酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法，包括以下步骤：以甲醇、浓硫酸、氢氧化钠进行酯化；以乙酸酐进行酰化；利用石油醚萃取；通过乙醇、石油醚实现一次结晶、二次结晶；利用氢氧化钠水解酸化；利用乙酸乙酯和活性炭进行结晶；干燥得到鹅去氧胆酸。利用本发明专利技术方法制备鹅去氧胆酸，制备方法简单，安全环保，可用于大规模工业化生产；所提取鹅去氧胆酸含量大于等于98％，提取比率高，能满足市场对该产品的纯度要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种鹅去氧胆酸的制备方法，尤其涉及。
技术介绍
鹅去氧胆酸(简称⑶CA)是存在于动物胆汁中的一种重要的生化物质，也是动物胆汁的有效成分之一。具有治疗胆固醇型结石、抗菌、抗炎、抗过敏、解热、化痰、平喘等药理作用，还是合成昂贵的熊去氧胆酸主要的原料。目前CDCA的获得主要是以胆酸(CA)为原料加以合成的方法和在胆汁中(禽类胆汁和猪胆汁)提取的方法两大类，1、利用合成方法获得CDCA时步骤繁琐，反应条件要求苛刻，不利于工业化批量生产；2、利用提取方法获得⑶CA时，主要是利用钡盐和钙盐沉淀法， 利用钡盐直接对人类赖以生存的自然环境带来严重的威胁，利用钙盐则使用大量的水，极大的浪费水资源，且两种提取方法所得产品含量较低，一般均低于90%。而当前的工业化生产急需一种操作简单，安全环保，提取⑶CA含量大于等于98% 鹅去氧胆酸的方法，但目前此种方法未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供以，该方法可以投入工业化生产，操作简单、安全环保。为达到上述目的，本专利技术采用方法如下—、酯化将提取过胆红素和猪去氧胆酸的母液旋转蒸发至膏状物，加3-5倍量的甲醇，4%的浓硫酸，使之完全溶解，常温静置10-1 后，加氢氧化钠调pH至6. 0-7. 0，静置 l_2h，抽滤，滤液减压浓缩，设置压力0. 05-0. 07MPa，设置温度40_45°C，回收甲醇，得到酯化膏状物；二、酰化向步骤一所得酯化膏状物中加入1. 0-1. 5倍量的乙酸酐，加热搅拌回流 l_3h，静置，减压浓缩，设置压力0. 08-0. IMpa，设置温度90_95°C，回收乙酸酐，得到酰化膏状物；三、石油醚萃取向步骤二所得酰化膏状物中加入2-4倍量的石油醚和1-2倍量的水，加热搅拌回流1. Oh,静置，弃去下水层，石油醚层水洗至PH值为5-7，50°C保温4h，30°C 保温2h，过滤，滤液减压浓缩，设置压力0. 06-0. 08Mpa，设置温度70-80°C，回收石油醚，得到萃取膏状物；四、一次结晶向步骤三所得萃取膏状物中加入2-3倍量的90% -95%的乙醇，静置结晶Mh，抽滤，晶体60°C以下真空干燥，得到一次结晶体；五、二次结晶向上述一次结晶体中加入1-2倍量的石油醚，加热使之完全溶解， 静置冷却结晶2- ，抽滤，晶体干燥；六、水解酸化称取干燥后的晶体加入1-2倍量的氢氧化钠，8-10倍量的纯化水，加热皂化1 以上，冷却至室温静置分层，取下层加少量纯化水使之溶解，盐酸酸化调pH至 4-5，过滤既得粗品鹅去氧胆酸；七、结晶向上述粗品鹅去氧胆酸中加入10-12倍量的乙酸乙酯和5% -10%活性炭，加热回流30min-60min，过滤，水洗至中性，滤液减压浓缩，设置压力0. 040. 06MPa,设置温度45-50°C，回收乙酸乙酯，回收后体积至原体积的1/8-1/4，冷却至室温，静置结晶，过滤既得精品；八、干燥将上述晶体放入真空干燥箱干燥，设置干燥箱内温度60°C，既得精品鹅去氧胆酸。