一种江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法技术

江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法：(1)在显微镜下切取红芽芋单芽长约1mm的茎尖；(2）茎尖在MS+KT2mg/L+NAA0.5mg/L+0.75M蔗糖的固体培养基上预培养3d；(3)茎尖预培养后，采用60％PVS2在25℃脱水60min，再用100％PVS2在0℃脱水90min，更换新的PVS2后直接投入液氮；(4)保存后，茎尖在37℃水浴中化冻。化冻后用MS+KT2mg/L+NAA0.5mg/L+1.2M蔗糖的液体培养基洗涤3次，每次10min。洗涤后的茎尖先暗培养5d(温度为25℃)再转入正常的光周期下(光照时间14h/d，光强约1500-2000lx，培养温度25℃)培养，15d左右茎尖可发育成正常的芽；(5)将萌发的芽转入生根培养基1/2MS+NAA0.1～0.5mg/L中培养，即可得到红芽芋脱毒苗。本发明专利技术与现有技术比较，红芽芋试管苗的脱毒率高，而且茎尖取材大、操作简单方便。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法，其特征在于有以下步骤：(1)在体视显微镜下切取江西铅山红芽芋单芽长约1mm的茎尖；(2)红芽芋茎尖在附加0.75M蔗糖的MS+KT2mg/L+NAA0.5mg/L固体培养基上预培养3d，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500?2000lx，培养温度25±2℃；(3)红芽芋茎尖预培养后，采用60％的冰冻保护剂PVS2(30％(w/v)甘油+15％(w/v)乙二醇+15％(w/v)二甲基亚砜+0.4M蔗糖，pH5.8)在25±2℃脱水60min，再用100％PVS2在0℃脱水90min，更换新的PVS2后，直接投入液氮1d；(4)从液氮中取出后，...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：洪森荣，尹明华，
申请(专利权)人：上饶师范学院，
类型：发明
国别省市：