丹参总酚酸的制备方法技术

本发明专利技术公开一种丹参总酚酸的制备方法和它的制备品的用途。其制备方法为：丹参用水热提，提取液经聚酰胺柱和大孔吸附树脂柱分离与精制后，冷冻干燥，即得丹参总酚酸。其成品收率为生药量的４％以上，总酚酸含量在８０％以上。所得的丹参总酚酸可作为防治心脑血管疾病等的药物而应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药提取物，更具体地说，涉及从中药丹参中提取精制而成的丹参总酚酸。本专利技术的丹参总酚酸的制备方法，基本上是由丹参用水热提，聚酰胺柱分离，大孔吸附树脂柱分离几个步骤组成。本专利技术通过下述技术方案予以实施(a)丹参去杂质、切成小块或粉碎成粗粉，用水热提，提取液调pH至酸性后，滤过；(b)滤液上聚酰胺柱，用水冲洗至pH值为中性，再用弱碱性水溶液洗脱，收集碱洗脱液；(c)碱洗脱液调PH值到酸性后，上大孔吸附树脂柱，先用水冲洗至pH值为中性，再用含水或无水低级醇洗脱，收集洗脱液；(d)洗脱液减压浓缩至无醇，干燥，即得丹参总酚酸。其中步骤(a)中，用水加热提取2～4次，每次0.5小时～2小时，提取的温度为60～100℃(最佳为90～100℃)；提取液用酸调pH值至4以下(最佳为2以下)。步骤(b)中，洗脱液弱碱性水溶液的浓度优选范围为0.01％～2％(最佳范围为0.08％～0.5％)；聚酰胺材料为聚己内酰胺(尼龙-6)。步骤(c)中，大孔吸附树脂为苯乙烯型；碱洗脱液用酸调pH值到4以下(最佳为2以下)；低级醇的碳原子范围为C1～C5，如甲醇、乙醇等，其洗脱浓度为40％～95％(最佳为60％～95％)，从工业化生产的安全、低成本和工艺简化上考虑，采用95％乙醇进行洗脱，实际效果也令人满意。依本专利技术的方法制成的丹参总酚酸，可制成任何一种药剂学上所说的剂型，也可配合其他药物或组分一起制成制剂使用。本专利技术与现有技术相比有如下优势1.易于产业化。本专利技术克服了现有技术中需要大量浓缩水即不易产业化的难点，在不加热、不减压的情况下就可以祛除大量水，优化了工艺步骤和条件，不消耗能源，不污染环境，无论从技术条件还是从绿色环保来看，均使产业化易于实现。2.有效成分损失少。本专利技术避免了现有技术中因醇沉而造成有效成分的部分损失；也避免了现有技术中因水溶液浓缩而对丹参酚酸化合物稳定性的影响，减少了有效成分的分解、损失，保证了产品的稳定性。3.产率高。现有技术的成品(丹参总酚酸干粉)收率一般为生药量的2～3％；而本专利技术的成品收率一般在4％以上，明显高于现有技术所采用的方法，且成品中的总酚酸百分含量80％以上，杂质少，质量高。4.成本低。本专利技术不需要在加热、减压的情况下浓缩大量的水，有效降低了能耗，降低了生产成本；本专利技术的丹参总酚酸产率高，且丹参总酚酸含量与现有技术的含量相近或高于现有技术的含量，即同样的生药量可生产出更多质量相同或质量更高的产品。成本的降低，不仅使产业化更加容易，而且能为患者带来更多的利益，从而产生巨大的社会效益。5.动物实验研究也说明了依本专利技术的方法制备的丹参总酚酸的有益效果。实验例丹酚酸对大脑中动脉凝闭大鼠脑缺血的保护作用1.试验材料1)动物Wistar大鼠，购自北京医科大学动物所，雄性，体重200～220克，许可证编号SCXK(京)2002-003。2)试剂水合三氯乙醛，中国辽宁沈阳试剂厂生产，批号，920401。红四氮唑(TTC)，北京化工厂生产，批号，810911。3)仪器高频电刀，北京医用电子仪器厂。SXP-1B手术显微镜，上海医用光学仪器厂。4)被测药物总丹酚酸(天士力)，按本专利技术方法制备；总丹酚酸(药物所)，中国医学科学院药物所提供，按中国专利(申请号01142288.2，申请日2001年9月)的方法制备；香丹注射液，雅安三九药业有限公司生产，批号，010901，作为对照药品。5)被测药物配制方法及给药途径总丹酚酸，香丹注射液均用灭菌生理盐水稀释，配成所需浓度，总丹酚酸10mg/kg和20mg/kg舌下静脉给药，香丹注射液1ml/kg(相当于1g/kg)，舌下静脉给药。以上药物均于缺血后30分钟舌下静脉给予。6)试验组的设置假手术对照组，缺血对照组，总丹酚酸(药物所)10mg/kg和20mg/kg组，总丹酚酸(天力士)10mg/kg和20mg/kg组，2.