【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种。
技术介绍
羊泰勒虫病(Ovine and caprine theileriosis )是由媒介蝶传播的由泰勒科泰勒属的原虫寄生于绵羊和山羊巨噬细胞、淋巴细胞和红细胞内所引起的疾病的总称。羊泰勒虫病最早在1914年发现于埃及绵羊。我国最早在1958年由杨辅国等报道了四川的羊泰勒虫病，随后在青海、甘肃、辽宁、内蒙古、陕西和宁夏等地也有本病流行的报道。最近，在我国湖北、广东、浙江、贵州、新疆等省也检测到羊泰勒虫病原体。本病主要呈地方性流行，发病率高达36.0%-100%，病死率高达17.8%-75.4%。该病危害严重，可引起羔羊和外地引进羊大量死亡，使慢性发病的山羊和绵羊发育迟缓，产肉量和产毛量显著下降，从而给全球养羊业造成重大经济损失。羊泰勒虫裂殖子的分离纯化一直是造成许多相关研究停滞不前的重要原因，任何非虫体来源的物质都有可能对其研究产生严重偏差，例如，羊泰勒虫蛋白质组全谱分析、差异蛋白分析与研究、转录组学的相关研究等，这都对羊泰勒虫的分离纯化技术提出了更高的要求。目前，国内外的学者已经建立了一些分离微小寄生虫的方法，例如，利用纤维素滤膜过滤...
【技术保护点】
一种用于分离纯化羊泰勒虫裂殖子的免疫亲和层析柱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）抗体的纯化：利用protein?G层析柱纯化血清抗体：将填料与结合缓冲液按照1:1体积比例预混后缓慢装入层析柱中，待填料充分沉淀后按照流速1?ml/min加5?ml结合缓冲液来平衡，将染虫绵羊血清按照流速1?ml/min加入到制好的层析柱中，收集流出液；用30?ml结合缓冲液按照流速2?ml/min过柱，待完全清洗后，用10?15?ml洗脱缓冲液按照流速1?ml/min过柱，收集流出液，SDS?PAGE验证纯化效果；用平衡缓冲液平衡柱子，以备下次使用；所述结合缓冲液：20?mmol/L...
【技术特征摘要】
1.一种用于分离纯化羊泰勒虫裂殖子的免疫亲和层析柱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)抗体的纯化: 利用protein G层析柱纯化血清抗体:将填料与结合缓冲液按照1:1体积比例预混后缓慢装入层析柱中，待填料充分沉淀后按照流速I ml/min加5 ml结合缓冲液来平衡，将染虫绵羊血清按照流速I ml/min加入到制好的层析柱中，收集流出液；用30 ml结合缓冲液按照流速2 ml/min过柱,待完全清洗后,用10-15 ml洗脱缓冲液按照流速I ml/min过柱，收集流出液，SDS-PAGE验证纯化效果；用平衡缓冲液平衡柱子，以备下次使用； 所述结合缓冲液:20 mmol/L磷酸氢二钠,0.15 mol/L氯化钠，pH 8.0 ； 所述洗脱缓冲液A:0.1 mol/L甘氨酸，pH 2.5 ； 所述平衡缓冲液:I mol/L Tris-HCl，pH 8.5 ； ...
【专利技术属性】
技术研发人员：殷宏，罗建勋，李有全，张晓，刘志杰，陈泽，杨吉飞，关贵全，任巧云，刘爱红，牛庆丽，刘军龙，马米玲，岑双庆，何海宁，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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