【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、尽管是成熟的技术，但合成长度大于200个核苷酸的dna链还是非常困难，并且大多数dna合成公司仅提供至多120个核苷酸。相比之下，普通的蛋白质编码基因为约2000至3000个核苷酸，并且普通的真核基因组的核苷酸数量以数十亿计。因此，现今所有主流基因合成公司均依赖于‘合成和拼接’技术的变型方案，其中合成重叠的40至60个核苷酸的片段并将其通过pcr拼接在一起(参见young,l.et al.(2004)nucleic acid res.32,e59)。
技术实现思路
1、本文中提供了可用于产生从头合成dna分子(synthetic de novo dna molecule)的组合物和方法。一个实施方案提供了合成单链dna片段的方法，其包括：a)使abik和/或abi-p2酶与核苷酸接触，其中酶与核苷酸形成复合物；b)从a)中去除任何未结合的核苷酸；c)通过使b)中的酶/核苷酸与另一核苷酸接触来从与b)中的酶/核苷酸结合的核苷酸的3’端构建单链dna片段；d)从c)中去除任何未...
【技术保护点】
1.合成单链DNA片段的方法，其包括：
2.权利要求1所述的方法，其中所述酶是AbiK。
3.权利要求1或2所述的方法，其中所述AbiK酶具有SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:12、SEQID NO:22至39之一所提供的氨基酸序列，或者与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:22至39具有70％同一性，或者与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:22至39相比具有至少约0.5的模板建模(TM)值。
4.权利要求1所述的方法，其中所述酶是Abi-P2。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.合成单链dna片段的方法，其包括：
2.权利要求1所述的方法，其中所述酶是abik。
3.权利要求1或2所述的方法，其中所述abik酶具有seq id no:2、seq id no:12、seqid no:22至39之一所提供的氨基酸序列，或者与seq id no:2、seq id no:12或seq id no:22至39具有70％同一性，或者与seq id no:2、seq id no:12或seq id no:22至39相比具有至少约0.5的模板建模(tm)值。
4.权利要求1所述的方法，其中所述酶是abi-p2。
5.权利要求1或4所述的方法，其中所述abi-p2酶具有seq id no:4、seq id no:5、seqid no:7、seq id no:9、seq id no:11中提供的氨基酸序列，或者与seq id no:4、seq idno:5、seq id no:7、seq id no:9或seq id no:11具有70％同一性，或者与seq id no:4、seq id no:5、seq id no:7、seq id no:9或seq id no:11之一相比具有至少约0.5的模板建模(tm)值。
6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述核苷酸与可逆链核苷酸终止剂结合。
7.权利要求6所述的方法，其中所述可逆链核苷酸终止剂包含至少一种3’-o-封闭的可逆终止剂和/或3’-未封闭的可逆终止剂。
8.权利要求6所述的方法，其中所述可逆链核苷酸终止剂包含以下中的至少一种：
9.权利要求6至8中的一项所述的方法，其中在去除任何未结合的核苷酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：塞特·希普曼，克里斯蒂娜·帕尔卡，
申请(专利权)人：J·大卫格莱斯顿研究所根据J·大卫格莱斯顿遗嘱的遗嘱信托，
类型：发明
国别省市：
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