提高植物转化效率的多个转化增强子序列的应用制造技术

技术编号:5441838 阅读:236 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及提高农杆菌(Agrobacterium)和根瘤菌(Rhizobium)介导 的植物细胞转化效率的方法和组合物,通过使用可操作地连接到包 含T-DNA的重组构建体上的T-DNA边界序列上的附加转化增强子 序列例如超驱动序列或者TSS序列可实现上述转化效率提高。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】提高植物转化效率的多个转化增强子序列的应用
技术介绍
本申请要求获得于2006年7月19日提交的美国临时专利申请60/831,814的优先权,其公开通过引用全文结合到本文中。1. 专利
本专利技术主要涉及植物生物技术。更具体地说,本专利技术涉及提高细菌介导的植物转化效率的方法和组合物。2. 相关技术描述在天然的农杆菌G4gn^aen'wm)介导的植物细胞的转化中,来自根瘤农杆菌(A fMwe/adms)的Ti质粒或者发根农杆菌(A rA/zogees)的Ri质粒的一段DNA被转移到植物细胞中(例如Gdvin, 2003)。该被转移的DNA(T-DNA)片段侧翼是不完全的24bp正向重复序列,该重复序列可被农杆菌核酸内切酶VirD2识别,通过在每一重复序列的一条链上的特定位点上形成切口而产生单链的T链。引发单链的T链形成的重复序列称为右边界(RB),而终止单链的T链形成的重复序列被称为左边界(LB)。形成切口后,VirD2蛋白连附着在所述链的5'端,并引导T链进入植物细胞,在其他农杆菌和植物编码蛋白的帮助下T链被整合到植物基因组中。包含载体骨架序列在内的T-DNA区域的序列下游(从5,本文档来自技高网...

【技术保护点】
提高细菌介导的植物转化效率的方法,其包括如下步骤: a)将至少一个附加的转化增强子序列引入到包含至少一个T-DNA边界区的植物转化载体中,所述T-DNA边界区包含转化增强序列;和 b)通过细菌介导的转化用所述载体转化植物细胞,其 中所述细菌能够转化植物细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2006.7.19 US 60/831,8141.提高细菌介导的植物转化效率的方法,其包括如下步骤a)将至少一个附加的转化增强子序列引入到包含至少一个T-DNA边界区的植物转化载体中,所述T-DNA边界区包含转化增强序列;和b)通过细菌介导的转化用所述载体转化植物细胞,其中所述细菌能够转化植物细胞。2. 权利要求1的方法,其中附加的转化增强子序列包含SEQ ID NO:20的共有核心序列。3. 权利要求2的方法,其中所述附加的转化增强子序列包含选 自以下的序列SEQ ID NO:6、 SEQ ID NO:7、 SEQ ID NO:8、 SEQ IDNO:9、 SEQIDNO:13、和与SEQ ID NO:6、 SEQ ID NO:7、 SEQ IDNO:8、 SEQIDNO:9或SEQIDNO:13中的任一个互补的序列。4. 权利要求1的方法,其中所述转化增强子序列位于T-DNA右 边界(RB)序列的近端。5. 权利要求4的方法,其中所述转化增强子序列来自根瘤农杆 菌(A /wme/adew力的胭脂碱或章鱼碱Ti质粒。6. 权利要求4的方法,其中所述转化增强子序列来自发根农杆 菌(yl. M&oge&s)的Ri质粒。7. 权利要求1的方法,其中所述细菌介导的转化是农杆菌介导 的转化。8. 权利要求1的方法,其中所述细菌介导的转化是根瘤菌介导 的转化。9. 权利要求8的方法,其中所述根瘤菌介导的转化是农杆菌 (Jgro6aen'ww)、 根瘤菌(i /z z'zoh'wm)、 中华才艮瘤菌(57wo//i z'zoZ z'wm)、 中间根瘤菌(Mesor/^o&iwO或慢生根瘤菌(5ra办r/n'zo&'wm)介导的转化。10. 权利要求1的方法,其中所述植物细胞来自选自以下的植物大豆、玉米、棉花、油菜、水稻、小麦、苜蓿、菜豆、花生、 烟草、向日葵、大麦、甜菜、青花椰菜、甘蓝、胡萝卜、花椰菜、 芽菜、大白菜、黄瓜、茄子、韭葱、莴苣、甜瓜、燕麦、洋葱、豌 豆、胡椒、花生、马铃薯、西葫芦、萝卜、高粱、菠菜、南瓜、糖 萝卜、西红柿和西瓜。11. 权利要求1的方法,其中所述转化增强子序列包含SEQ ID NO:IO、 SEQ ID NO:ll、或与SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:ll互补的序列。12. ...

【专利技术属性】
技术研发人员:X·叶L·吉尔伯森
申请(专利权)人:孟山都技术有限公司
类型:发明
国别省市:US

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