本发明专利技术公开了一种防治香蕉枯萎病的白刺链霉菌株BWL15-4，该菌株BWL15-4的分类命名为白刺链霉菌(Streptomyces?albospinus)，于2011年5月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC?No.4836。该菌株对香蕉枯萎病病原菌的拮抗能力强，可用于防治香蕉枯萎病；还公开了含有该菌株的菌剂及其制备方法和应用，该菌剂不仅能抑制香蕉枯萎病，还对植株有一定的促生长作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种防治香蕉枯萎病的菌株及其应用，具体涉及一种防治香蕉枯萎病的白刺链霉菌株BWL15-4及其应用。
技术介绍
香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense)侵染引起的一种香蕉生产上的毁灭性土传病害。该病原菌有4个生理小种，在我国分布的是1 号和4号两个生理小种，对我国香蕉产业危害最大的是4号生理小种，目前已在海南、广东、 云南、福建大部分香蕉种植区大面积发生，发病面积已超过50万亩。广东和海南香蕉枯萎病发病严重的地方已不能再规模化种植香蕉，不得不改种其它作物。香蕉枯萎病菌是土壤习居菌，它从香蕉的根部侵入，沿维管束往上扩散蔓延，堵塞导管，产生毒素，破坏维管束的水分和养分的输送功能，从而使香蕉植株的地上部分得不到水分和养分而发黄枯萎。病原菌的厚垣孢子可在土壤中存活10多年，是一种积年流行的病害。由于香蕉枯萎病病原菌在维管束内扩展侵染，至今尚无十分有效的化学药剂防治和高抗枯萎病品种。因此，生物防治受到广泛关注。已报道或申请专利的香蕉枯萎病生物防治措施，大部分是采用芽孢杆菌作为生防菌株，这类菌株作为生防菌有许多优点，但也存在一个严重不足，即菌株本身对病原菌的拮抗能力不强，从而有可能影响其生防效果。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种防治香蕉枯萎病的白刺链霉菌株BWL15-4，由于该菌株本身分离自植物根际土壤，是土壤习居菌，根际定殖能力强，生防效果良好，尤其对香蕉枯萎病病原菌的拮抗能力强。本专利技术的第二个目的在于提供上述白刺链霉菌株BWL15-4在防治香蕉枯萎病中的应用。本专利技术的第三个目的在于提供一种含有上述白刺链霉菌株BWL15-4的制剂。本专利技术的第四个目的在于提供上述制剂的制备方法，该制备方法工艺简单，发酵培养基无需贵重原料，成本低，容易推广。本专利技术的最后一个目的在于提供上述制剂在防治香蕉枯萎病中的应用。本专利技术的第一个目的是通过如下技术手段来实现的一种防治香蕉枯萎病的白刺链霉菌株BWL 15-4，该菌株BWL 15_4的分类命名为白刺链霉菌(Sti^ptomyces albospinus)，于2011年5月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏编号为CGMCC No. 4836。该菌株的16S rDNA部分基因序列(1491bp)已提交美国国家生物技术信息中心 (NCBI)的Genebank基因序列数据库，登录号为JN038327 ；该菌株BWL15-4的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示。本专利技术的第二个技术方案是通过如下技术方案来实现的上述白刺链霉菌株 BWL15-4在防治香蕉枯萎病中的应用。本专利技术的第三个技术方案是通过如下技术方案来实现的一种防治香蕉枯萎病的制剂，含有上述白刺链霉菌株BWL15-4的液体菌剂或固体菌剂。本专利技术的第四个技术方案是通过如下技术方案来实现的上述制剂的制备方法， 将上述白刺链霉菌株BWL15-4经菌种活化、液体或固体发酵工序制备获得液体菌剂或固体菌剂。 其中在上述制剂的制备方法中，还可以含有种子培养工序，即将上述白刺链霉菌株BWL15-4经菌种活化、种子培养、液体或固体发酵工序制备获得液体菌剂或固体菌剂。具体来说，本专利技术中的液体菌剂可以通过以下工艺流程获得菌种BWL15-4活化 (即一级种子培养)一菌种培养(即二级种子培养，可选)一液体发酵(发酵罐，无菌空气， 培养液)一液体菌剂。其中液体培养基可以为葡萄糖1_3%、黄豆饼粉1_4%、可溶性淀粉1-4%、酵母 0.2%,NaCl 0.4%、CaC030. 25%、消泡剂0. 1-0.3%，按质量百分含量计。以下仅为优选的培养基，实际上本专利技术对培养条件和液体培养基并没有特别严格的限制，只要该条件和液体培养基适合菌株的生长即可。