以抗生素为碳源生长的土壤微生物的分离方法技术

本发明专利技术公开了一种以抗生素为碳源生长的土壤微生物的分离方法，包括以下步骤：1）制备含有(NH4)2SO4?、MgSO4.7H2O、EDTA等成分的液态单一碳源介质；2）、利用液态单一碳源介质制备液体抗性培养基、固体抗性培养基；3）、用液体抗性培养基将菌悬液稀释至菌悬液的体积浓度为0.1%的土壤稀释液；4）、在超菌台上，将土壤稀释液涂布在固体抗性培养基上；然后室温静止5~10?min；接着，将固体抗性培养基倒置于恒温培养箱29~31℃下培养，直至固体抗性培养基表面长出菌落，再通过平板划线得到纯培养物，纯培养物为土壤细菌。采用本发明专利技术的方法分离土壤微生物具有操作简便、分离效果好等特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
以抗生素为碳源生长的土壤微生物的分离方法，其特征在于包括以下步骤：1）、制备单一碳源介质：溶解5?g?(NH4)2SO4,?3?g?KH2PO4,?0.5?g?MgSO4.7H2O,?15?mg?EDTA,?4.5?mg?ZnSO4.7H2O,?4.5?mg?CaCl2.2H2O,?3?mg?FeSO4.7H2O,?1?mg?MnCl2.4H2O,?1?mg?H3BO3,?0.4?mg?Na2MoO4.2H2O,?0.3?mg?CuSO4.?5H2O,?0.3?mg?CoCl2.6H2O?和?0.1?mg?KI至900ml蒸馏水中，用0.1mol/L?NaOH溶液调pH至6.2~6.4，再用蒸馏水定容至1000ml；得液态单一碳源介质；2）、制备液体抗性培养基和固体抗性培养基：在液态单一碳源介质中加入青霉素直至青霉素的浓度为0.8~1.2g/L，过0.22μm滤膜；得液体抗性培养基；在500mL的液态单一碳源介质中加入7.5克琼脂后灭菌，冷却至40~50℃后，加入经过0.22μm滤膜的青霉素溶液直至所得的液态物中青霉素的浓度为0.8~1.2g/L；所得的液态物冷却后，得固体抗性培养基；3）、制备土壤稀释液：称1g土壤放入盛有49?mL磷酸盐缓冲液的容器中，在摇床上振荡20~40min；得菌悬液；用液体抗性培养基将菌悬液稀释至菌悬液的体积浓度为0.1%的土壤稀释液；以上操作在超菌台中完成；4）、倒置培养：在超菌台上，将土壤稀释液涂布在固体抗性培养基上；然后室温静止5~10?min；接着，将固体抗性培养基倒置于恒温培养箱29~31℃下培养，直至固体抗性培养基表面长出菌落，再通过平板划线得到纯培养物，所述纯培养物为土壤细菌。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张奇春，王京文，侯昌萍，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：