一种提高杆状病毒系统生产重组腺相关病毒的方法技术方案

本发明专利技术公开了一种提高杆状病毒系统生产重组腺相关病毒的方法，即通过控制重组杆状病毒的代数、感染方式和sf9细胞密度，将不去除细胞的第三代包含AAV基因组的重组杆状病毒液感染sf9细胞，细胞密度为2.5‑4.0×10⁶ 细胞/ml时，可以进一步提高rAAV的产量，为神经科学研究、疾病模型建立和基因治疗等领域的降本增效提供了更好的技术支撑，具有广泛的应用价值和市场前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病毒载体，具体涉及一种提高杆状病毒系统生产重组腺相关病毒的方法。

技术介绍

1、基于重组腺相关病毒(raav)的基因递送载体，在神经环路结构与功能解析以及基因治疗等领域得到广泛应用，raav载体是最具潜力和最有前景的治疗工具之一。目前已有8款基于raav载体的基因药获批上市，其平均售价高达100万美元以上。如此昂贵的价格给患者带来巨大的经济负担，其主要原因是研发和生产成本太高。

2、目前生产raav病毒主要采取三质粒共转染贴壁培养的hek-293t方法，但在大规模生产时，质粒生产成本高，且需要大量的比较昂贵的转染试剂。利用杆状病毒系统制备raav，更易放大、产能更高且成本更低。然而，该方法仍存在较多变量，不利于下一步生产的灵活操作，用于生产raav病毒时，在产量上还有很大的提升空间。因此，有必要开发能够进一步提高杆状病毒生产raav病毒的新方法。

3、本专利技术设计了一种提高杆状病毒生产raav病毒的新方法，进一步提高了raav病毒的产能，为神经科学研究、疾病模型建立和基因治疗等提供了更好的技术支撑，具有广泛的应用价值本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高杆状病毒系统生产重组腺相关病毒的方法，其特征在于，包括以下方法：将含有腺相关病毒基因组的重组杆粒DNA转染Sf9昆虫细胞，收集上清获得P1代重组杆状病毒；用所述P1代重组杆状病毒感染Sf9昆虫细胞，收集上清获得P2代重组杆状病毒，再感染Sf9昆虫细胞，收集包括Sf9昆虫细胞的培养液，即为P3代重组杆状病毒；将所述P3代重组杆状病毒感染Sf9昆虫细胞生产重组腺相关病毒。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，P3代重组杆状病毒感染时，所述Sf9昆虫细胞的密度为2.5-4.0×106 细胞/ml。

【技术特征摘要】

1.一种提高杆状病毒系统生产重组腺相关病毒的方法，其特征在于，包括以下方法：将含有腺相关病毒基因组的重组杆粒dna转染sf9昆虫细胞，收集上清获得p1代重组杆状病毒；用所述p1代重组杆状病毒感染sf9昆虫细胞，收集上清获得p2代重组杆状病毒，再感染sf9昆虫细胞，...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，
申请(专利权)人：布林凯斯武汉生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：