一种基于T4-蛋白的三聚体疫苗平台及其应用制造技术

本申请提供了一种疫苗，所述疫苗包含：1)由2‑8拷贝噬菌体T4纤维蛋白C末端多肽组成的肽寡聚体和一种或多种抗原蛋白；或2)项1)的编码核酸，其中，所述肽寡聚体中2‑8拷贝噬菌体T4纤维蛋白C末端多肽以串联形式通过化学键直接连接或通过肽连接子使每个噬菌体T4纤维蛋白C末端多肽彼此连接，并且所述肽寡聚体和所述抗原蛋白之间通过化学键直接连接或通过肽连接子连接。本申请提供的双T4‑病毒抗原疫苗平台中，其抗原是可以多组分变化的，即可以形成三聚体的抗原，这增强了疫苗平台使用的灵活性和适用范围，其双T4结构能增强三聚体蛋白的形成，增强免疫时效。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及基因工程和生物医学，具体涉及一种基于t4-蛋白的三聚体疫苗平台及其应用。

技术介绍

1、世界范围内疫苗主要是基于灭活或减毒病原体的疫苗、重组蛋白疫苗和核酸疫苗。由于传统疫苗的生产周期较长，无法对重大传染病的出现做出快速反应，也无法生产出能够诱发强烈抗体和免疫反应的疫苗。mrna疫苗经过30年的发展，比传统疫苗高效且更容易适应，且mrna疫苗在体内快速表达抗原进而引发快速免疫反应使得该技术得到更广泛的应用。

2、流感病毒表面糖蛋白包含血凝素(ha)、神经氨酸酶(na)和膜蛋白(m2)。ha是流感主要表面糖蛋白(80％)，形成的三聚体包含受体结合位点和中和抗体识别表位，其次是四聚体na(17％)和m2(16-20分子/病毒粒子)。ha蛋白在流感病毒表面以三聚体形式存在，模拟这种天然结构有助于诱导更强、更广谱的免疫反应。稳定的三聚体结构能有效展示完整和正确的抗原表位，这些表位是中和抗体识别和结合的关键，而正确的抗原表位展示可以提高疫苗的免疫原性，能够更有效地呈递给免疫系统，从而更好地诱导t细胞和b细胞反应，形成更持久和广谱的免疫记忆有助于开本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种疫苗，所述疫苗包含：

2.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述肽寡聚体的N末端与所述抗原蛋白的C末端连接。

3.根据权利要求1或2所述的疫苗，其中所述肽寡聚体的C末端与所述抗原蛋白的N末端连接。

4.根据权利要求1-3任一项所述的疫苗，其中，所述抗原蛋白为在天然状态下具有三聚体空间结构的病毒抗原蛋白或细菌抗原蛋白，任选地，所述抗原蛋白为选自如下的一种或多种：新冠病毒Spike蛋白、流感病毒HA蛋白或其功能性片段或其功能衍生物。

5.根据权利要求1-4任一项所述的疫苗，包含如下氨基酸序列或核苷酸序列中的一个或多个，所述氨基酸序列或核苷酸...

【技术特征摘要】

1.一种疫苗，所述疫苗包含：

2.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述肽寡聚体的n末端与所述抗原蛋白的c末端连接。

3.根据权利要求1或2所述的疫苗，其中所述肽寡聚体的c末端与所述抗原蛋白的n末端连接。

4.根据权利要求1-3任一项所述的疫苗，其中，所述抗原蛋白为在天然状态下具有三聚体空间结构的病毒抗原蛋白或细菌抗原蛋白，任选地，所述抗原蛋白为选自如下的一种或多种：新冠病毒spike蛋白、流感病毒ha蛋白或其功能性片段或其功能衍生物。

5.根据权利要求1-4任一项所述的疫苗，包含如下氨基酸序列或核苷酸序列中的一个或多个，所述氨基酸序列或核苷酸序列包含seq id no.1-62所示的序列，

6.根据权利要求1-5任一项所述的疫苗，所述肽连接子为刚性肽连接子、柔性肽连接子；优选地，所述肽连接子为(eaaak)n、(g)n、(gs)n、(xp)n、(ggggs)n或(gsa)n，其中，n为1-20、1-15、1-10、1-5、或1-3之间的任一正整数；更优选地，所述肽连接子选自gs、eaaak、eaaakeaaak、pa、gsagsa、ggasagg的一种或多种。

7.根据权利要求1-6任一项所述的疫苗，进一步包含佐剂，其中，所述佐剂为无机佐剂、有机佐剂、基于油的佐剂、细胞因子、微粒佐剂、病毒体、细菌佐剂、合成的佐剂、合成的多核苷酸佐剂和含有未甲基化的cpg二核苷酸的免疫刺激性寡核苷酸。

8.一种融合蛋白，包含2-8拷贝噬菌体t4纤维蛋白c末端多肽和一种或多种抗原蛋白，其中，所述2-8拷贝噬菌体t4纤维蛋白c末端多肽以串联形式通过化学键直接连接或通过肽连接子使每个噬菌体t4纤维蛋白c末端多肽彼此连接，并且所述c末端多肽和所述抗原蛋白之间通过化学键直接连接或通过肽连接子连接。

9.根据权利要求8所述的融合蛋白，其中所述噬菌体t4纤维蛋白c末端多肽的n末端与所述抗原蛋白的c末端连接。

10.根据权利要求8-9任一项所述的融合蛋白，其中所述噬菌体t4纤维蛋白c末端多肽的c末端与所述抗原蛋白的n末端连接。

11.根据权利要求8-10任一项所述的融合蛋白，其中，所述抗原蛋白为在天然状态下具有三聚体空间结构的病毒抗原蛋白或细菌抗原蛋白，任选地，所述抗原蛋白为选自如下的一种或多种：新冠病毒spike蛋白、流感病毒ha蛋白或其功能性片段或其功能衍生物。

12.根据权利要求8-11任一项所述的融合蛋白，其包含如下氨基酸序列中的一个或多个：所述氨基酸序列包含seq id no.1-57所示的序列，

13.根据权利要求8-12任一项所述的融合蛋白，其中所述肽连接子为刚性肽连接子、柔性肽连接子；优选地，所述肽连接子为(eaaak)n、(g)n、(gs)n、(xp)n、(ggggs)n或(gsa)n，其中，n为1-20、1-15、1-10、1-5、或1-3之间的任一正整数；更优选地，所述肽连接子为选自gs、eaaak、eaaakeaaak、pa、gsagsa、ggasagg中的一种或多种。

14.编码权利要求8-13任一项所述的融合蛋白的核酸，任...

【专利技术属性】
技术研发人员：程国锋，王世亮，田洋，杨成勇，
申请(专利权)人：杭州浩博医药有限公司，
类型：发明
国别省市：