使用二硫代酯和硫代氨基甲酰基氨基酸反应性基团的单分子肽测序制造技术

技术编号:46313710 阅读:6 留言:0更新日期:2025-09-05 18:47
本公开提供了可用于通过使用独特的测序试剂对蛋白质进行单分子测序的试剂和方法。本文所述的试剂和方法在温和条件下提供高通量单分子肽和蛋白质测序,从而允许复杂生物系统的高分辨率研究。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍

1、蛋白质在细胞水平上发挥着至关重要的作用,执行着各种不可或缺的功能。具有量化和鉴定蛋白质所需的技术对于了解它们对生物功能的贡献至关重要。蛋白质组学的进步已落后,而dna测序则迅速推进了基因组学的研究,这主要是由于允许高通量测序的技术。目前可用于研究蛋白质的方法包括质谱法、edman测序和免疫组织化学。

2、质谱法(ms)使得能够基于可以通过生物信息学方式映射回基因组数据库的肽片段的质荷比进行蛋白质鉴定和量化。然而,尽管取得了重大进展,但ms尚未量化来自生物系统的一整套蛋白质。ms表现出对全蛋白质的阿托摩尔(attomole)检测灵敏度和分级后的亚阿托摩尔(subattomole)灵敏度。然而,占哺乳动物蛋白质表达约10%的功能上重要的低拷贝数蛋白质仍未被检测到。

3、edman降解允许顺序和选择性地移除单个n-末端氨基酸,随后通过hplc(高效液相色谱法)对其进行鉴定。edman蛋白测序使用异硫氰酸苯酯(pitc)缀合至n-末端氨基酸,然后在酸和热处理时,移除pitc标记的n-末端氨基酸来移除第一n-末端氨基酸以用于鉴本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种式I的测序试剂:

2.如权利要求1所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团共价连接至或被配置为共价连接至聚合物。

3.如权利要求2所述的测序试剂,其中所述聚合物包括聚乙二醇(PEG)。

4.如权利要求2或3所述的测序试剂,其中所述聚合物包括脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)。

5.如权利要求2-4中任一项所述的测序试剂,其中所述聚合物共价连接或被配置为共价连接至表面。

6.如权利要求1-5中任一项所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团共价连接或被配置为共价连接至表面结合的接头。

7.如权利要求6所述的测...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种式i的测序试剂:

2.如权利要求1所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团共价连接至或被配置为共价连接至聚合物。

3.如权利要求2所述的测序试剂,其中所述聚合物包括聚乙二醇(peg)。

4.如权利要求2或3所述的测序试剂,其中所述聚合物包括脱氧核糖核酸(dna)或核糖核酸(rna)。

5.如权利要求2-4中任一项所述的测序试剂,其中所述聚合物共价连接或被配置为共价连接至表面。

6.如权利要求1-5中任一项所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团共价连接或被配置为共价连接至表面结合的接头。

7.如权利要求6所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团共价连接至所述表面结合的接头,并且其中所述表面结合的接头连接至表面。

8.如权利要求6或7所述的测序试剂,其中所述表面结合的接头包含乙基。

9.如权利要求6或7所述的测序试剂,其中所述表面结合的接头包含丙基。

10.如权利要求6或7所述的测序试剂,其中所述表面结合的接头包含核酸分子。

11.如权利要求1-10中任一项所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团包括:

12.如权利要求1-10中任一项所述的测序试剂,其中所述第二反应性基团包含点击化学部分。

13.如权利要求12所述的测序试剂,其中所述点击化学部分是叠氮化物、炔、二苯并环辛炔(dbco)、四嗪或反式环辛烯(tco)。

14.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括:

15.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括:

16.如权利要求15所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括:

17.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括:

18.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括硫代乙酰基。

19.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括硫代苯甲酰基。

20.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括n-硫代苯甲酰基琥珀酰亚胺的衍生物。

21.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括氰甲基二硫代苯甲酸酯的衍生物。

22.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括:

23.如权利要求1-13中任一项所述的测序试剂,其中所述第一反应性基团包括

24.如权利要求1-23中任一项所述的测序试剂,其中l1包括可切割接头。

25.如权利要求24所述的测序试剂,其中所述可切割接头包括二硫键、腙、包含切割位点的dna分子、可被酶切割的肽或去点击化学部分。

26.如权利要求25所述的测序试剂,其中所述可切割接头包括腙。

27.如权利要求24...

【专利技术属性】
技术研发人员:约书亚·扬·辛明·杨贾伊·普拉卡什阿斯马莫·瓦西丹尼尔·马萨奥·伊斯坦迪安
申请(专利权)人:格里菲克生物技术公司
类型:发明
国别省市:

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