因组DNA,使用PCR预扩增引物对提取的基因组DNA进行预扩增,使用MLPA探针对因组DNA的预扩增产物进行杂交,同时在反应体系中加入相应的荧光检测探针,用连接酶连接已杂交的MLPA探针,并以MLPA通用扩增引物PCR扩增已杂交并连接好的MLPA探针,使用多色荧光溶解曲线分析PCR产物,即可实现对肺炎链球菌进行血清型分型。本发明专利技术的检测方特异性、灵敏度高、可同时对10种血清型进行分型,仅需2-4小时,避免传统MLPA检测中的多次开盖操作,减少污染可能,可满足高通量样品检测,特别适合检验部门使用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种肺炎链球菌血清型分型的检测方法,包括以下步骤:步骤一、提取待测肺炎链球菌样本基因组DNA;步骤二、PCR预扩增:以步骤一提取的待测肺炎链球菌样本的基因组DNA作为模板,使用PCR预扩增引物对提取的肺炎链球菌标本基因组DNA进行预扩增;步骤三、MLPA探针杂交、连接、扩增:使用MLPA探针对待测肺炎链球菌样本基因组DNA?PCR预扩增产物进行杂交,同时在反应体系中加入相应的荧光检测探针;用连接酶连接已杂交的MLPA探针,并以MLPA通用扩增引物PCR扩增已杂交并连接好的MLPA探针;步骤四:MLPA产物检测:使用多色荧光溶解曲线分析PCR产物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:黄劭
申请(专利权)人:武汉缉熙生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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