具体来说，本专利技术中的固体菌剂可以通过如下工艺流程获得菌种BWL15-4活化 (即一级种子培养)一菌种培养(即二级种子培养，可选)一固体发酵(固体培养基质)一发酵饼一干燥粉碎，与吸附载体按1 1或者其它比例混合，混勻后适当干燥，制成固体菌齐U。其中吸附载体可为非耕作层土、高岭土等多种载体。其中固体发酵时采用的固体培养基优选为包括大米60-70 %，黄豆粉5-15 %，麦皮10-20%，沙土 5%，按质量百分含量计。以上仅为本专利技术优选的培养基，实际上本专利技术对培养条件以及固体培养基的选择其实并没有特别严格的限制，只要该条件和固体培养基适合菌株的生长即可。本专利技术的最后一个目的是通过如下技术手段来实现的上述制剂在防治香蕉枯萎病中的应用。本专利技术中的制剂在防治香蕉枯萎病时，可以将液体菌剂或固体菌剂与普通有机肥按2 100的比例混合拌勻后作为底肥施用，每个定植穴施2. 5公斤，在香蕉种植前施用； 在香蕉种植后的生长期，可将液体菌剂或者固体菌剂以稀释5-10倍的比例加入到溶解的常规肥料中，对香蕉植株进行浇灌施肥。或者本专利技术中的液体菌剂防治香蕉枯萎病可以通过将液体菌剂稀释成2倍或根据需要进行稀释后液灌根或浇施于植株基部，或于香蕉苗移栽前浸根。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点(1)本专利技术以白刺链霉菌BWL15-4作为拮抗菌株，对香蕉枯萎病菌抑制作用强，对香蕉枯萎病具有良好的防治效果；(2)本专利技术的制剂对香蕉具有促生长作用；(3)本专利技术白刺链霉菌菌株BWL15-4培养条件简单，容易保存，易于工业化生产， 有着良好的开发应用前景；(4)本专利技术制防治香蕉枯萎病的剂制备方法工艺简单，发酵培养基无需贵重原料，成本低，容易推广。 附图说明图1是实施例1中筛选得到的白刺链霉菌BWL15-4菌株孢子及孢子链的扫描电镜照片，孢子表面有细刺； 图2是实施例1中制备的白刺链霉菌BWL15-4菌株与香蕉枯萎病菌4号生理小种的室内平板对峙培养的抑菌效果，其中，1为白刺链霉菌BWL15-4菌株，2为香蕉枯萎病菌4 号生理小种；图3是实施例1中制备的白刺链霉菌BWL15-4菌株与香蕉枯萎病菌4号生理小种的室内平板对峙培养的抑菌效果，其中，1为白刺链霉菌BWL15-4菌株，2为香蕉枯萎病菌4 号生理小种。实施例1菌株的分离和鉴定本实施例中的生防菌BWL15-4是从海南岛霸王岭原始森林土壤中筛选分离到的一株链霉菌，该菌株对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. cubense)具有强烈的抑制作用，2011年5月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (CGMCC,保藏号为CGMCC No. 4836，经鉴定命名为白刺链霉菌BWL 15-4菌株(Sti^ptomyces albospinus BffL 15-4)。菌株BWL15-4的分离筛选过程如下将在海南岛霸王岭原始森林中采集植物根际土壤样品进行风干，用无菌水稀释适当倍数后涂布于筛选培养基上，筛选培养基是添加重铬酸钾、萘啶酸和放线菌酮的PDA固体培养基，28°C培养5天以上，待筛选平板上长出放线菌菌落后，再于平板上适当位置接入1个或多个指示菌香蕉枯萎病菌菌饼，当某个放线菌落具有拮抗作用时，指示菌便不能越过此放线菌生长，呈现明显的拮抗带，挑取具有拮抗作用的放线菌，划线纯化三次，进行平板对峙实验，选择拮抗带较宽的放线菌作为候选菌株， 将候选菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种防治香蕉枯萎病的白刺链霉菌株ＢＷＬ１５－４，其特征是：该菌株ＢＷＬ １５－４的分类命名为白刺链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｌｂｏｓｐｉｎｕｓ），于２０１１年５月９日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．４８３６。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：曾会才，曾涛，陈汉清，彭明，莫坤联，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：66
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