一种检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种检测重组水痘‑带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法和应用。包括：制备蛋白校准标准溶液样品；制备QS‑21校准标准溶液样品；制备二油酰基磷脂酰胆碱和胆固醇校准标准溶液样品；制备检测样品；装载样品至液相色谱仪，并运行分析方法；计算疫苗中蛋白和佐剂主要成分的含量。本发明专利技术是能同时检测疫苗中蛋白、二油酰基磷脂酰胆碱、胆固醇和皂树皂苷QS‑21含量的高效液相色谱法。本发明专利技术只需1次检测，就能准确检测出疫苗中蛋白、二油酰基磷脂酰胆碱、胆固醇和皂树皂苷QS‑21的含量，极大地提高了疫苗检定效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学，具体涉及一种检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法和应用。

技术介绍

1、水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virμs，vzv)又称3型人疱疹病毒，是一种人类α疱疹病毒。vzv的基因组大小约为125kb，编码约69种蛋白，编码的糖蛋白有8个，包括gb、gc、ge、gh、gi、gk、gl、gm；其中，糖蛋白e(glycoprotein e，ge)是病毒囊膜和宿主细胞膜上含量最丰富、免疫原性较强的糖蛋白，其能诱导细胞免疫和体液免疫。

2、葛兰素史克公司的重组蛋白带状疱疹疫苗于2017年经fda批准上市，用于在50岁以上成人中预防带状疱疹。该疫苗由两部分组成，一是由cho细胞表达的截短vzv糖蛋白e(ge)，二是as01b佐剂系统[as01b佐剂系统由免疫增强剂3d-mpl、免疫增强剂皂树皂苷qs-21和脂质体组成；脂质体主要成分：二油酰基磷脂酰胆碱(dopc)和胆固醇]。

3、相对于默沙东公司和百克公司的减毒活疫苗，gsk公司的佐剂亚单位疫苗的保护率更高，但是临床副反应更本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，所述重组水痘-带状疱疹疫苗由PADRE-gE-P2融合蛋白和复合佐剂组成，所述PADRE-gE-P2融合蛋白的一种可选的从N端到C端的分子结构为：PADRE-GSGSG-gE-GGS-P2，所述PADRE-gE-P2融合蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述复合佐剂为XA-401，其主要成分为二油酰基磷脂酰胆碱、胆固醇和皂树皂苷QS-21。

3.根据权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，所述重组水痘-带状疱疹疫苗由padre-ge-p2融合蛋白和复合佐剂组成，所述padre-ge-p2融合蛋白的一种可选的从n端到c端的分子结构为：padre-gsgsg-ge-ggs-p2，所述padre-ge-p2融合蛋白氨基酸序列如seq id no.1所示；所述复合佐剂为xa-401，其主要成分为二油酰基磷脂酰胆碱、胆固醇和皂树皂苷qs-21。

3.根据权利要求1所述的检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，所述s1中蛋白校准标准溶液样品的蛋白浓度为5μg/ml～200μg/ml。

4.根据权利要求1所述的检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，所述s2中皂树皂苷qs-21校准标准溶液样品的浓度为10μg/ml～100μg/ml，所述s3中二油酰基磷脂酰胆碱校准标准溶液样品和胆固醇校准标准溶液样品的浓度分别为200μg/ml～2000μg/ml和50μg/ml～500μg/ml。

5.根据权利要求1所述的检测重组水痘-带状疱疹疫苗中蛋白和复合佐剂主要成分含量的方法，其特征在于，所述s5中分析方法的色谱柱含有烷基或苯基反相色谱填料，流动相含有乙腈、甲醇、三氟乙酸、水；所述s5中分析方法的液相色谱仪参数包括但不限于：柱温、进样体积、流速、检测器参数；所述柱温为40℃～60℃；所述进样体积为5μl～100μl；所述流速为0.1 ml/min～2.5 ml/min；所述检测器为紫外检测器时，检测波长为200～400nm。

6.根据权利要求1所述的检测重组水痘-带状疱疹疫...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟和平，樊钒，贾亚兴，曾异征，韩炼，张丽莺，刘艳玉，张前露，文彬，李文凤，刘颖，吴静，凌浩夏，张甜甜，孙巍，
申请(专利权)人：成都欧林生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：