用于快速检测ATP的荧光共振体系的制备方法技术

技术编号:8933793 阅读:256 留言:0更新日期:2013-07-18 02:02
用于快速检测ATP的荧光共振体系的制备方法,包括以下步骤:步骤一:准备一种Cy3荧光标记的ATP-aptamer适配体;步骤二:将QDs与ATP-aptamer适配体互补链进行偶联反应,得到QDs分子探针;步骤三:将步骤2得到的QDs分子探针与Cy3荧光标记的ATP适配体反应,得到ATP适配体与互补链相互作用后的用于检测ATP的荧光共振体系。本发明专利技术利用了ATP与其配体链(aptamer)特异性结合的特点,结合能量共振转移技术,实现了对ATP的快速检测,并且实现了对线粒体内ATP浓度变化的实时监控,为ATP的体外及体内检测监控提供了一种新的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物技术和快速诊断检测领域,特别涉及用于快速检测ATP的荧光共振体系的制备方法,适用于低浓度ATP的快速检测以及细胞生物学线粒体功能等方面的应用。
技术介绍
三磷酸腺苷(ATP)存在于从微生物到高等动植物细胞所有的生物体中。ATP在细胞体内主要作用是提供能量,参与体内脂肪、蛋白质、糖和核酸的代谢,是机体能量的重要来源,在维持生物体的正常机能上有着无可替代的作用。ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用,可作为细胞活性的一个重要标志物。ATP也常作为微生物污染的一个指标,通过检测ATP含量,可以检测食品、水、啤酒、药品、化妆品等样品中的微生物含量,从而反应出其受污染的程度。线粒体是细胞内氧化磷酸化和合成ATP的主要场所,通过监测活细胞线粒体内ATP含量的改变,可以评价多种药物、生物制剂或生物活性物质引起的细胞杀伤、细胞抑制和细胞增殖作用。传统的ATP检测方法有生物发光法、高效液相色谱法和同位素示踪法等。其中高效液相色谱法操作复杂且检测时间较长;同位素示踪法虽检测灵敏度较高,但污染较大限制其应用。采用生物发光方法是目前较为流行的方法之一,该方法基本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于快速检测ATP的荧光共振体系的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:准备一种Cy3荧光标记的ATP?aptamer适配体,ATP?aptamer适配体为3’?Cy3修饰的DNA适配体,其序列信息为:5’?ACCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT?Cy3?3’;步骤二:将QDs与ATP?aptamer适配体互补链进行偶联反应,得到QDs?分子探针,QDs为羧基表面水溶性量子点(COOH?QDs),浓度为1uM;ATP适配体互补链为5’?NH2?(CH2)12修饰的DNA,其序列信息为:5’?NH2?(CH2)12?ACCTTCCTCCGCAATACTCCCCCAGGT?3...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:李政彭年才刘小龙
申请(专利权)人:西安交通大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1