本专利技术的有益之处在于利用本专利技术方法制备鹅去氧胆酸，制备方法简单，安全环保，利用大规模工业化生产；此方法所提取鹅去氧胆酸含量大于等于98%，提取比率高，能满足市场对该产品的纯度要求。具体实施例方式实施例1，步骤如下实验室小试，一、酯化取提过胆红素和猪去氧胆酸的膏状物0. Ikg放入实验器皿内，加3倍量的甲醇，細1的浓硫酸，使之完全溶解，常温静置IOh后，加氢氧化钠调pH至 7. 0，静置lh，抽滤，将滤液放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. 05Mpa,设定温度 45°C，循环水冷却回收甲醇，得到酯化膏状物；二、酰化将步骤一所得酯化膏状物取出，装入器皿，加入1. 0倍量的乙酸酐，加热搅拌回流lh，静置，将液体放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. OSMpa,设定温度 95°C，循环水冷却回收乙酸酐，得到酰化膏状物；三、石油醚萃取将步骤二所得酰化膏状物取出，装入器皿，加入2倍量的石油醚和1倍量的水，加热搅拌回流1. 0h，静置，弃去水层，石油醚层水洗至PH值为5，50°C保温 4h，30°C保温池，滤布过滤，将滤液放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. 06Mpa，设定温度80°C，循环水冷却回收石油醚，得到萃取膏状物；四、一次结晶将步骤三所得萃取膏状物取出，装入器皿，加入2倍量的90%的乙醇，静置结晶Mh，抽滤，晶体置真空干燥箱干燥，设定真空干燥箱真空度为0. 08Mpa，设定温度60°C干燥，得到一次结晶体；五、二次结晶将上述一次结晶体取出，装入器皿中，加入1倍量的石油醚，加热使之完全溶解，静置冷却结晶4h，抽滤，晶体置真空干燥箱干燥，设真空干燥箱定真空度为 0. 08Mpa，设定温度60°C干燥，得到二次结晶体；六、水解酸化将上述二次结晶体取出，装入器皿中，加入1倍量的氢氧化钠，8倍量的纯化水，加热皂化12h以上，冷却至室温静置分层，取下层加少量纯化水使之溶解，盐酸酸化调PH至4，滤布过滤，既得粗品鹅去氧胆酸；七、结晶取出上述粗品鹅去氧胆酸，装入器皿中，加入10倍量的乙酸乙酯和5% 活性炭，加热回流30min，滤布过滤，水洗至中性，将滤液放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. 06MPa，设定温度50°C，循环水冷却回收乙酸乙酯至原体积的1/8，冷却至室温， 静置结晶，滤布过滤，既得精品鹅去氧胆酸；八、干燥将精品鹅去氧胆酸放入干燥，设定真空干燥箱真空度为0. OSMpa,设定温度60°C干燥，既得精品鹅去氧胆酸。使用HPLC检测，采用内标法计算结果，鹅去氧胆酸含量达到99. 5%。实施例2中试时，一、酯化取提过胆红素和猪去氧胆酸的膏状物IOkg放入实验器皿内，加 4倍量的甲醇，400ml的浓硫酸，使之完全溶解，常温静置1 后，加氢氧化钠调pH至6. 5，静置l_2h，抽滤，将滤液放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. 06Mpa，设定温度45°C， 循环水冷却回收甲醇，得到酯化膏状物；二、酰化将步骤一所得酯化膏状物取出，装入器皿，加入1. 3倍量的乙酸酐，加热搅拌回流池，静置，将液体放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. 