一种致病性芽孢杆菌污染物的堆肥处理方法，是将待处理样品埋入基础堆料堆肥发酵，在堆料温度55±5℃、堆料湿度65±5％、堆料pH8.5～9.0条件下发酵至少6天。本发明专利技术所提供的技术方案利用堆肥过程中产生的高温杀死病原菌、杂草种子、虫卵等。此外，堆体中的土壤微生物可以降解纤维素、木质素等植物的重要组成部分，转化后的产物可以作为肥料，不仅保护环境，提高土壤肥力，增加土壤持水能力，还可以减少有机材料的体积、气味和病原菌，实现了资源的循环利用。并且本发明专利技术的方法成本低廉、设备简单、易于操作。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及致病性微生物的无害化处理方法，尤其是针对致病性芽孢杆菌污染物的堆肥微生物发酵处理技术。
技术介绍
在早在1973年Bulyki等人报道了污染蜡样芽孢杆菌的食品引起食物中毒。 1994 2003年间，中国报道的蜡样芽孢杆菌食物中毒47起，进食人数2541人，中毒者1758 人，发病率69. 19%，无死亡报道。致病性芽孢杆菌引发的食物中毒事件与人们生活息息相关，在重视食品安全的今天，我国需要进一步加强对食品中致病性芽孢杆菌的监控，有效地控制该菌在食品中的污染。对食品及生活垃圾中可能潜在的禽流感病毒致病性芽孢杆菌进行无害化处理意义重大。并且有研究表明，芽孢杆菌耐高温，至少需100°C 20min以上才能杀死。在观 35°C适宜温度可大量繁殖。现有技术中生物防腐剂、消毒剂、高静压、乳酸等是现在处理芽孢杆菌常用的方法(3个生物防腐剂抑制蜡样芽孢杆菌的效果研究.浙江农业科学， 2009(3) :535-538;不同消毒剂对蜡样芽孢杆菌的杀灭效果比较.中国消毒学杂志， 2008,25(6) :672-673;高静压对蜡样芽孢杆菌的致死与损伤效应.核农学报，2006， 20(6) :511-515 ；乳酸对三种食源性致病菌的抑菌及杀菌作用,食品科技，2008(10) 187-191 ；李曼，侯利华，曹晓梅，陈薇.乳酸链球菌素对蜡样杆菌芽孢作用的初步研究. 中国消毒学杂志，2009, ) =126-128)
技术实现思路
本专利技术的本专利技术的目的在于提供一种综合方案，对致病性芽孢杆菌污染物，尤其是被污染的餐饮垃圾，采用一种安全有效、环境友好、经济可行、可转化再应用的无害化处理方法。本专利技术所述的是将待处理样品埋入基础堆料中堆肥发酵，发酵过程中，在堆料温度55 士 5°C、堆料湿度65 士 5%、堆料pH8. 5 9. 0 条件下发酵至少6天。优选的技术方案中，待处理原料含水量60 65wt%，C/N为30 40 ；更为优选的，使用牛粪与稻草的混合物为原料，具体地是将粉碎后的稻草混入新鲜的牛粪，加入量与混合物的C/N值有关，以该值为30 40为宜。本专利技术的技术方案是一个无害化与再利用的综合技术方案，堆肥处理的最终目的是获得无污染的肥料原料。鉴于此，除了最终有害微生物的灭活结果以外，堆肥过程中需要控制堆体的多种参数，以避免最终所得产品能被用作肥料。在致病性微生物灭活完成后，继续发酵的温度、时间可以通过实时监测堆体的参数、尤其是C/N值，来确定方案。优选的处理方案是在堆肥温度55 60°C、堆料湿度60 65%、堆料pH8. 5 9. 0条件下发酵至少 12天，再在较低温度条件下，45士5°C，继续发酵，后续发酵过程堆料湿度、PH值均保持与前3期一致。最终完成堆肥发酵的标准是，堆料的终末C/N与初始C/N的比值不超过0. 6。本专利技术的另一优选技术方案包括如下步骤①选取作为堆肥原料的牛粪，掺入稻草调节堆料碳氮比至30 40，并调节堆肥原料的含水量至60 65wt%。②将堆肥原料置于堆肥箱中，将待处理的致病性芽孢杆菌污染物埋入基础堆料中，进行静态静态堆肥发酵，该过程中监测堆体内部温度，当升温至后，在该温度条件及堆料湿度60 65%、堆料pH8. 5 9. 0条件下发酵6天以上，再在45士5°C条件下继续发酵；③检测堆体C/N值，当堆料的终末C/N与初始C/N的比值低于0. 6后停止发酵。本专利技术所述的技术方案中，优选使用的发酵工具是堆肥箱，所述堆肥箱需要能遮挡雨雪，但不影响通风，并且箱体底部最好有可以用于吸收发酵渗出液的部件。