一种公羊精液超低温冷冻保存方法技术

本发明专利技术提供一种公羊精液超低温冷冻保存方法，涉及动物繁殖生物技术领域。该公羊精液超低温冷冻保存方法，包括采集新鲜公羊精液，经离心去除精浆后，用含卵黄和犊牛血清的基础稀释液调整精子浓度至1×108‑2×108个/mL；将预处理后的精液与复合冷冻保护剂按体积比1:1混合；依次在37℃平衡15min、4℃平衡30min、‑80℃冷冻20min后，分装至细管并投入液氮（‑196℃）保存。本发明专利技术通过优化复合冷冻保护剂配方（低毒DMSO+海藻糖+茶多酚+硒代蛋氨酸+抗冻蛋白）和梯度降温工艺，解决了传统方法中保护剂毒性强、抗氧化不足的问题。该方法可显著提高公羊精液解冻后活力和顶体完整性，适用于不同品种公羊精液的长期保存，为畜禽种质资源保护提供了新技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动物繁殖生物，具体为一种公羊精液超低温冷冻保存方法。

技术介绍

1、公羊精液的超低温冷冻保存（通常在-196℃液氮中保存）是畜禽种质资源保护和人工授精技术的关键环节。目前，传统的公羊精液冷冻保存方法主要存在以下技术瓶颈：

2、1、冷冻保护剂毒性问题：常用的二甲亚砜（dmso）、甘油等化学冷冻保护剂虽能抑制冰晶形成，但高浓度时会对精子造成渗透损伤和化学毒性，导致解冻后精子活力下降；

3、2、抗氧化能力不足：冷冻-解冻过程中精子易产生氧化应激反应，现有技术中抗氧化体系（如添加维生素c、e）的保护效果有限，难以有效抑制脂质过氧化；

4、3、冷冻效率低：传统方法采用单一保护剂配方和固定冷冻程序，对不同品种公羊精液的适应性差，尤其对精子耐冻性较弱的品种（如地方绵羊品种）保存效果不佳。

5、因此，亟需开发一种低毒、高效、适应性广的公羊精液冷冻保存新方法。

技术实现思路

1、（一）解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种公羊精液超本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：步骤一中，所述新鲜公羊精液采用假阴道法进行采集。

3.根据权利要求1所述的一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：步骤二中，所述茶多酚为表没食子儿茶素没食子酸酯。

4.根据权利要求1所述的一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：步骤一和步骤二中，所述基础稀释液由80％Tris-柠檬酸-葡萄糖缓冲液、10％卵黄、10％犊牛血清组成。

5.一种公羊精液超低温冷冻保存系统，基于权利要求1-4任一项所述的一种公...

【技术特征摘要】

1.一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：步骤一中，所述新鲜公羊精液采用假阴道法进行采集。

3.根据权利要求1所述的一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：步骤二中，所述茶多酚为表没食子儿茶素没食子酸酯。

4.根据权利要求1所述的一种公羊精液超低温冷冻保存方法，其特征在于：步骤一和步骤二中，所述基础稀释液由80％tris-柠檬酸-葡萄糖缓冲液、10％卵黄、10％犊牛血清组成。

5.一种公羊精液超低温冷冻保存系统，基于权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：武利恒，丁向英，毛荣华，黄康，段心明，都玉，尹诗，柴素洁，陈浙伟，
申请(专利权)人：浙江华欣牧业有限公司，
类型：发明
国别省市：