一种培育自花结实樱桃新种质的方法技术

本发明专利技术提供了一种高效培育自花结实樱桃新种质的方法，包括杂交亲本配置、有性杂交和杂交后代胚培养，其中，杂交亲本中至少其一为自花结实樱桃品种。本发明专利技术根据樱桃自花结实的遗传特性，结合传统杂交与胚培养等方法，获得大批量的自花结实后代，依据它们的综合经济性状、果实套袋，结合自花结实分子标记技术选育出一批具有优质、自花结实等特性的樱桃新品系，具有广阔的推广前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物育种领域，具体地说，涉及一种高效培育自花结实樱桃新种质的方法。
技术介绍
目前果树栽培中使用的品种多为自花不结实，因此需要配置合适的授粉品种，如授粉树搭配不合理则会严重影响坐果率和产量，在设施栽培中的表现尤为突出。即便栽培少数自花结实品种也均为国外引进，部分品种存在雨季裂果、适应性差等问题，因此培育适宜我国气候、土壤等条件的自花结实品种应用于生产，尤其是对设施栽培的樱桃而言更具有重要意义和实际应用价值。根据育种实践，培育自花结实后代首先应选自花结实的品种做亲本，再结合另一个具有优良特性的品种做亲本设置杂交组合。加拿大从 ‘Lambert’ XJI2420后代中成功选育出了自交亲和的品种‘Stella’。然后，用Van (S1S3)做母本，‘Stella’做父本杂交又选出了两个自交亲和的姊妹系‘Lapins’(拉宾斯)和‘Sunburst’(艳阳)。樱桃早熟品种由于果实发育期短，胚发育不完全，常规播种后种子萌发率极低，已成为培育早熟樱桃品种的瓶颈。试验表明，自然授粉的‘红灯’和‘红灯’与‘Stella’的杂交种子实生播种出苗率低于4%，严重阻碍着育种工作的进一步开展。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种高效培育自花结实樱桃新种质的方法。为了实现本专利技术目的，本专利技术的，包括杂交亲本配置、有性杂交和杂交后代胚培养的步骤，其中，杂交亲本中至少其一为自花结实樱桃品种。前述的方法，包括以下步骤1)选择自花结实的樱桃品种及另一具有优良特性(例如果实个大、色泽好、风味佳等)的早熟樱桃品种作为亲本进行杂交，人工授粉后的花朵进行套袋；2)取着色后的果实，去掉果肉及外种皮后将种子浸泡于70%酒精中，然后用无菌水冲洗并置于0. 1%升汞中进行消毒，消毒后用无菌水冲洗并浸泡于无菌水中，剥去内种皮，最后用84液消毒；3)将消毒后的种子接种于基础培养基中进行培养；4)待胚萌发出新梢后剪下接种于诱导分化培养基中进行培养；5)待新梢高于2cm时，选择直立、有4片以上舒展叶片的健壮苗，从基部切下转移至生根培养基上获得生根植株；6)最后将培养成株的杂交苗定植田间，结果后进行综合性状评价，利用套袋结合自花结实分子标记技术筛选出具有早熟、优质、自花结实等特性的樱桃新种质。前述的方法，步骤I)中所述亲本优选为樱桃品种‘Stella’和‘红灯’。前述的方法，步骤I)具体为采集大气球期的‘Stella’花药，于22_28°C放置24小时，待花粉散出后用研钵研磨，装入瓶中备用；选大气球期的‘红灯’花蕾，去雄，蘸取‘Stella’花粉给其柱头授粉，然后用硫酸纸套袋，培养杂交后代。前述的方法，步骤2)具体为取着色后的果实，去掉果肉及外种皮后将种子浸泡于70%酒精中0. 5min，然后用无菌水冲洗2次,将种子置于0. 1%升汞中消毒8min，然后用无菌水冲洗2次并浸泡于无菌水中6h，剥去内种皮，最后用84液消毒。前述的方法，步骤3)中所述的基础培养基，其配方为MS+6-BA1. 0mg/L+IAA0. 4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6. 7g/L，以蒸馏水配制。前述的方法，步骤4)中所述的诱导分化培养基，其配方为MS+6-BA0. 5mg/L+NAAO. lmg/L+鹿糖30g/L+琼脂6. 7g/L,以蒸懼水配制。 前述的方法，步骤5 )中所述的生根培养基，其配方为1/2MS+IAA0. 3mg/L+1BAO. 3mg/L鹿糖30g/L+琼脂6. 7g/L,以蒸懼水配制。