耐冬山茶愈伤组织再生植株的方法技术

耐冬山茶愈伤组织再生植株的方法，属于生物技术领域。其特征在于包括以下步骤：采集9月初的耐冬山茶果实，消毒、清洗；剥去种子的内外种皮，接种于愈伤诱导培养基；第25-28天将材料转移至愈伤组织过渡培养基上；待愈伤组织由淡黄色变为黄色略带一点红色后将材料转移至愈伤组织分化不定芽培养基内；材料成型并长至3-4cm的芽条，其基部用IBA浸没处理，然后转到MV液体培养基的纸桥上诱导生根，20-22天开始启动，透明略带红色的幼根长出，再培养一段时间之后，幼根伸长并逐渐木质化。上述耐冬山茶愈伤组织再生植株的方法，为耐冬山茶大规模无性繁殖提供一种周期较短，繁殖系数较高的方法，也为山茶分子育种奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体为。
技术介绍
耐冬山茶为第三纪的残遗植物种类，因地壳运动，使得青岛耐冬与外界山茶基因交流甚少，从而保留了古老而独具特色的遗传特性。从观赏角度而言，耐冬山茶花色艳丽，花型优美，为青岛市花；同时，其叶茎花亦可入药，用于预防和治疗多种疾病，极具医疗应用前景；不仅如此，耐冬山茶还具有很强的CO2吸收能力，且对H2S等有害气体具有较强的抗性，故亦具有净化空气等环保作用，可谓全身是宝。目前生产上使用的种苗仍是以传统方式培育为主。然而，山茶的生长速度慢，繁殖系数低，靠嫁接、扦插等传统方式培育，完全不能满足市场的需求。而关于山茶属植物的组织培养，国内从20世纪80年代开始就有诸多研究工作，并取得了可喜的进展。采用山茶种子的子叶、幼龄山茶花的茎尖与带芽茎节、成年山茶花的茎尖与带芽茎节等，作为外植体均可获得再生植物。现阶段通过“芽生芽”这种茎段培养的方式得到耐冬山茶的例子已有，而对于耐冬山茶由愈伤组织诱导到不定芽分化的例子却鲜有报道，也未见专利申请。
技术实现思路
针对现有技术中存在的上述问题，本专利技术的目的在于设计提供一种的技术方案，采用该方法繁殖系数较高，周期较短，本文档来自技高网...

【技术保护点】
耐冬山茶愈伤组织再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤：1）采集9月初的耐冬山茶果实，剥去果皮，用洗涤剂搓洗种子，再用自来水搓洗至无泡沫，置于培养瓶中，加入75%酒精进行第一次消毒清洗8?12秒，然后纯净水清洗2?3遍，沥干水分，盖上瓶盖，置于无菌超净台备用；2）再次使用75％酒精对种子表面消毒25?35秒，接着使用0.1％HgCl2浸泡6?10分钟，然后用无菌水冲洗5?6遍，清洗完毕后将种子铺在放有过滤纸的平皿里吹干水分，备用；3）剥去种子的内外种皮，接种于愈伤诱导培养基上，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000?Lx，光照时间为10?12h/d；所述的愈伤诱导培养基为MS基本培...

【技术特征摘要】
1.冬山茶愈伤组织再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤: 1)采集9月初的耐冬山茶果实，剥去果皮，用洗涤剂搓洗种子，再用自来水搓洗至无泡沫，置于培养瓶中，加入75%酒精进行第一次消毒清洗8-12秒，然后纯浄水清洗2-3適，浙干水分，盖上瓶盖，置于无菌超净台备用； 2)再次使用75%酒精对种子表面消毒25-35秒，接着使用0.1 % HgCl2浸泡6_10分钟，然后用无菌水冲洗5-6遍，清洗完毕后将种子铺在放有过滤纸的平皿里吹干水分，备用； 3)剥去种子的内外种皮,接种于愈伤诱导培养基上,培养温度为25±2°C,光照光强为2500 3000 Lx，光照时间为10_12h/d ;所述的愈伤诱导培养基为MS基本培养基中加入0.4-0.6 mg じ12， 4-D和1.8-2.2 mg じ1 6-BA，愈伤诱导培养基中蔗糖含量为2_4%，琼脂0.6-0.8%,灭菌前将PH调至5.7-5.9，120_125°C下灭菌20-25分钟； 4)材料接入愈伤诱导培养基后15-18天后开始启动，待第25-28天的时候诱导出的细密的愈伤组织已经在材料与培养基接触的外围长满了厚实的ー圈，淡黄色，泛着些许绿色、晶莹、剔透，这时再将长有愈伤组织的材料转移至愈伤组织过渡培养基上，培养温度为25±2°C，光照光强为2500 3000 Lx，光照时间为10_12h/d ;所述的愈伤组织过渡培养基为MS基本培养基中加入0.1-0.15 mg じ1NAA + 2.0-2.2 mg じ16-BA ； 5)材料在愈伤组织过渡培养基内进行培养，待愈伤组织由淡黄色变为黄色略带ー点红色后将材料转移至愈伤组织分化不定芽培养基内，培养温度为25±2°C，光照光强为2500 3000 Lx，光照时间为10_12h/d ;所述的愈伤组织分化不定芽培养基为MS基本培养基中加入0.4-0.6 mg じ1NAA + 9-11 mg じ1 6-BA或者MS基本培养基中加入0.4-0.6mg じ1 IBA + 9-11 mg じ16-BA ; 6)材料成型并长至3-4cm的芽条，其基部...

【专利技术属性】
技术研发人员：李纪元，范正琪，李辛雷，殷恒福，吴斌，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院亚热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：