【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞染色，具体为一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法。
技术介绍
1、本专利技术相较于其他专利解决了悬浮细胞爬片实验过程中细胞容易脱落的问题，相较于中国专利文献cn 102288471a的优点在于不需要多次离心洗涤，避免丢失细胞，同时在染色前滴加至爬片上干燥避免染色过程中干燥造成的非特异性着色。本专利技术，在血样ctc的检测中具有较好的应用效果。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，以解决现有技术中存在的问题。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：
3、一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，包括以下步骤：
4、（1）爬片处理：用多聚赖氨酸溶液对爬片进行处理，得到处理后的爬片；
5、（2）细胞固定：用4%多聚甲醛溶液固定细胞，得到固定过的细胞悬液；
6、（3）涂片制作：将固定过的细胞悬液，离心分离取沉淀，用pbs洗涤，再用pbs调整细胞浓度后滴加并铺满爬片，...
【技术保护点】
1.一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，包括以下制备步骤：
3.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（1）所述多聚赖氨酸溶液是将多聚赖氨酸和溶剂按照1mg：10mL混合均匀配制而成；所述溶剂为去离子水或1mmol/L中性Tris-HCl缓冲液中的一种。
4.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（1）所述细胞培养板为6孔细胞培养板和24孔细胞培养板中的一种。
5.根...
【技术特征摘要】
1.一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，包括以下制备步骤：
3.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（1）所述多聚赖氨酸溶液是将多聚赖氨酸和溶剂按照1mg：10ml混合均匀配制而成；所述溶剂为去离子水或1mmol/l中性tris-hcl缓冲液中的一种。
4.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（1）所述细胞培养板为6孔细胞培养板和24孔细胞培养板中的一种。
5.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（2）所述4%多聚甲醛溶液和细胞的数量关系为1ml：4×105~6×105个。
6.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（3）所述调整细胞浓度是将细胞浓度调整到5×105~1.5×106个/ml。
7.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（6）所述封闭溶液为封闭山羊血清和3%bsa中的一种。
8.根据权利要求2所述的一种血液中有核细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，步骤（6）所述一抗稀释液是将一抗和pbs...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘俊，唐顺博，史慧敏，米传靓，杨镇，朱建国，李建，
申请(专利权)人：山东艾盟生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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