预防和治疗痴呆的组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种用于预防和治疗痴呆的以灵芝提取物、十八碳烯酰胺及其结构类似物作为有效成分的组合物。由于根据本发明专利技术的组合物能抑制动物脑组织中的乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）活性，从而防止脑内乙酰胆碱的减少并对因脑缺血而引起的脑组织损伤有保护作用，因此本发明专利技术的组合物能用作阿耳茨海默型痴呆和血管型痴呆的预防和治疗药物。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于预防和治疗痴呆的药物组合物，该组合物包含作为有效成分的灵芝提取物、十八碳烯酰胺及其结构类似物。
技术介绍
痴呆是区别于正常老化的一种病态现象，分为阿耳茨海默型痴呆、血管型痴呆、其他酒精中毒和由帕金森氏病的后遗症引起的痴呆等类型。虽然阿耳茨海默型痴呆的发病机制还不明确，但已知多数患者伴有中枢神经系统中乙酰胆碱的减少。所以用乙酰胆碱前体物或者用阻碍乙酰胆碱分解的药物来提高脑中乙酰胆碱浓度的方法一直用于治疗阿耳茨海默型痴呆。乙酰胆碱酯酶抑制剂或者与已知胆碱酯酶抑制剂并用的药物现用于治疗阿耳茨海默型痴呆。其代表药物有tacrine、donepezil、rivastigmine、galantamine等。血管型痴呆经常是由于脑血管的硬化使脑内许多部位的供血不足所致的脑细胞损伤引起的。所以需要将作用于脑血管的高血压治疗药物阿司匹林或保护受损脑细胞的药物用于治疗血管型痴呆。由于痴呆的传统治疗药物主要只有抑制乙酰胆碱酯酶活性的作用。所以很有必要开发与此同时对血管型痴呆也有疗效的药物。灵芝(Ganoderma lucidum)为蘑菇的一种，是东洋的传统药材，具有抗炎、抗癌、免疫调节功能、抑制艾滋病毒、降低血压等作用。对灵芝效能的研究论文有①灵芝的水和乙酸乙酯提取物，经口服给药，均有效于被卡拉胶(carrageenan)，和巴豆油(croton oil)诱发的小鼠浮肿(参见Stavihovha W and Slama J，The anti-inflammatory Ganoderma LucidumThird International Symposium on Ganoderma lucidum9-21)。②灵芝的水提取物有效抑制癌细胞的成长(参见Wang SY et al，The anti-tumor effectof Ganoderma lucidum is mediated by cytokines related from activatedmacrophages and Tlymphocytes，Int.J Cancer 70699-705)。③从灵芝中分离得到的免疫调节蛋白质LZ-8，在体内(in vitro)实验中促进细胞分裂(mitogenic activity)的作用，在体内(in vivo)实验中则显示免疫调节活性(参见Kino K et al.，Immunomodulator，LZ-8，prevent antibody productionin mice，Int J Immunophamacol 13(8)1109-1115)。
技术实现思路
本专利技术者们一直在寻找对阿耳茨海默型痴呆和血管型痴呆均有效且安全无毒性的天然资源。从在韩国的传统药物灵芝中，提取分离出对乙酰胆碱酯酶活性和脑缺血均有抑制作用的化合物，并确定这个化合物及其结构类似物可以用于预防和治疗痴呆。因此，本专利技术的目的是提供对预防和治疗阿耳茨海默型痴呆和血管型痴呆均表现出预防和治疗效果的组合物。本专利技术提供了一种用于预防和治疗痴呆的药物组合物，该组合物包含作为有效成分的灵芝提取物、十八碳烯酰胺及其结构类似物。本专利技术提供的组合物，可抑制乙酰胆碱酯酶活性，恢复脑内乙酰胆碱总量，从而具有预防和治疗阿耳茨海默型痴呆的作用。该组合物同时能保护因脑缺血而受损的脑组织，从而也具有预防和或治疗血管型痴呆的作用。对本专利技术提供的组合物详细说明如下。首先，获得用作本专利技术组合物中有效成分的灵芝提取物的提取方法如下。将灵芝用己烷提取，提取残渣再用氯仿提取，其残渣再用甲醇提取。把甲醇提取液减压蒸馏，得到甲醇提取物(以下称为“提取物GL-M”)。提取时，所用的作为提取溶剂的己烷、氯仿、甲醇的量以浸没药材为佳。