得自山茶科植物的生物活性组合物及其生产方法和用途技术

本发明专利技术涉及分离的生物活性组合物，其包含得自山茶科（Ｔｈｅａｃｅａ）植物的生物活性组分。本发明专利技术还涉及含生物活性组合物的生物活性局部制剂。本发明专利技术进一步涉及使用本发明专利技术的生物活性组合物的方法，包括例如在哺乳动物皮肤组织中抑制炎性活性的方法、保护哺乳动物皮肤组织免受紫外线诱导损伤的方法，以及使哺乳动物皮肤组织中的皮肤病正常化的方法。本发明专利技术还涉及分离得自山茶科（Ｔｈｅａｃｅａ）植物的细胞汁或细胞壁组分的生物活性组分的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本申请要求保护2004年1月12日提交的美国临时专利申请序号60/535,861的权益。本专利技术涉及得自山茶科(Theacea)植物的生物活性组合物、其生产方法和这些组合物的用途。
技术介绍
山茶(茶植物)科包括含约40个属和600个种的树或灌木。茶树(Camellia sinensis)在山茶科中占据着独特的位置，因为此特殊的植物种主要用作生产全部三种基本茶类绿茶、乌龙茶和红茶的单一原料源(在本文统称为“茶植物”)。按照某些来源，有第4类茶，即所谓的“白茶”，其专门由茶植物的芽或梢生产。茶的三种基本形式由加工程度决定，加工使用同等嫩幼茶叶。采集、分拣、清洁叶子，以不同方式氧化，然后蒸煮或干燥。术语“发酵”经常用于描述茶的加工，但术语“氧化”是对所发生的化学转变的更精确描述。尽管加工有一些变化，但一般认为绿茶氧化程度最低，红茶最高。乌龙茶被认为是部分氧化的，因此处于绿茶和红茶之间的位置。就加工而言，绿茶和白茶之间的差异非常小(或根本没有差异)。蒸煮并萎凋鲜叶，然后立即干燥，由此制备绿茶。使叶萎凋，在滚筒中碾碎，然后使其氧化几小时，之后干燥，由此制备红茶。乌龙茶得自干燥前仅部分氧化的叶子。在世界范围内，茶是第二大(在水之后)最常饮用的液体，在美国是第六大(在水、软饮料、咖啡、啤酒和奶之后)最常饮用的液体。茶消费量在世界范围内持续增加，这尤其归因于关于该液体健康利益的公众认知逐渐增加。有越来越多的出版物提出茶及其成分的抗血管生成、抗细菌、抗癌、抗炎症、抗诱变、抗氧化物、抗脓毒和解毒特性。茶益处的名单还包括降低类风湿性关节炎风险、降低胆固醇水平和抗糖尿病特性。不是所有这些利益都被证明是统计学显著的。不过，非常广泛范围的茶益处反映了非常强生物活性物质的独特组成，这些物质存在于新鲜植物叶中，并经得住常规的茶加工。具体地说，业已报道茶树的鲜叶含22.2％多酚、17.2％蛋白、4.3％咖啡因、27.0％粗纤维、0.5％淀粉、3.5％还原糖、6.5％果胶、2.0％醚提取物和5.6％灰分(Duke，J.A.，Handbook of Energy Crops(1983)，参见www.hort.purdue.edu/newcrop/duke_energy/Camellia_sinensis.html)。据报道每100g叶含8.0g H2O、24.5g蛋白、2.8g脂肪、58.8g总碳水化合物、8.7g纤维、5.9g灰分、327mg Ca、313mg P、24.3mgFe、50mg Na、2700μg β-胡萝卜素等同物、0.07mg硫胺素、0.8mg核黄素、7.6mg烟酸和9mg抗坏血酸。另一个报道记录到8.0g H2O、28.3g蛋白、4.8g脂肪、53.6g总碳水化合物、9.6g纤维、5.6g灰分、245mg Ca、415mg P、18.9mg Fe、60mg Na、8400μg β-胡萝卜素等同物、0.38mg硫胺素、1.24mg核黄素、4.6mg烟酸和230mg抗坏血酸。再另一个报道得到8.1g H2O、24.1g蛋白、3.5g脂肪、59.0g总碳水化合物、9.7g纤维、5.3g灰分、320mg Ca、185mg P、31.6mg Fe、8400μg β-胡萝卜素等同物、0.07mg硫胺素、0.79mg核黄素、7.3mg烟酸和85mg抗坏血酸(J.A.Duke和A.A.Atchley，“Proximate Analysis，”载于Christie，B.R.(编辑)，The Handbook ofPlant Science in Agriculture，CRC Press，Inc.，Boca Raton，FL(1984))。叶还含有胡萝卜素、核黄素、烟酸、泛酸和抗坏血酸。咖啡因和丹宁是其中最有活性的组分(Council for Scientific and IndustrialResearch，1948-1976)。鲜叶中存在的抗坏血酸在制备红茶时被破坏。