建立针对生物来源之起始材料中多种分析物的标准品的方法技术

本发明专利技术提供了用于建立针对多元分析物之标准品的方法，其包括处理样品之一部分使基本上去除目的分析物以产生一系列特定缺乏样品；以及确定和混合适当量的所述系列特定缺乏样品以建立标准品。所述分析物可以是待测量的任何物质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般地涉及分子生物学领域。更特别地，其涉及建立可用于多元测定之标 准品的方法。在一些具体实施方案中，本专利技术涉及从多种起始材料建立基本上均一之标准 品的方法。B.相关技术描述近来出现的多元测定在制备用于这些测定的标准品时引发了特有的问题。在分析一种分析物的单一测定中(即，在单测定中)，含有已知浓度之分析物的一 系列标准品被用于建立“标准曲线”，据此测量未知样品。一般使用两种方法来建立标准品 a)找到或建立不含靶标分析物的基质，将纯化的分析物(标准品)掺入其中，或b)具有已 知高水平分析物的样品被用作“高，，标准品，通过用基质稀释该高标准品来建立较低的水 平(其中不含或含有低水平的靶标分析物)。在多元测定中，当易于获得允许进行“掺入”的纯分析物时，常使用上面所列的方 法a)。当可以获得每种纯靶标分析物并且可以对其进行掺入操作时，该方法是完全适用的。 对于多元模式中的每个分析物，简单重复这一方法，从而，如果需要分析物x、y和ζ的话，则 将每一种掺入到同一基质中以确保单一标准品具有测定所需的、合适水平的所有分析物。当分析物只能通过生物学方式获得和/或不容易进行纯化或其它操作时，便出现 了特别复杂的问题。在这种情况下，人们通常设法鉴定具有不同水平之目的分析物的大量 不同样品，然后混合所述材料以使所有分析物均达到给定的目标值。这意味着，如果选取针 对一种分析物的高标准品，则构成多元测定之其它分析物可能具有或不具有合理的水平， 导致标准品不能容易地进行重复和/或不具有期望的目标值。因此，需要一种用于多元测 定的、稳定地建立基本均一之标准品的方法。专利技术概述在一些方面中，本专利技术提供了从起始样品建立针对多种分析物之多元标准品的方 法，其包括获取包含多种目的分析物的样品；测定每种目的分析物的浓度；建立一种或多 种特定缺乏样品(specifically deficient sample)；确定建立多元标准品(其中每种分 析物的浓度基本均一)所需的起始样品和每种特定缺乏样品的量(如果有的话)；以及混 合所述量的所述起始样品和特定缺乏样品来建立多元标准品。所述起始样品可以是含有目的分析物的任何组合物。起始样品可以包含浓度基本 均一或高度不同的多种目的分析物。在本专利技术的一些方面中，样品可以是体液(包括但不 限于全血、血清、唾液、尿液、精液)。在一些具体实施方案中，起始样品是血液样品。分析物 可以是待测量的任何物质。在一些具体实施方案中，分析物是蛋白质、抗体或蛋白酶。在一些实施方案中，建立一种或多种特定缺乏样品可包括处理起始样品之一部分 或特定缺乏样品以去除至少第一目的分析物。可以去除目的分析物从而建立不含该特定分 析物或至少含有低浓度之该特定分析物的生物样品。通常，进行该操作时，尽可能减少对其 它分析物之水平的影响，但是，该方法并不需要100%的特异性。在一些实施方案中，另一分 析物的非特异性减少低于5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%或40%。目的分析物不必 完全去除。当至少约 50%,60%,70%,75%,80%,85%,90%,95%,96%,97%,98%,99% 或100%的分析物被去除时，则分析物被“基本上去除”。可以用基本上去除靶标分析物的任 何方式来处理样品。在一些具体实施方案中，所述处理包括中和分析物、物理去除分析物、 破坏分析物或隔离分析物。在一些实施方案中，分析物可以是抗体。本文使用的术语“抗体”泛指任何免疫结 合剂，如IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。