一般提取每1kg灵芝，所需的溶剂量约为2L的己烷、氯仿和甲醇。将按上述提取方法得到的灵芝甲醇提取物GL-M，进行一系列硅胶吸附柱层析和高效薄层层析(HPTLC)进一步分离、提纯。即a)灵芝的甲醇提取物GL-M，进行硅胶柱层析，湿法装柱，用氯仿/甲醇(500∶1)洗脱，以高效硅胶薄层层析检查，根据Rf值得到14个组份GL-M-1～GL-M-14；b)把从上述a)中得到的组份GL-M-8，再进行硅胶柱层析，湿法装柱，用氯仿/甲醇(100∶1)洗脱，以高效硅胶薄层层析检查，合并相同的组份，得到7个组份GL-M-8-A～GL-M-8-G)；c)把从上述b)中得到的组份GL-M-8-F，再进行硅胶柱层析，湿法装柱，用氯仿/甲醇(50∶1)洗脱，以高效硅胶薄层层析检查，合并相同的组份，得到5个组份GL-M-8-F-a～GL-M-8-F-e)；d)把从上述c)中得到的组份GL-M-8-F-b，再进行硅胶柱层析，湿法装柱，用氯仿/甲醇(50∶1)洗脱，以高效硅胶薄层层析检查，合并相同的组份，得到4个组份GL-M-8-F-b-I～GL-M-8-F-b-IV)；e)把从上述d)中得到的组份GL-M-8-F-b-III，再进行硅胶柱层析，湿法装柱，用氯仿/甲醇(30∶1)洗脱，以高效硅胶薄层层析检查，合并相同的组份，得到GL-M-8-F-b-III-1。将按上述方法得到的灵芝提取物GL-M-8、GL-M-8-F、GL-M-8-F-b、GL-M-8-F-b-III、GL-M-8-F-b-III-1抑制乙酰胆碱酯酶活性(后述于实施例)，所以这些灵芝提取物在本专利技术的组合物中可作为有效成分。为了确定在本专利技术的组合物中作为有效成分的灵芝甲醇提取物中所含有的活性成分，对最终得到的GL-M-8-F-b-III-1进行了质谱分析，确定此化合物为十八碳烯酰胺。从而可知，本专利技术的灵芝提取物中含有作为有效成分的十八碳烯酰胺。十八碳烯酰胺是已知化合物，是一种存在于脑组织中诱导睡眠的物质。上述十八碳烯酰胺，能用多种化学合成方法合成。十八碳烯酰胺及其结构类似物的制备方法如下把脂肪酸化合物(4)和亚硫酰氯(SOCl2)在70～80℃反应，反应结束后冷却至室温，小心加入凉的氨水。把反应生成物减压过滤后进行重结晶，得到十八碳烯酰胺及其结构类似物(1)。反应式如下面的反应式1。 反应式1上面的反应式1中R1是十八碳烯酰基(9-octadecenoyl)、十六碳烯酰基(9-hexadecenoyl)或十四碳烯酰基(tetradecanoyl)。把脂肪酸化合物(5)溶于二氯甲烷后，加入二环乙基碳二亚胺(dicyclohe xylcarbodiimide)，二甲氨吡啶(dimethylaminopyridine)和正戊胺(3-aminopentane)。反应一定时间后，滤除生成的固体物，滤液进行浓缩。浓缩物用柱层析分离，得到十八碳烯酰胺结构类似物(2)。反应式如下面的反应式2。 反应式2 反应式2中R2是十八碳烯酰基(9-octadecenoyl)、十八碳二烯酰基(9，12-octadeca dienoyl)或十四碳烯酰(tetradecanoyl)基。亚油酸(linoleic acid，6)溶于二氯甲烷后，加入二环乙基碳二亚胺(dicyclo hexylcarbodiimide)，二甲氨吡啶(dimethylaminopyridine)和戊醇(3-pentanol)。反应一定时间后，滤除生成的固体物本文档来自技高网...

【技术保护点】
预防和治疗痴呆的组合物，含有下列式Ⅰ所代表的化合物作为有效成分：＊＊＊式Ⅰ其中，Ｒ↓［１］是十六碳烯酰或十四碳烯酰基团。

【技术特征摘要】
KR 2002-5-21 2002/28173;KR 2001-5-23 2001/282851.预防和治疗痴呆的组合物，含有下列式I所代表的化合物作为有效成分 式I其中，R1是十六碳烯酰或十四碳烯酰基团。2.预防和治疗痴呆的组合物，含有下列式II所代表的化合物作为有效成分 式II其...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱吉子，金禾桢，韩素叶，曹贤珍，朴河希，李知辛，金锦宏，李蓉永，李明姬，金兌熹，
申请(专利权)人：钱吉子，金禾桢，韩素叶，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]