一种肿瘤DNA液体活检检测方法技术

本发明专利技术涉及肿瘤DNA液体活检领域，尤其涉及一种肿瘤DNA液体活检检测方法，包括样本采集、DNA评估、文库构建、PCR扩增、测序反应与数据收集、数据分析。本发明专利技术中，通过提纯酶组合物可以对PARP3酶、未连接DNA的测序接头以及PCR扩增时所产生的杂质进行分解，这样在文库构建和PCR扩增的步骤中，可以使用提纯酶组合物将磁珠纯化步骤代替，通过胰蛋白酶和UDG酶制备而成的提纯酶组合物不仅价格较低，而且不具有磁珠颗粒的残留的问题，可以进一步的提高测量结果的精度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤dna液体活检，尤其涉及一种肿瘤dna液体活检检测方法。

技术介绍

1、肿瘤dna液体活检是一种先进的医疗检测技术，它通过分析患者体液中的肿瘤dna片段，来提供关于肿瘤的信息。肿瘤dna液体活检是指通过无创或微创手段获取患者的部分体液(主要是血液)，利用高通量测序、数字pcr等先进技术，对体液中的循环肿瘤dna(ctdna)、循环肿瘤细胞(ctc)、外泌体(exosome)等进行分析，从而获取肿瘤的相关信息。

2、二代测序(ngs)是肿瘤dna液体活检的一种重要技术，其利用高通量的测序平台，能够同时检测样本中大量的dna序列，从而实现对肿瘤dna的全面分析。

3、在二代测序过程中，需要使用磁珠纯化对文库构建中的parp3酶、未连接dna的测序接头以及pcr扩增时所产生的杂质进行去除，以提高dna的纯度。但是在磁珠纯化实际应用时仍然具有一定的缺点，例如：

4、1、磁珠纯化的成本通常比一些传统的纯化方法要高，这主要是因为磁珠本身的制备成本以及相关的磁分离设备成本较高。

5、2、在磁珠纯化过程中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肿瘤DNA液体活检检测方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种肿瘤DNA液体活检检测方法，其特征在于，所述步骤S1-c中的离心机转速为3000rpm，离心时间为10-15min。

3.根据权利要求1所述的一种肿瘤DNA液体活检检测方法，其特征在于，所述步骤S1-d中的静置时间为10-14h，并将血浆样品在55℃的水浴中静置。

4.根据权利要求1所述的一种肿瘤DNA液体活检检测方法，其特征在于，所述提纯酶组合物包括胰蛋白酶和UDG酶混合制备而成，其中胰蛋白酶和UDG酶的重量比为2:1。

5.根据权利要求4所述的一种肿瘤DNA...

【技术特征摘要】

1.一种肿瘤dna液体活检检测方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种肿瘤dna液体活检检测方法，其特征在于，所述步骤s1-c中的离心机转速为3000rpm，离心时间为10-15min。

3.根据权利要求1所述的一种肿瘤dna液体活检检测方法，其特征在于，所述步骤s1-d中的静置时间为10-14h，并将血浆样品在55℃的水浴中静置。

4.根据权利要求1所述的一种肿瘤dna液体活检检测方法，其特征在于，所述提纯酶组合物包括胰蛋白酶和udg酶混合制备而成，其中胰蛋白酶和udg酶的重量比为2:1。

5.根据权利要求4所述的一种肿瘤dna液体活检检测方法，其特征在于，所述胰蛋白酶和udg酶在搅拌机内混合，搅拌转速为200rpm，搅拌...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶晓通，张云威，蔡月，
申请(专利权)人：厦门华诺海普生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：