与慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证相关的基因序列的应用制造技术

技术编号:7278352 阅读:406 留言:0更新日期:2012-04-19 07:08
本发明专利技术公开了一组与慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证相关的基因序列的应用,用于制备辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品。利用本发明专利技术的一组基因序列,可从分子水平对慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证进行准确辨证,并可作为治疗慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的药物靶标。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子诊断领域,尤其涉及一组与慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证相关的基因序列的应用
技术介绍
慢性乙型肝炎(chronic hepatitis type B, CHB)患者是指既往有乙型病毒性肝炎或HBV携带史,或乙型急性肝炎病程超过半年,而目前仍有肝炎症状、体征及肝功能异常者。我国是慢性乙型肝炎高发地区,据统计,有7.5亿人曾感染过HBV(占全国人口 57. 6% ),其中慢性HBV感染者约1. 2亿,慢性感染者中15% 25%最终也将死于与HBV相关的肝病,如肝硬化和肝癌。我国每年约30万例因慢性乙型肝炎或相关疾病死亡,占传染病死亡第一位。由于西医缺乏有效治疗措施,在我国,中医及中西医结合治疗是目前的主要方法,且取得了较好的临床效果。但目前仍有许多关键问题亟待解决,尤其是对慢性乙型肝炎的中医证候及辨证体系缺乏规范化研究。据统计,慢性乙型肝炎中肝胆湿热证约占37. 1%,对该证型的深入研究有着重要意义。按照《内科学》及国家技术监督管理局发布的《中医临床诊疗术语》(GB/T16751-1997) 的诊断标准,慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的辨证有以下若干要素组成口干、口苦、大便不调、尿黄、胁肋胀痛、胁下痞块、厌油腻、恶心呕吐、身目发黄、头身沉重、食欲减退、发热、 阴部瘙痒、睾丸胀痛、带下黄臭等。但是,通过“望、闻、问、切”四诊对以上信息很难量化,导致对于肝胆湿热证的判断很大程度上依赖于医生的诊疗水平与经验,这在一定意义上客观地制约了临床医生对疾病本质的把握,进一步影响中医及中西医结合疗法对于慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证患者的治疗效果。因此,对于慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的诊断迫切需要一种准确的、快捷的与可定量的诊断方法。表达谱基因芯片为从分子水平进行疾病诊断提供了有力工具,通过平行考察上万种基因的表达情况,得到每个患者基因表达的分子图谱。然后利用多种聚类分析,如层次聚类、自组织分析、主成分分析等方法将具有不同基因表达谱的疾病进行区分归类,进而为疾病诊断提供可靠的分子水平依据。目前,国际上已有文献报道,通过基因表达谱的研究可以显著区分疾病及疾病分型。如Golub等阐述了将基因芯片技术应用于白血病分型,显示出了快速、简便和高特异性等优点。他们设计出的DNA芯片成功地分析了急性髓细胞性白血病(AML)和急性淋巴细胞性白血病(ALL),为人类的慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证疾病分型及早期诊断奠定了基础(Science. 286 :531-7)。在国内研究中,马晓娟等通过对比冠心病血瘀证和非血瘀证患者的静脉血白细胞表达谱找到48条基因,为血瘀证的诊断提供了基因层面的依据(中西医结合学报,6 ) :355-360)。但是,目前仍没有关于辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的基因序列的任何报道。
技术实现思路
本专利技术要解决缺乏客观准确的辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的分子依据的技术问题,提供一组与慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证相关的基因序列的应用,该组基因序列为诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证提供可靠的分子水平依据。为了解决上述技术问题,本专利技术通过如下技术方案实现在本专利技术的一个方面,提供了一组基因序列的用途,用于制备辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品,该组基因序列为SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示的序列。优选的,所述辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品包括用基因芯片检测、实时定量PCR或免疫检测诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品。在本专利技术的另一方面,还提供了一种用于辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的基因芯片,所述基因芯片包含与SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示各基因序列和/或其互补序列特异性杂交的探针。在本专利技术中,所述探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制,只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合即可。在本专利技术中,利用基因芯片或实时定量PCR诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的方法是通过检测SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9基因在同一样本中相对于其内参基因匪 001101 (ACTB)的表达变化进行辨证,其参考相对表达值如下表1 表ISEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9基因相对于内参基因的表达值权利要求1.一组基因序列的用途,其特征在于,用于制备辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品,该组基因序列为SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示的序列。2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品包括用基因芯片检测、实时定量PCR或免疫检测诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品。3.一种用于辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的基因芯片,其特征在于,所述基因芯片包含与SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示各基因序列和/或其互补序列特异性杂交的探针。4.一种用于辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含特异性针对SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示各基因序列的引物或探针。5.一种用于辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示基因序列各表达蛋白的特异性抗体。6.一种权利要求3所述基因芯片的使用方法,其特征在于,包括如下步骤从人外周静脉血白细胞中抽提总mRNA ;反转录标记mRNA ;选取权利要求3所述的基因芯片,在适于与该芯片进行杂交的条件下,加入经标记的 mRNA,并使其反应足够时间;洗涤后检测杂交反应的结果。7.一种基因序列的用途,其特征在于,用于制备治疗慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的药物,所述基因序列选自SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示的序列。8.一种基因序列的用途,其特征在于,用于筛选治疗慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的药物,所述基因序列选自SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示的序列。9.一种蛋白质的用途,其特征在于,用于筛选治疗慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的药物,所述蛋白质的基因序列选自SEQ ID No. 1 SEQ ID No. 9所示的序列。全文摘要本专利技术公开了一组与慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证相关的基因序列的应用,用于制备辅助诊断慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的产品。利用本专利技术的一组基因序列,可从分子水平对慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证进行准确辨证,并可作为治疗慢性乙型肝炎中医肝胆湿热证的药物靶标。文档编号A61K45/00GK102417923SQ20111014196公开日2012年4月18日 申请日期2011年5月27日 优先权日2011年4月18日专利技术者张庆华, 彭景华, 王世东, 王珂, 胡义扬, 赵瑜, 魏婷 申请人:上海中医药大学附属曙光医院, 上海生物芯片有限公司本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:张庆华彭景华王世东胡义扬赵瑜王珂魏婷
申请(专利权)人:上海生物芯片有限公司上海中医药大学附属曙光医院
类型:发明
国别省市:

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