实验方法1)大鼠大脑中动脉阻断(电凝闭)脑缺血法进入试验的雄性大鼠腹腔注射三氯乙醛350mg/kg麻醉，左侧位固定在鼠板上，在手术显微镜下沿外耳道与眼眦连线中点切开皮肤，暴露出颧弓，用咬骨钳咬去颧弓，并沿颅骨剪断筋膜，暴露出颥前窝，用小牵张器将磷状骨和下颌骨间距撑开，于颅骨底开颅窗，暴露出大脑中动脉，用高频电刀烧断，以阻断血流，造成局部脑缺血。30分钟后进行舌下静脉给药后回笼饲养。室温严格控制在24～25℃。2)脑梗塞体积测定大鼠中脑动脉阻断24小时后断头取脑。将剥离完整的大脑放入4℃冰箱内盛有生理盐水的小杯中10分钟后去嗅球、小脑及低位脑干，沿冠状面切为五片，立即放入含有1.5ml 4％红四氮唑(TTC)及0.1ml 1mol/L磷酸氢二钾的5ml染色液中，避光在37℃水浴中温孵30分钟。取出脑片放入10％福尔马林中固定。正常组织为玫瑰红色；缺血组织呈白色。用重量求积法测量梗塞面积，计算梗塞区域占大脑半球面积的百分比。3)脑水份含量的测定大鼠中脑动脉阻断后24小时，处死动物，取出全脑，将剥离完整的大脑去嗅球、小脑及低位脑干后称重(此为脑湿重)再放于烤箱中105℃烤至恒重(约48小时)，再称重(此为脑干重)脑水含量＝(脑湿重-脑干重)/脑湿重×100％4.实验结果丹酚酸对大脑中动脉凝闭大鼠脑缺血的保护作用 注(1)**P＜0.01，*P＜0.05，双侧检验，与缺血对照比较。#P＜0.05，单侧检验，与缺血对照比较。(2)对照药品香丹注射液1ml/kg相当于含生药量1g/kg；丹酚酸(天力士)10mg/kg相当于含生药量0.25g/kg(以收率为4％计算)；丹酚酸(天力士)20mg/kg相当于含生药量0.5g/kg(以收率为4％计算)5.结论采用大脑中动脉凝闭的方法造成大鼠脑缺血损伤，观察中国医学科学院药物研究所生产的丹酚酸与天津天士力制药股份有限公司生产的丹酚酸对脑缺血损伤的保护作用。结果显示，脑缺血后30分钟静脉给药，10mg/kg和20mg/kg，两种丹酚酸均可以明显改善缺血引起的脑水肿和脑梗塞、并且在相同剂量下两种药物作用相同。表明两种丹酚酸具有相同的抗脑缺血损伤作用。用本专利技术方法所制备的丹参总酚酸，可制成任何一种药剂学上所说的药物剂型，这些药物剂型可以是，片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、软膏剂、油膏剂、霜剂、栓剂、注射剂、粉针剂、贴剂、滴丸、混悬剂等。用本专利技术方法所制备的丹参总酚酸，可应用于制备治疗心脑血管疾病、肾病、肝病、肺炎、肺心病、胰腺炎、糖尿病、颈椎病、眼底血管性疾病、眼底神经性疾病、偏头痛、慢性胃炎、眩晕、骨伤科疾病、高原疾病、老年痴呆症等的药剂中。对比例按专利申请文献(中国专利，申请号01142288.2，申请日2001年9月)的方法制备丹参总酚酸丹参5kg粉碎成粗粉，加去离子水在100℃加热提取3次。第一次加30L水，加热1小时；第二、三次各加15L水分别加热1/2小时。提取液在50℃减压浓缩至5L，冷却后加95％乙醇14L，静置过夜，过滤。滤液在50℃减压回收乙醇，所得浓缩液通过RA型大孔吸附树脂(以苯乙烯，二苯乙烯为主体，干树脂量2kg)，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应，继续用50％乙醇洗脱至洗脱液加三氯化铁铁氰化钾试剂无明显的酚羟基反应。洗脱液在50℃减压浓缩后置本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丹参总酚酸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤， （ａ）丹参用水提取， （ｂ）提取液用聚酰胺层析柱分离， （ｃ）洗脱液用大孔吸附树脂层析柱分离。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：魏峰，岳洪水，李德坤，孙江晓，叶正良，李旭，
申请(专利权)人：天津天士力制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]