本领域的技术人员可以根据现有技术选用适当的堆肥箱。在上述本专利技术的条件下，专利技术人推荐使用尺寸是100X65X80cm的堆肥箱，在该尺寸下，操作及堆体条件的监控容易实现。更为具体的，可以是木制或树脂的无底有盖堆肥箱，堆肥发酵过程中，盖子疏松地掩盖在堆肥箱上， 既能遮风挡雨，又不影响堆体与外界的气体交换。堆肥箱底部垫有适当厚度的稻草层，用以吸收发酵过程的渗出液，便于对堆体湿度进行有效的监控及调整。为了有效地保留堆料中的有益成分及有益菌，堆肥发酵的温度最好不超过60°C， 当堆体内部温度超过60摄氏度时，翻堆降温。本专利技术所提供的技术方案利用堆肥过程中产生的高温杀死病原菌、杂草种子、虫卵等。此外，堆体中的土壤微生物可以降解纤维素、木质素等植物的重要组成部分，转化后的产物可以作为肥料，不仅保护环境，提高土壤肥力，增加土壤持水能力，还可以减少有机材料的体积、气味和病原菌，实现了资源的循环利用。并且本专利技术的方法成本低廉、设备简单、易于操作。附图说明本专利技术附图2幅，图1是实施例1蜡样芽孢杆菌无害化处理堆肥体系微生物残留量检测结果。图2是实施例2产气荚膜梭菌无害化处理堆肥体系微生物残留量检测结果。具体实施例方式下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。如无特殊说明，本专利技术所使用的主要仪器和生物材料来源自供试标准菌株产气荚膜梭菌(ATCC13124)美国典型培养物保藏中心；蜡样芽孢杆菌(ACCC63301)中国农业微生物菌种保藏管理中心。氯化钠(国药集团F2009040》，亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(北京陆桥100427)，甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(北京陆桥1003M)，硫乙醇酸盐液体培养基 (北京陆桥080707)，无水亚硫酸钠(国药集团F20090714)，营养琼脂(北京陆桥100521)， 磺胺嘧啶钠(北京陆桥091118)，多粘菌素B (北京陆桥100625，100706)，厌氧酶(美国BD)。4荧光PCR仪，美国ABI公司/7500 ；PCR仪，美国伯乐公司/S1000 ；PCR工作台，美国UVP公司/Uv3HEPA WORKSTATION ；⑶S-8000型凝胶成像系统，美国UVP ；培养箱，美国/ L120-2 ；震荡培养箱，瑞士伊孚森/Ecotron ；生物安全柜，美国热电/Forma Class II ；灭菌锅，日本三洋/MLS-3780。实施例11.蜡样芽孢杆菌无害化处理堆肥体系的建立及理化参数的检测收集大连市某牛场的新鲜牛粪，测得牛粪初始C/N比为19，加入1/4牛粪体积的粉碎后的稻草调整堆料C/N为39，晾晒并混合均勻。调整含水量为65%成为适宜堆料。使用堆肥箱进行静态堆肥发酵，所使用的树脂堆肥箱无底有盖，外部尺寸长100 X 宽65 X高80cm，壁厚0. 3cm,自下而上铺放IOcm厚稻草层，40cm厚堆料层，待检测蜡样芽孢杆菌污染样本及30cm厚堆料层。所述的待检测芽孢杆菌污染样本的制备方法是在无菌条件下，取一环蜡样芽孢杆菌(ACCC63301)加入到IOOOmL营养肉汤中，在36士 1°C振荡培养18 Mh。将培养菌液离心富集得到菌体沉淀，再加适量PBS稀释，与食物垃圾和堆料按照质量比1 5 5的比例充分混合，装入尼龙袋中。放在预先装有部分堆料的网兜中，使每个袋子之间互不接触。在堆体中设多个热电偶，检测堆肥温度。并于堆肥后的0d、2d、4d、6d、10d、14d、 18dJ6d、32d、40d，多点抽取堆料样本，检测发酵堆料的pH值、水分和C/N值。具体操作方法称取2g堆料样本，放入50mL试管中，加入ISmL蒸馏本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：曹际娟，王金玲，
申请(专利权)人：曹际娟，王金玲，
类型：发明
国别省市：
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