一种小鼠结肠肌电生理活动测定方法技术

本发明专利技术公开了一种鼠结肠肌电生理活动的测定方法及用途。方法用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘模型，后选用医用缝合针，铜丝制作成铜丝电极，测定其结肠的肌电生理活动变化。结果与对照组相比，便秘组小鼠的结肠慢波频率、频率变异系数、振幅、振幅变异系数有极显著差异P<0.01。结论此小鼠结肠肌电生理活动的测定方法具有以下优点：1、该测定方法材料易得，简单易行，重复性好，成功率高，2、对研究对象损伤轻微，适用于小鼠等小动物，3、该测定方法可客观地反映小鼠不同生理状态下结肠肌电活动的变化，4、本发明专利技术为系统研究结肠运动机理及为便秘的防治提供了有力的工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医疗评价及检测
，具体地说涉及一种鼠结肠肌电生理活动测定方法及用途。
技术介绍
随着人们生活水平的提高、工作节奏的加快，便秘的发病率逐年上升。便秘作为ー种常见的临床症状，目前确切病因不明。据研究显示，便秘患者结肠推进性收缩波数目减少，收缩幅度减低，导致粪便在结肠通过减慢。由于结肠在有效地促使粪便排出体外方面具有重要作用，因此便秘常被认为是结肠动力异常所致。结肠的肌电动作电位产生于慢波之上，与平滑肌收缩相一致，是推进性运动的主 要动力，因而结肠肌电活动作为ー项客观的电生理指标，可间接反映结肠动力状況。记录肌电活动是目前结肠动力研究的重要方法之一。目前在大鼠身上的电极埋植技术已有公开文献报道，但该技术在小鼠动物身上均难以实现。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种鼠结肠肌电生理活动的測定方法及用途。本专利技术公开了ー种测定鼠结肠肌电生理活动的方法，包括如下步骤 a)取鼠，麻酔，使其仰卧于手术台上； b)消毒，沿下腹正中纵行切开腹部，显露回盲部，于距盲肠1-1.5cm的结肠处安置一对铜丝电极； c)导线经切ロ引出接肌电信号记录仪。其中所述的鼠为小鼠。其中步骤b)中，铜丝的直径为0. 25-0. 5cm。其中步骤b)中，两铜丝电极相距0. 5cm。其中步骤b)中，将铜丝电极插入浆肌层内。其中步骤c)中，肌电信号记录仪的灵敏度參数选择时间常数为0. 001s，増益放大倍数为250-500，高频滤波为15-30HZ。其中步骤C)中，肌电信号记录仪为BL-410、BL-420、BL-420F等BL-410系列生物机能实验系统。本专利技术的另一目的是提供基于便秘小鼠动物模型的药物筛选平台，即结肠肌电活动测定方法在便秘小鼠模型中的应用。便秘为临床常见症状，发病率高，常以排便间隔延长、大便干结、大便艰涩不畅为主要表现。因其病因不明确，临床疗效欠佳，本专利技术通过建立小鼠便秘模型，观察其结肠肌电生理变化情况，分析便秘小鼠结肠肌电生理电活变化与便秘的内在联系，从而探讨可能发生便秘的机制，为其临床防治便秘提供理论依据。本专利技术首次成功将结肠肌电生理活动測定方法应用于便秘小鼠，该测定方法材料易得，简单易行，重复性好，成功率高，对研究对象损失轻微，适用于小鼠等小动，可客观地反映小鼠不同生理状态下结肠肌电活动的变化，为系统研究结肠运动机理及为便秘的防治提供了有力的工具。附图说明图I对照组小鼠结肠肌电图。图2便秘组小鼠结肠肌电图。 具体实施例方式材料与方法 I材料 实验动物健康昆明小鼠，体重在20g 28g之间，雌雄各半。 试剂复方地芬诺酯片为江苏平光制药有限责任公司产品(批号0805221,2. 5g/片)，曙红Y为上海永叶生物科技有限公司(CAS号17372-87-1)。 导线铜丝，直径为0. 25mm。 仪器BL-410生物机能实验系统。2 方法 2.I药物给予方法 灌胃给药。 2.2结肠肌电活动參数分析 将每组的记录结果以3min作为ー个时间段的频率和振幅的均值、标准差及变异系数进行比较。慢波频率变异系数(％)=慢波频率标准差/慢波频率均值X 100%慢波振幅变异系数(％)=慢波振幅标准差/慢波振幅均值X 100% 2.3统计学处理 数据以土s表示，采用Excel2007软件进行t检验。实施例I便秘小鼠模型的建立 I. I分组取小鼠20只，雌雄兼用，称重后随机分成2组，对照组，便秘组，每组10只。I. 2药剂的配制取2片复方地芬诺酯片加蒸馏水5ml配成混悬液。取2g曙红加IOml蒸馏水配成混悬液。I. 3建模试验前24h停食给水，便秘组按10mg/kg复方地芬诺酯混悬液灌胃复制便秘模型。对照组则给水和淀粉的混悬液替代。每天记录小鼠粪便粒数、粪便的形态及小鼠的体重，井根据粪便及体重变化适当增减给药剂量。饲养时间为30天。2.实验指标建模30min后各组按10mg/kg曙红混悬液对小鼠进行灌胃。灌胃后小鼠首粒红便的时间，粪便的性状、粒数。3.结果便秘组小鼠的粪便较对照组小鼠的粪便细小、干硬。便秘组及芦荟组小鼠6h内排便的粒数较对照组明显減少，首粒红便排出的时间长(见表I)。表I小鼠排便情况的测定(f±0本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测定鼠结肠肌电生理活动的方法，包括如下步骤：a)？取鼠，麻醉，使其仰卧于手术台上；b)？消毒，沿下腹正中纵行切开腹部，显露回盲部，于距盲肠1？1.5cm的结肠处安置一对铜丝电极；c)？导线经切口引出接肌电信号记录仪。

【技术特征摘要】
1.一种用于測定鼠结肠肌电生理活动的方法，包括如下步骤 a)取鼠，麻酔，使其仰卧于手术台上； b)消毒，沿下腹正中纵行切开腹部，显露回盲部，于距盲肠1-1.5cm的结肠处安置一对铜丝电极； c)导线经切ロ引出接肌电信号记录仪。2.权利要求I所述的測定方法，其中鼠为小鼠。3.权利要求I所述的測定方法，步骤b)中，铜丝的直径为0.25-0.5cm。4.权利要求I所述的測定方法，步骤b)中，两铜丝电极相距0.5cm。5...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜爱林，姜洪波，侯软玲，郭永臣，卢智敏，宋亭亭，李多多，杨俊，刘晓丽，路承彪，谭军，沈慧，安娜，徐磊，宦楠楠，连阳阳，余意，赵东海，洪渊，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：