用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法技术

技术编号:8300082 阅读:197 留言:0更新日期:2013-02-07 02:45
本发明专利技术公开了一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法。氧化还原探针由对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物、纳米金溶胶组成。氧化还原探针中的纳米金溶胶与巯基席夫碱配合物有较强的相互作用,能够为无标记CRP阻抗型免疫传感器提供较强的阻抗检测信息号,有效的提高了免疫传感器的检测性能。本发明专利技术的氧化还原探针制备简单,用于无标记CRP阻抗型免疫传感器检测CRP含量,具有检测限低、稳定性好和重现性好等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于无标记CRP( C反应蛋白)阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法。
技术介绍
CRP是一种人体内由肝细胞产生并可以结合肺炎球菌细胞壁的急性时期糖蛋白,在人体中含量的正常参考值通常< 10mg/L,含量极其微少。但是当人体自身受到外来细菌或者病毒入侵导致发生急性炎症、机体局部组织损伤或者缺血、产生恶性肿瘤时,在白细胞介素6的调控下,肝脏会迅速分泌产生大量的CRP。因此在临床实践中经常将人体内CRP的含量作为判断肿瘤恶化、急性炎症、急性传染病等的重要生理指标。因此,如何找到一种快速有效、操作简单且成本低廉的检测方法引起了广大科学工作者的关注。无标记电化学免疫传感器通过直接测定抗原抗体复合物形成时的物理、化学变化,极大地简化制备和操作过程,适应直接、实时、原位、在线的痕量免疫分析,已经广泛应用于临床医学、环境、制药、食品等分析领域中。氧化还原探针的选择对无标记电化学免疫传感器的应用效果具有重要的影响,这是因为其分析原理是基于测定抗原/抗体结合前后,氧化还原探针分子同电极之间的电子转移速率或电子转移阻抗的变化,来实现抗原/抗体高灵敏检测的目的。常见的氧化还原探针K4Fe (CN) 6常常无法作为电化学免疫传感器的探针。因此,不断开发适合各种抗原/抗体的检测的无标记电化学免疫传感器的氧化还原探针具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为无标记CRP阻抗型免疫传感器提供一种氧化还原探针,以提高无标记CRP阻抗型免疫传感器的检测性能。本专利技术的目的是通过如下步骤来实现的I. 一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针,其特征在于由对苯二甲醒缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物无水乙醇溶液、纳米金溶胶组成。上述对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱结构式为权利要求1. 一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法,其特征在于具体步骤为(1)合成对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱在搅拌的条件下,向20mL溶有8-12mmol对苯二甲醛的无水乙醇溶液中,缓慢滴加40mL含8-12mmol氨基苯硫酚的无水乙醇溶液,60°C水浴加热4小时,得亮黄色沉淀,用乙醇重结晶,真空干燥即得对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱;(2)合成对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物将无水乙醇和N,N' —二甲基甲酰胺按体积比为2 1配制成混合溶液,在搅拌的条件下,向5mL溶有O. 5-1. 5mmol步骤(I)所得的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱的上述混合溶液中,缓慢滴加8mL含l-3mmol乙酸镍的N,N' —二甲基甲酰胺溶液,75°C水浴加热4小时,得淡绿色沉淀,用乙醇重结晶,真空干燥即得对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物;(3)制备氧化还原探针取O. Olg-O. 05g步骤(2)所得的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物粉末,在室温下搅拌溶于50mL无水乙醇中,取此溶液15-25 μ L缓慢加入到7mL_12mL纳米金溶胶中,在36°C下混合均匀后的溶液即为氧化还原探针。全文摘要本专利技术公开了一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法。氧化还原探针由对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物、纳米金溶胶组成。氧化还原探针中的纳米金溶胶与巯基席夫碱配合物有较强的相互作用,能够为无标记CRP阻抗型免疫传感器提供较强的阻抗检测信息号,有效的提高了免疫传感器的检测性能。本专利技术的氧化还原探针制备简单,用于无标记CRP阻抗型免疫传感器检测CRP含量,具有检测限低、稳定性好和重现性好等优点。文档编号G01N27/26GK102914576SQ20121046768公开日2013年2月6日 申请日期2012年11月19日 优先权日2012年11月19日专利技术者刘峥, 袁帅, 刘进 申请人:桂林理工大学本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法,其特征在于具体步骤为:(1)合成对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱:?在搅拌的条件下,向20mL溶有8?12mmol对苯二甲醛的无水乙醇溶液中,缓慢滴加40mL含8?12mmol氨基苯硫酚的无水乙醇溶液,60℃水浴加热4小时,得亮黄色沉淀,用乙醇重结晶,真空干燥即得对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱;(2)合成对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物:将无水乙醇和N,N′—二甲基甲酰胺按体积比为2:1配制成混合溶液,在搅拌的条件下,向5mL溶有0.5?1.5mmol步骤(1)所得的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱的上述混合溶液中,缓慢滴加8mL含1?3mmol乙酸镍的N,N′—二甲基甲酰胺溶液,75℃水浴加热4小时,得淡绿色沉淀,用乙醇重结晶,真空干燥即得对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物;(3)制备氧化还原探针:???取0.01g?0.05g步骤(2)所得的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物粉末,在室温下搅拌溶于50mL无水乙醇中,取此溶液15?25μL缓慢加入到7mL?12mL纳米金溶胶中,在36℃下混合均匀后的溶液即为氧化还原探针。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘峥袁帅刘进
申请(专利权)人:桂林理工大学
类型:发明
国别省市:

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