09Mpa，设定温度 95°C，循环水冷却回收乙酸酐，得到酰化膏状物；三、石油醚萃取将步骤二所得酰化膏状物取出，装入器皿，加入3倍量的石油醚和2倍量的水，加热搅拌回流1. Oh,静置，弃去水层，石油醚层水洗至pH值为6，50°C保温 4h，30°C保温池，滤布过滤，将滤液放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0. 07Mpa，设定温度80°C，循环水冷却回收石油醚，得到萃取膏状物；四、一次结晶将步骤三所得萃取膏状物取出，装入器皿，加入3倍量的93%的乙醇，静置结晶Mh，抽滤，晶体置真空干燥箱干燥，设定真空干燥箱真空度为0. 07Mpa，设定温度60°C干燥，得到一次结晶体；五、二次结晶将上述一次结晶体取出，装入器皿中，加入2倍量的石油醚，加热使之完全溶解，静置冷却结晶4h，抽滤，晶体置真空干燥箱干燥，设定真空干燥箱真空度为 0. 07Mpa，设定温度60°C干燥，得到二次结晶体；六、水解酸化将上述二次结晶体取出，装入器皿中，称取干燥后的晶体加入2倍量的氢氧化钠，10倍量的纯化水，加热皂化12h以上，冷却至室温本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法，包括步骤如下：一、酯化：将提取过胆红素和猪去氧胆酸的母液旋转蒸发至膏状物，加３－５倍量的甲醇，４％的浓硫酸，使之完全溶解，常温静置１０－１２ｈ后，加氢氧化钠调ｐＨ至６．０－７．０，静置１－２ｈ，抽滤，滤液减压浓缩，设置压力０．０５－０．０７ＭＰａ，设置温度４０－４５℃，回收甲醇，得到酯化膏状物；二、酰化：向步骤一所得酯化膏状物中加入１．０－１．５倍量的乙酸酐，加热搅拌回流１－３ｈ，静置，减压浓缩，设置压力０．０８－０．１Ｍｐａ，设置温度９０－９５℃，回收乙酸酐，得到酰化膏状物；三、石油醚萃取：向步骤二所得酰化膏状物中加入２－４倍量的石油醚和１－２倍量的水，加热搅拌回流１．０ｈ，静置，弃去下水层，石油醚层水洗至ｐＨ值为５－７，５０℃保温４ｈ，３０℃保温２ｈ，过滤，滤液减压浓缩，设置压力０．０６－０．０８Ｍｐａ，设置温度７０－８０℃，回收石油醚，得到萃取膏状物；四、一次结晶：向步骤三所得萃取膏状物中加入２－３倍量的９０％－９５％的乙醇，静置结晶２４ｈ，抽滤，晶体６０℃以下真空干燥，得到一次结晶体；五、二次结晶：向上述一次结晶体中加入１－２倍量的石油醚，加热使之完全溶解，静置冷却结晶２－５ｈ，抽滤，晶体干燥；六、水解酸化：称取干燥后的晶体加入１－２倍量的氢氧化钠，８－１０倍量的纯化水，加热皂化１２ｈ以上，冷却至室温静置分层，取下层加少量纯化水使之溶解，盐酸酸化调ｐＨ至４－５，过滤既得粗品鹅去氧胆酸；七、结晶：向上述粗品鹅去氧胆酸中加入１０－１２倍量的乙酸乙酯和５％－１０％活性炭，加热回流３０ｍｉｎ－６０ｍｉｎ，过滤，水洗至中性，滤液减压浓缩，设置压力０．０４－０．０６ＭＰａ，设置温度４５－５０℃，回收乙酸乙酯，回收后体积至原体积的１／８－１／４，冷却至室温，静置结晶，过滤既得精品；八、干燥：将上述晶体放入真空干燥箱干燥，设置干燥箱内温度６０℃，既得精品鹅去氧胆酸。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭庆，徐宾朋，张维秀，赵厚发，
申请(专利权)人：安徽科宝生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：34