脂肪酶突变体及其编码基因、表达质粒和应用制造技术

本发明专利技术属于生物酶领域，具体涉及脂肪酶突变体及其编码基因、表达质粒和应用，其中，所述的脂肪酶突变体为具有在SEQ ID NO.1所示的野生氨基酸序列中存在M81C、F329R中的至少一种突变的氨基酸序列。本发明专利技术创新地在白地霉Y162脂肪酶GCL蛋白序列（野生氨基酸序列）的81位的Met突变为Cys（M81C）和/或329位的Phe突变为Arg（F329R）；如此能够有效改善突变体的酶活、稳定性等性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶领域，具体涉及脂肪酶突变领域。

技术介绍

1、脂肪酶（lipase，ec3.1.1.3）作为一种高效的生物催化剂，其核心催化特性在于能够高特异性地催化酯解反应，这一过程不仅涵盖水解、醇解和酸解等基础反应类型，还可驱动酯合成以及酯交换等复杂转化过程。从作用机制来看，脂肪酶通过 “底物诱导契合” 模式激活催化三联体，在油水界面展现出显著的 “界面激活” 效应，这一特性使其在食品加工、生物柴油生产、手性药物合成等工业领域具有不可替代的应用价值。

2、随着合成生物学的快速发展，科学家们开始探索利用大肠杆菌和毕赤酵母等微生物系统进行脂肪酶的异源表达。这些表达系统因其高效性和可操作性而逐渐受到关注，为脂肪酶的大规模生产和应用提供了新的途径。然而，尽管毕赤酵母表达系统因其高效表达能力和对复杂蛋白的正确折叠能力而被广泛应用于重组蛋白的生产，但该系统在实际应用中也面临一些挑战。例如，某些脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达水平可能较低，影响了目标蛋白的产量；蛋白在表达过程中可能会发生错误折叠，导致活性降低或形成包涵体，增加了后续纯化的难度；此外，宿主细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种脂肪酶突变体，其特征在于：为具有在SEQ ID NO.1所示的野生氨基酸序列中存在M81C、F329R中的至少一种突变的氨基酸序列。

2.如权利要求 1 所述的脂肪酶突变体，其特征在于：为具有SEQ ID NO.3 所示的氨基酸序列。

3.如权利要求1或2所述的脂肪酶突变体，其特征在于：为具有在SEQ ID NO.1所示的野生氨基酸序列中存在M81C和F329R突变的多拷贝氨基酸序列。

4.一种权利要求1~3任一项所述的脂肪酶突变体的编码基因，其特征在于：为具有SEQID NO.4的基因序列。

5.一种脂肪酶突变体的表达质粒，其特征...

【技术特征摘要】

1.一种脂肪酶突变体，其特征在于：为具有在seq id no.1所示的野生氨基酸序列中存在m81c、f329r中的至少一种突变的氨基酸序列。

2.如权利要求 1 所述的脂肪酶突变体，其特征在于：为具有seq id no.3 所示的氨基酸序列。

3.如权利要求1或2所述的脂肪酶突变体，其特征在于：为具有在seq id no.1所示的野生氨基酸序列中存在m81c和f329r突变的多拷贝氨基酸序列。

4.一种权利要求1~3任一项所述的脂肪酶突变体的编码基因，其特征在于：为具有seqid no.4的基因序列。

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【专利技术属性】
技术研发人员：王钰，张沁强，王思澄，
申请(专利权)人：湖南麦肯宁生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：