一种提高植物发酵沼气产量的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高植物发酵沼气产量的方法。属生物技术领域。首先克隆白腐真菌的木质素过氧化物酶基因和猛过氧化物酶基因，枯草芽孢杆菌的漆酶基因和木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β葡萄糖苷酶基因；构建含以上六种基因表达框架的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒，将其质粒转化枯草芽孢杆菌获得工程菌；将枯草芽孢杆菌工程菌应用于植物原料发酵沼气的预处理过程以及与天然的沼气发酵微生物联合应用于发酵植物原料生产沼气过程，起到显著提高植物原料的利用率和增加沼气产量的作用。本发明专利技术解决了植物发酵沼气中遗留的木质素和纤维素不能有效地被水解利用的问题，有利于利用植物发酵沼气的产业的发展。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及构建携带木质素过氧化物酶基因表达框架、猛过氧化物酶基因表达框架、漆酶基因表达框架、葡聚糖内切酶基因表达框架、葡聚糖外切酶基因表达框架和3-葡萄糖苷酶基因表达框架的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒的枯草芽孢杆菌工程菌和应用工程菌提高植物发酵沼气产量的方法。具体是一种应用携带木质素过氧化物酶基因表达框架、猛过氧化物酶基因表达框架、漆酶基因表达框架、葡聚糖内切酶基因表达框架、葡聚糖外切酶基因表达框架和3-葡萄糖苷酶基因表达框架的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒的枯草芽孢杆菌工程菌对植物原料进行预处理以及与天然的沼气发酵微生物共同厌氧消化植物生产沼气的方法。
技术介绍
沼气是一些有机物质在一定的温度、湿度、酸度条件下，隔绝空气，经微生物发酵而产生的一种以甲烷为主的可燃混合气体，是一种有多种用途的可再生能源。它能够代替石化燃料而应用于动力和热的产生，也能作为车用燃气，还能替代天然气作为生产一些化学制剂的原料。通过厌氧发酵生产沼气是一条CO2零排放的生产途径。沼气发酵必须有微生物参与。沼气发酵微生物是一个统称,包括发酵性细菌、产氢产乙酸菌、耗氢产乙酸菌、食氢产甲烷菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高植物发酵沼气产量的方法，其特征在于应用分子生物学技术克隆白腐真菌的木质素过氧化物酶基因、白腐真菌的猛过氧化物酶基因，枯草芽孢杆菌的漆酶基因，木霉的葡聚糖内切酶基因、木霉的葡聚糖外切酶基因和木霉的0葡萄糖苷酶基因；构建含木质素过氧化物酶基因表达框架，猛过氧化物酶基因表达框架、漆酶基因表达框架、葡聚糖内切酶基因表达框架，葡聚糖外切酶基因表达框架和3 -葡萄糖苷酶基因表达框架的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒(含有以上所述的6种酶基因表达框架、大肠杆菌复制起点、革兰氏阳性菌复制起点、氨苄青霉素抗性基因和G418抗性基因)；将以上构建的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒转化枯草芽孢杆菌，筛选高表达木质素过氧化物酶、猛过氧化物酶、漆酶、葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和3 -葡萄糖苷酶的枯草芽孢杆菌转化子作为携带木质素过氧化物酶基因表达框架、猛过氧化物酶基因表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：张爱联，屠发志，易国辉，符仙，张泽华，张添元，尹慧祥，罗进贤，杨穗珊，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：