一种亳白芍自交不亲和株系筛选方法及鉴别引物在该筛选中的应用技术

技术编号:46587295 阅读:0 留言:0更新日期:2025-10-10 21:23
本发明专利技术公开了一种亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于包括以下步骤:步骤一:提取亳白芍植株的基因组DNA;步骤二:进行PCR扩增反应;鉴别引物:5'ACTGGTGGAACGCAGGAAAA3'和5'TCAAGTGTCACCTTCCTCGC3';PCR反应体系:在离心管中进行,反应体系包括PCR缓冲液,二氯化镁,脱氧核糖核苷三磷酸,鉴别引物,高保真Taq DNA聚合酶,模板,无菌超纯水,将离心管置PCR仪,设置PCR反应参数;步骤三:分析PCR扩增产物,根据产物的特征判断亳白芍植株是否为自交不亲和株系;该方法简易,可靠切高效,可以在苗期从分子水平进行样品筛选。同时公开了上述鉴别引物在亳白芍自交不亲和株系筛选中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及芍药自交不亲和引物设计的,具体涉及一种亳白芍自交不亲和株系筛选方法及鉴别引物在该筛选中的应用


技术介绍

1、亳白芍属药用白芍中的上品,因个大、色白、粉足、气香及加工精致备受国内外商家喜爱,是亳州的特色药材,同时也是安徽四大名药之一。目前亳白芍繁殖方式主要分为两种:一种是在亳白芍采收时的老根进行分株繁殖,是正宗的亳白芍,但长年多代的无性繁殖,导致亳白芍品种退化严重,出现植株矮小、抗病虫害能力低、易受真菌感染等品质退化问题,严重影响了药材的质量和产量;另一种繁殖方法是直接从野外采收野生白芍的种子,进行繁殖,但其异花授粉率较低,结实率不到1%,植株及根品质表现混杂。这些生产问题,造成了亳州白芍药材有效成分的不稳定、不可控,严重影响安徽名药“亳白芍”道地药材的未来发展。有性繁殖是恢复品种的重要手段。但根据研究人员多年观察,亳白芍存在严重的自交不亲和问题,导致其很难自然授粉成功,具体原因为亳白芍长期以根部芽头进行营养繁殖,导致其有性生殖器官退化,自花授粉无法结实,存在严重的高世代自交不亲和现象。

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【技术保护点】

1.一种亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于:步骤2)、所述十六烷基三甲基溴化铵提取缓冲液为按质量体积比计(1-3)%十六烷基三甲基溴化铵提取缓冲液;所述水浴锅中保温时间为30分钟-60分钟。

3.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于:步骤3)、所述氯仿和异丙醇混合液的比例为按体积比(20-30):1,所述离心条件为转速(10000-12000)rpm,离心时间通常为5分钟-10分钟。

4.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征...

【技术特征摘要】

1.一种亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于:步骤2)、所述十六烷基三甲基溴化铵提取缓冲液为按质量体积比计(1-3)%十六烷基三甲基溴化铵提取缓冲液;所述水浴锅中保温时间为30分钟-60分钟。

3.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于:步骤3)、所述氯仿和异丙醇混合液的比例为按体积比(20-30):1,所述离心条件为转速(10000-12000)rpm,离心时间通常为5分钟-10分钟。

4.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株系筛选方法,其特征在于步骤4)、静置条件为4℃-10℃温度下静置20分钟-30分钟;所述离心条件为在转速为(9000-11000)rpm下离心。

5.根据权利要求1所述的亳白芍自交不亲和株...

【专利技术属性】
技术研发人员:李刚刘耀武陈娜孟肖龚道锋段伟伟李梦刘凯马梓萌
申请(专利权)人:亳州职业技术学院
类型:发明
国别省市:

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