存在苹果酸和草酸，以及山奈酚、槲皮苷、茶碱、可可碱、黄嘌呤、次黄嘌呤、腺嘌呤、树胶、糊精和肌醇。挥发油(叶鲜重的0.007-0.014％)的主要组分是己烯醛、已烯醇和低级醛、丁醛、异丁醛(isobuteraldehyde)、异戊醛以及正-己基、苄基和苯乙基醇、苯酚、甲酚、己酸、正-辛醇、香叶醇、沉香醇、苯乙酮、苄醇和柠檬醛。已发现鲜茶叶通常具有高水平的多酚(儿茶素)黄烷醇基团，其可高达叶干物质的30％。儿茶素主要包括(-)-表儿茶素、(-)-表儿茶素没食子酸酯、(-)-表没食子儿茶素和(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯。另外存在茶独有的3-没食子酰基奎宁酸(茶没食子素)和氨基酸茶氨酸(5-N-乙基谷氨酰胺)(Duke，J.A.，Handbook of Energy Crops(1983)，参见www.hort.purdue.edu/newcrop/duke_energy/Camellia_sinensis.html)。茶叶含高水平的多酚氧化酶和过氧化物酶。第一种酶催化儿茶素的需氧氧化，该过程在叶细胞结构完整性被破坏时启动。酚氧化酶负责产生双黄烷醇、茶黄素、表茶黄酸和Thearubigens，它们构成了红茶中可提取物质的最大部分。这些化合物大部分易于和咖啡因形成复合物，咖啡因在鲜叶中具有显著水平(干物质的2-4％)。过氧化物酶在与原花色素产生上述复合物时起重要作用。在红茶香味组分中存在的数百种挥发性化合物中，有多种化合物的形成也由儿茶素醌启动。另外，发生相对可溶性的糖苷向较低溶解性糖苷配基的转变。以上过程的所有复杂级联都由叶细胞结构的破坏启动，并随氧化时间加强。因此，通常以强烈揉或切或相对长时间氧化加工的红茶组成与鲜叶的组成极为不同。尽管绿茶(和白茶)以最小氧化加工，其组成与鲜叶的组成更类似，但也有非酶或酶催化的变化，这些变化在采摘后极为快速地发生，在干燥阶段产生新的挥发性物质。因此，即便是相对温和的绿茶加工也产生了与原始新鲜植物组成的某些偏离，可降低鲜茶植物叶的治疗价值和其它疗效。众多的近期研究清楚表明，茶的疗效以下列顺序降低白茶＞绿茶＞乌龙茶＞红茶。因此，研究新鲜茶植物可防止由于常规茶加工而观察到的特定活性降解。鲜嫩山茶(Camellia)叶含约80％水。细胞的坚固细胞壁防止细胞膨胀和脱水。细胞壁结构的破坏引起新鲜植物组织脱水，接着引起一系列有害的物理化学和生物化学过程渗压休克、酶区室化丧失和破坏、水解和氧化、酚聚合、糖苷转变成糖苷配基、产生Maillard反应产物、异构化和微生物污染。因此，鲜山茶含非常广泛范围的生物活性物质，其仅有一部分在常规提取过程中变成可利用的。因此，仅有细胞壁、分解代谢产物和稳定代谢物可用沸水提取，以获得茶饮料，或用不同的溶剂提取，以获得有限部分的生物活性组分(主要为多酚和类黄酮)。按照鲜茶叶作为有价值治疗剂和其它潜在有益生物活性组合物来源的潜能，需要研究鲜茶植物，以确定如何最大化其治疗作用和其它潜在的有益生物活性特性。专利技术概述本专利技术涉及一种生物活性组合物。在一个实施方案中，生物活性组合物包括得自山茶科植物的分离生物活性组分。合适的生物活性组分可包括但不限于细胞壁组分、细胞壁组分提取物、膜组分、膜组分提取物、胞质组分、胞质组分提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物活性组合物，所述组合物包含：得自山茶科（Ｔｈｅａｃｅａ）植物的分离生物活性组分，其中所述生物活性组分选自细胞壁组分、细胞壁组分提取物、膜组分、膜组分提取物、胞质组分、胞质组分提取物、细胞汁浆液及其组合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2004-1-12 60/535,8611.一种生物活性组合物，所述组合物包含得自山茶科(Theacea)植物的分离生物活性组分，其中所述生物活性组分选自细胞壁组分、细胞壁组分提取物、膜组分、膜组分提取物、胞质组分、胞质组分提取物、细胞汁浆液及其组合。2.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为细胞壁组分。3.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为细胞壁组分提取物。4.权利要求3的生物活性组合物，其中所述细胞壁组分提取物的总儿茶素含量为约2.1至约4.5mg/g干物质。5.