其中，步骤3) -5)的培养条件为22-28°C，2000-30001x光照培养。本专利技术针对当前樱桃育种及生产中存在的问题，以优质、自花结实的樱桃品种‘Stella’与早熟、大果的‘红灯’做亲本进行杂交，对获得的胚进行培养，成株率71.19^83.7%。将培养成株的杂交苗定植田间，结合自花结实分子标记技术筛选出‘红灯’X ‘Stella’组合的后代36株，自花结实比例高达70. 8%，对已结果的株系进行套袋，坐果率在28. 99%-85. 5%之间，结合果实性状评价，最终获得优质、自花结实的甜樱桃新优系，从而建立一种高效的自花结实樱桃新种质的育种方法，具有广阔的推广前景。与现有技术相比，本专利技术的优点在于(一)本专利技术选用综合经济性状优良的樱桃品种作为两亲本，杂交后代中综合经济性状好的比例高。(二)本专利技术优选‘Stella’与‘红灯’两个樱桃品种为亲本，采用传统杂交与胚培养相结合的方法，杂交后代成株率高达71. 19T83. 7%，自花结实后代的比例高达70. 8%。(三)本专利技术采用套袋结合自花结实分子标记技术筛选自花结实新种质结果准确可靠。(四)本专利技术育种方法简单、效率高、成本低，对研究环境及条件设施要求不严格，适于基层推广及应用。具体实施例方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。以下实施例中涉及的樱桃品种，其中‘Stella’系1993年引自美国，‘红灯’、‘红艳’和‘Van’系1993年引自大连，保存于河北省农林科学院昌黎果树研究所的18年生树；‘lapins’系1999年引自山海关，保存于河北省农林科学院昌黎果树研究所的12年生树。以下实施例中涉及的符号释义MS表示MS培养基；IAA为吲哚乙酸(Indole-3-acetic acid) ;6_BA 为 6_ 卞氛基腺嘿呤(6-Benzylaminopurine) ；NAA 为蔡乙酸(Naphthalene acetic Acid) ; IBA 为卩引哚丁酸(Indole-3-butyric acid)。实施例I自花结实樱桃新种质的育种一‘红灯’ X ‘Stella’I. I 步骤I)采集大气球期的‘Stella’花药，于22_28°C放置24小时，待花粉散出后用研钵研磨，装入瓶中备用；选大气球期的‘红灯’花蕾，去雄，蘸取‘Stella’花粉给其柱头授粉，然后用硫酸纸套袋，培养杂交后代。2)取接近成熟的果实，去掉果肉及外种皮后将种子浸泡于70%酒精中0. 5min，然后用无菌水冲洗2次，将种子置于0. 1%升汞中消毒8min，然后用无菌水冲洗2次并浸泡于无菌水中6h，剥去内种皮，最后用84液消毒。3)将消毒后的种子接种于基础培养基中进行培养。基础培养基的配方MS+6-BA1. 0mg/L+IAA0. 4mg/L+鹿糖30g/L+琼脂6. 7g/L,以蒸懼水配制。培养条件22-280C，2000-30001x 光照培养。4)待胚萌发出新梢后剪下接种于诱导分化培养基中进行培养。诱导分化培养基的配方MS+6-BA0. 5mg/L+NAAO. lmg/L+鹿糖30g/L+琼脂6. 7g/L,以蒸懼水配制。培养条件22-280C，2000-30001x 光照培养。5)待新梢高于2cm时，选择直立、有4片以上舒展叶片的健壮苗，从基部切下转移 至生根培养基上获得生根植株。生根培养基的配方1/2MS+IAA0. 3mg/L+IBA0. 3mg/L蔗糖30g/L+琼脂6. 7g/L，以蒸馏水配制。培养条件22-28°C，2000-30001x光照培养。6)最后将培养成株的杂交苗定植田间，结果后进行综合性状评价，利用套本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种培育自花结实樱桃新种质的方法，包括杂交亲本配置、有性杂交和杂交后代胚培养的步骤，其特征在于，杂交亲本中至少其一为自花结实樱桃品种。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵艳华，吴雅琴，程和禾，吴永杰，李玉生，陈龙，刘国俭，常瑞丰，
申请(专利权)人：河北省农林科学院昌黎果树研究所，
类型：发明
国别省市：