一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器制备方法及其应用，本发明专利技术借助于Hg(Ⅱ)‑TMB系统及Hg(II)超级适配体，发展了一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器。首先，单一的Hg(Ⅱ)可以在酸性条件下将无色的TMB氧化成蓝色oxTMB，而末端脱氧核酸转移酶TdT催化延长形成的富T DNA可以竞争Hg(II)阻碍这一催化作用，这些相互作用与Hg(II)浓度和TdT活性息息相关，基于在652nm处紫外吸收强度的大小和溶液的颜色变化实现对Hg(Ⅱ)、TdT及其抑制剂的活性检测，然后利用智能手机建立目标物浓度与B/G值之间的线性关系，最后应用于循环肿瘤细胞中TdT含量的检测。这种可视化方法简单、便携，非常适合于现场临床分析，具有非常大的潜在应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种可视化定量分析方法及其应用，特别是涉及基于超级适配体及hg(ii)催化作用的末端脱氧核酸转移酶(tdt)紫外比色分析方法，最终导入智能手机通过rgb输出实现目标物的可视化定量分析，并将其用于循环肿瘤细胞(ctcs)中tdt的分析检测，属于分析化学中的化学生物传感。

技术介绍

1、随着科学技术的快速发展，电化学法、电感耦合等离子体质谱法、原子吸收光谱法、高效液相色谱法等高灵敏检测技术已广泛应用于分析检测领域。但这些方法所使用的大型昂贵的仪器设备以及复杂的预处理限制了其在野外，特别是在资源不足的偏远地区的应用。装置简单、成本低、并且可快速有效检测目标物的传感器是很好的代替候选者。基于人们对颜色变化的敏感性，科研人员已开发了通过肉眼就可对目标物进行定量或半定量分析的可视化传感器。可视化传感器由于具有无需昂贵或复杂的仪器辅助，成本低、操作简单方便、信号响应快速等特点，在疾病诊断、食品安全、环境监测等领域得到广泛应用。

2、hg(ⅱ)具有很强的毒性，它是一种不可降解的持久性的污染物，如若进入水生食物链，可以通过循环在生态系统中循环，可以本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器制备方法及其应用，其机理如下：本专利技术借助于Hg(Ⅱ)-TMB系统及Hg(Ⅱ)的超级适配体，发展了一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器。首先，单一的Hg(Ⅱ)可以在酸性条件下将无色的TMB氧化成蓝色oxTMB，而末端脱氧核酸转移酶TdT催化延长形成的富TDNA可以竞争Hg(II)阻碍这一催化作用，这些相互作用与Hg(II)浓度和TdT活性息息相关，因此，本专利基于在652nm处紫外吸收强度的大小和溶液的颜色变化实现对Hg(Ⅱ)、TdT及其抑制剂的活性检测，然后基于目标物浓度改变引起的溶液颜色变化输入智能手机，建立目标物...

【技术特征摘要】

1.一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器制备方法及其应用，其机理如下：本发明借助于hg(ⅱ)-tmb系统及hg(ⅱ)的超级适配体，发展了一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器。首先，单一的hg(ⅱ)可以在酸性条件下将无色的tmb氧化成蓝色oxtmb，而末端脱氧核酸转移酶tdt催化延长形成的富tdna可以竞争hg(ii)阻碍这一催化作用，这些相互作用与hg(ii)浓度和tdt活性息息相关，因此，本专利基于在652nm处紫外吸收强度的大小和溶液的颜色变化实现对hg(ⅱ)、tdt及其抑制剂的活性检测，然后基于目标物浓度改变引起的溶液颜色变化输入智能手机，建立目标物浓度与b/g值之间的线性关系，实现智能化分析，最后应用于循环肿瘤细胞中tdt含量的检测。此方法不需要化学纳米材料，也不需要昂贵的实验试剂和仪器，操作简便且可视化，还可以通过智能手机实现微小变化的分析，具有非常大的潜在应用价值。

2.根据权利要求1所述一种循环肿瘤细胞内末端脱氧核酸转移酶的可视化传感器制备方法及其应用，其特征在于：本发明借助于hg(ⅱ)...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢彦美，赵兴宇，陈嘉运，胡宇芳，谢洪珍，程彩招，董文俊，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：