例如，在一些实施方案中，抗体可以是b型流感嗜血杆菌 (Haemophilus influenza type b,Hib)多糖、破伤风杆菌(Clostridium tetani,Tet)禾口白 喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae,Dip)之类毒素、月市炎链球菌(Streptococcus pneumonoiae)、脑膜炎球菌、脊髓灰质炎、白喉、破伤风、HIV、HBV、HCV的抗体。本领域技术 人员会了解，存在多种方法去除起始样品或特定缺乏样品中的抗体。在一些具体实施方案 中，去除样品或标准品中的抗体通过中和抗体来实现，例如通过向样品中加入目的抗体之 特异性抗原来实现。在另一些实施方案中，去除样品或标准品中抗体通过物理方式去除抗 体来实现，例如通过将抗体固定在具有特异性针对该抗体之抗原的柱上来实现。在另一实 施方案中，去除样品或标准品中的抗体通过破坏抗体来实现，例如通过使用破坏性试剂或 技术(如蛋白酶处理或热处理)处理样品来实现。在另一些实施方案中，去除样品或标准 品中的抗体通过隔离抗体来实现，例如通过将抗体包含在脂质体中来实现。在一些实施方案中，分析物可以是蛋白质。在一些实施方案中，所述蛋白质可以是 例如胰岛素、TSH、破伤风毒素或类毒素、白喉毒素或类毒素、垂体激素、胰蛋白酶或胰蛋白 酶原。本领域技术人员会了解，存在多种方法将起始样品或特定缺乏样品中的该蛋白质去 除。在一些具体实施方案中，去除样品或标准品中的蛋白质通过中和蛋白质来实现，例如通 过向样品中提供特异性针对该目的蛋白之靶标来实现。在另一些实施方案中，去除样品或 标准品中的蛋白质通过物理去除蛋白质来实现，例如通过将蛋白固定在具有结合该蛋白质 之靶标的柱上来实现。在另一实施方案中，去除样品或标准品中的蛋白质通过破坏蛋白质 来实现，例如通过使用破坏性试剂或技术(如蛋白酶处理或热处理)处理样品来实现。在 另一些实施方案中，去除样品或标准品中的蛋白质通过隔离蛋白质来实现，例如通过将蛋 白质包含在脂质体中或将蛋白质吸附至固体表面(如硅胶、分子筛等)上来实现。在一些实施方案中，分析物可以是蛋白酶。本文使用的术语“蛋白酶”泛指进行蛋 白质水解的任何酶。在一些实施方案中，蛋白酶可以是胰蛋白酶(trypsion)和胰凝乳蛋白 酶。本领域技术人员会了解，存在多种方法将起始样品或特定缺乏样品中的蛋白酶去除或 失活。在一些具体实施方案中，去除样品或标准品中的蛋白酶通过中和蛋白酶来实现，例如 通过向样品中提供特异性针对该目的蛋白酶的抑制剂来实现。在另一些实施方案中，去除 样品或标准品中的蛋白酶通过物理去除蛋白酶来实现，例如通过将蛋白酶固定在具有结合 该蛋白酶之抑制剂的柱上来实现。在另一实施方案中，去除样品或标准品中的蛋白酶通过 破坏蛋白酶来实现，例如通过被另一更易被失活或破坏的蛋白酶进行蛋白水解来实现。在另一些实施方案中，去除样品或标准品中的蛋白酶通过隔离蛋白酶来实现，例如通过将蛋 白酶包含在脂质体中来实现。在一些具体实施方案中，本专利技术提供了用于建立针对多元分析物之标准品的方 法，其包括获取包含多种目的分析物的样品；测定每种目的分析物的浓度；处理样品之一 部分以基本上去除第一分析物，从而建立第一特定缺乏样品；处理所述第一特定缺乏样品 之一部分以基本上去除第二分析物，从而建立第二特定缺乏样品；重复该过程，以从后续的 特定缺乏样品中基本上去除下一种分析物，从而产生一系列特定缺乏样品；确定建立标准 品(其中每种分析物具有所需浓度)所需的起始样品和特定缺乏样品系列的量；以及混合 所述量的所述特定缺乏样品系列来建立标准品。在一些实施方案中，处理起始样品以本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于从起始样品建立针对多种分析物之多元标准品的方法，其包括：　　（ａ）获取包含多种目的分析物的样品；　　（ｂ）测定每种目的分析物的浓度；　　（ｃ）建立一种或多种特定缺乏的样品；　　（ｄ）确定建立多元标准品所需的起始样品和每种特定缺乏样品的量，所述多元标准品中每种分析物的浓度基本均一；以及　　（ｅ）混合所述量的所述起始样品和所述特定缺乏样品来建立多元标准品。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：克尔德·索伦森，
申请(专利权)人：卢米耐克斯公司，
类型：发明
国别省市：US