权利要求3的生物活性组合物，其中所述细胞壁组分提取物的儿茶素含量分布包含约2.0至约3.0mg(+)-儿茶素/g细胞壁组分提取物干物质；约0.005至约0.02mg(-)-表儿茶素/g细胞壁组分提取物干物质；约0.005至约0.02mg(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯/g细胞壁组分提取物干物质；约0.003至约0.01mg(-)-表儿茶素没食子酸酯/g细胞壁组分提取物干物质。6.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为膜组分。7.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为膜组分提取物。8.权利要求7的生物活性组合物，其中所述膜组分提取物的总儿茶素含量为约15.0至约30.5mg/g干物质。9.权利要求7的生物活性组合物，其中所述膜组分提取物的儿茶素含量分布包含约1.7至约3.3mg(-)-表没食子儿茶素/g膜组分提取物干物质；约6.1至约10.2mg(+)-儿茶素/g膜组分提取物干物质；约0.3至约1.1mg(-)-表儿茶素/g膜组分提取物干物质；约6.2至约12.5mg(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯/g膜组分提取物干物质；约0.007至约0.03mg(-)-没食子儿茶素没食子酸酯/g膜组分提取物干物质；和约1.3至约3.3mg(-)-表儿茶素没食子酸酯/g膜组分提取物干物质。10.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为胞质组分。11.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为胞质组分提取物。12.权利要求1的生物活性组合物，其中所述生物活性组分为细胞汁浆液。13.权利要求12的生物活性组合物，其中所述细胞汁浆液的总儿茶素含量为约8.0至约20.0mg/g干物质。14.权利要求12的生物活性组合物，其中所述细胞汁浆液的儿茶素含量分布包含约2.1至约4.4mg(-)-表没食子儿茶素/g细胞汁浆液干物质；约4.2至约8.6mg(+)-儿茶素/g细胞汁浆液干物质；约0.2至约2.0mg(-)-表儿茶素/g细胞汁浆液干物质；约1.2至约3.2mg(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯/g细胞汁浆液干物质；约0.01至约0.1mg(-)-没食子儿茶素没食子酸酯/g细胞汁浆液干物质；和约0.2至约1.3mg(-)-表儿茶素没食子酸酯/g细胞汁浆液干物质。15.权利要求1的生物活性组合物，其中所述山茶科(Theacea)植物为山茶属(Camellia)植物或柃木属(Eurya)植物。16.权利要求15的生物活性组合物，其中所述山茶属(Camellia)植物选自茶树(Camellia sinensis)、茶花(Camellia japonica)、云南山茶花(Camellia reticulate)和茶梅(Camellia sasanqua)。17.权利要求15的生物活性组合物，其中所述柃木属(Eurya)植物为Eurya sandwicensis。18.权利要求1的生物活性组合物，所述组合物进一步包含稳定剂。19.权利要求18的生物活性组合物，其中所述稳定剂选自乳化剂、防腐剂、抗氧化剂、聚合物基质及其混合物。20.一种适于局部施用给哺乳动物的生物活性局部制剂，所述生物活性局部制剂包含局部有效量的权利要求1的生物活性组合物和局部可接受的载体。21.权利要求20的生物活性局部制剂，其中局部可接受的载体选自亲水膏剂型基质、亲水洗剂型基质、亲水表面活性剂基质、亲水凝胶型基质、亲水溶液型基质、疏水膏剂型基质、疏水洗剂型基质、疏水表面活性剂基质、疏水凝胶型基质和疏水溶液型基质。22.权利要求20的生物活性局部制剂，其中生物活性组合物以生物活性局部制剂总重的约0.001％至约90％的量存在。23.一种在哺乳动物皮肤组织中抑制炎性活性的方法，所述方法包括提供权利要求1的生物活性组合物和以在皮肤组织中有效抑制炎性活性的量将生物活性组合物施用于皮肤组织。24.权利要求23的方法，其中所述山茶科(Theacea)植物为山茶属(Camellia)植物或柃木属(Eurya)植物。25.权利要求23的方法，其中所述生物活性组合物进一步包含稳定剂。26.权利要求25的方法，其中所述稳定剂选自乳化剂、防腐剂、抗氧化剂、聚合...

【专利技术属性】
技术研发人员：M科加诺夫，
申请(专利权)人：综合植物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]